脂多糖对人肺微血管内皮细胞骨架及TNF-α和IFN-γ表达的影响

目的探讨脂多糖(LPS)直接诱导人肺微血管内皮细胞(HPMVEC)后细胞骨架的改变,肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)mRNA的表达及细胞培养上清液中TNF-α、IFN-γ的表达水平的改变。方法 HPMVEC生长至80%以上融合时,加入LPS以500 ng/mL浓度刺激细胞分别至0、4、6、8 h,经鬼笔环肽染色后采用激光共聚焦显微镜观察HPMVEC细胞骨架的变化。至预定时相点离心收集培养液上清液,利用实时荧光定量RT-PCR法检测TNF-α、IFN-γmRNA的表达,采用ELISA方法测定细胞培养上清液中TNF-α、IFN-γ的表达水平,并进行统计学分析。结果 LPS刺激培养后,8 h组细胞开始出现细胞骨架改变;4 h组TNF-α、IFN-γmRNA表达与0 h组差异无统计学意义(P>0.05),6 h组TNF-α、IFN-γmRNA表达高于0 h组(P<0.05),8 h组TNF-α、IFN-γ表达高于0 h组(P<0.05);4 h组细胞培养上清液TNF-α、IFN-γ的表达水平与0 h组比较差异无统计学意义(P>0.05),6 h组细胞培养上清液TNF-α、IFN-γ的表达水平高于0 h组(P<0.05),8 h组细胞培养上清液TNF-α、IFN-γ的表达水平高于0 h组(P<0.05)。结论细菌致病因子LPS能直接刺激HPM-VEC使细胞结构发生改变,同时影响细胞因子的分泌,使促炎因子TNF-α和IFN-γ分泌升高,参与肺损伤。这可能是LPS发挥其毒性作用诱发急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征的一个重要途径。

重组人白介素10对低氧条件下人单核细胞凋亡变化规律的影响

目的研究低氧条件下,重组人白介素10(rhIL-10)对人单核细胞白细胞(THP-1)凋亡和caspase-3活性变化规律的影响。方法悬浮培养THP-1细胞株,分为正常对照组(常规培养);低氧(5%O2,5%CO2,90%N2)培养THP-1,rhIL-10以10、50、100 ng/mL的浓度干预,分为低氧对照组,rhIL-10低、中、高剂量干预组;培养12、24、48、72 h,离心收集细胞,化学比色法检测细胞核内caspase-3活性,48 h核荧光染色荧光显微镜观察,分析荧光强度,行统计学分析。结果凋亡蛋白caspse-3相对活性,12 h各组差异无统计学意义(P>0.05);24 h低氧对照组及低、中剂量rhIL-10干预组与正常对照组比较升高(P<0.05),高剂量rhIL-10干预组与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),rhIL-10干预各组与低氧对照组比较降低(P<0.05);48 h低氧对照组和rhIL-10干预低、中、高剂量组与正常对照组比较升高(P<0.05),低、中、高剂量rhIL-10干预组与低氧对照组比较明显降低(P<0.05);72 h低氧对照组、低剂量rhIL-10干预组与正常组比较升高(P<0.05),其余各组差异无统计学意义(P>0.05);缺氧凋亡峰值见于48 h。取48 h行各组凋亡细胞核Hoechst荧光染色,灰度值分析低氧对照组和低、中、高剂量rhIL-10干预组与正常对照组比较升高(P<0.05);低、中、高剂量rhIL-10干预组与低氧对照组比较降低(P<0.05)。结论缺氧可促进单核细胞凋亡,rhIL-10可一定程度地抑制人单核细胞凋亡,这些变化可能与各器官急性缺氧性疾病有密切相关性。

白藜芦醇对溃疡性结肠炎小鼠外周血和肠系膜淋巴结CD4^+CD25^+Foxp3^+调节T淋巴细胞表达的影响

目的:探讨CD4+CD25+Foxp3+Treg在葡聚糖硫酸钠(DSS)诱发的UC小鼠模型中的变化情况以及白藜芦醇对溃疡性结肠炎(UC)治疗的可能机制.方法:采用DSS制作UC小鼠模型,小鼠随机分成4组:正常对照(NC)组,模型(MD)组,低剂量(RLD)、高剂量(RHD)白藜芦醇治疗组.造模7d后停用造模药物,给予白藜芦醇后继续治疗7d.14d后,处死小鼠,结肠行HE染色和病理学评分(HDS);流式细胞仪检测外周血和肠系膜淋巴细胞CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占CD4+T淋巴细胞的百分率.结果:MD组HDS明显高于NC组(P<0.05);RLD和RHD组的HDS明显低于MD组(0.88±0.32,0.23±0.20vs1.39±0.21,均P<0.05);RHD组的HDS明显低于RLD组(P<0.05).RLD和RHD组结肠外周血和肠系膜淋巴细胞CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占CD4+T淋巴细胞的百分率明显高于MD组(均P<0.05),低于NC组(均P<0.05);RHD组外周血和肠系膜淋巴细胞CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占CD4+T淋巴细胞的百分率高于RLD组(均P<0.05).结论:白藜芦醇可以提高CD4+CD25+Foxp3+Treg数量,调节机体和肠道免疫功能,对UC的治疗发挥了一定的作用.

超未成熟儿高酪氨酸血症I型1例

患儿 男．出生后1h＋．因“胎龄26周，生后1＋h”入院。患儿为第3胎第1产孕26周臀位助产娩出，出生体重986g。无早破水，羊水清，胎盘、脐带正常。无宫内窘迫史，有产后窒息抢救史，经复苏处理，于气管插管正压通气下转入NICU。其母自然流产1次。

广东省26家三甲医院新生儿科超未成熟儿与超低出生体重儿的住院费用分析

目的探讨广东省新生儿科出院的超未成熟儿(extremely preterm infants,EPI)与超低出生体重儿(extremely low birth weight infants,ELBWI)的住院费用情况及其影响因素。方法收集广东省26家三甲医院新生儿科于2013-2017年出院的EPI与ELBWI的住院情况和住院费用,并按救治结局、出生胎龄、出生体质量、出院年份、出院地区和医院类型等进行分组,分别计算和比较各组的住院天数、日均住院费用和住院总费用。结果共2392例EPI与ELBWI进入分析,整体患儿的中位住院天数为52(4,73)d,中位日均住院费用为2060(1441,3404)元,中位住院总费用为78044(20176,134440)元。死亡/转院组(n=1117)与存活/非转院组(n=1275)比较,存活/非转院组的中位住院天数和中位住院总费用均大于死亡/转院组(Z=-35.600、-29.394,均P<0.001),但中位日均住院费用低于死亡/转院组(Z=-24.511,P<0.001)。在存活/非转院组中,中位日均住院费用、中位住院总费用与出院年份呈正相关(r=0.302、0.259,均P<0.001),各年的中位住院总费用分别相当于当年常住居民人均可支配收入的3.56、3.74、4.11、4.10和4.05倍;中位住院天数、中位住院总费用分别与出生胎龄、出生体质量呈负相关(均P<0.001),中位日均住院费用仅与出生胎龄呈负相关(P<0.001);中位日均住院费用、中位住院总费用与出院医院所处地区的经济发展水平呈正相关(r=0.356、0.392,均P<0.001);综合性医院的中位日均住院费用、中位住院总费用均低于专科医院(Z=-2.230、-3.373,P=0.026、P<0.001)。结论EPI与ELBWI的救治费用与救治结局、出生胎龄、出生体质量、出院年份、出院地区、医院类型等因素相关。

功能性超声心动图参数在新生儿脓毒症休克中的临床应用价值

目的探讨功能性超声心动图参数在新生儿脓毒症休克中的临床应用价值。方法纳入72例脓毒症休克新生儿,根据脓毒症休克评分最高值,分为非难治性组(42例)与难治性组(30例),比较2组患儿临床资料、实验室检查结果、功能性超声心动图参数等资料,采用受试者工作特征曲线评价功能性超声心动图参数对脓毒症休克新生儿死亡的预测效能。结果难治性组患儿心输出量和心脏指数(cardiac index,CI)低于非难治性组,而平均动脉压与CI比值(mean arterial pressure to cardiac index ratio,MAP/CI)高于非难治性组(均P<0.05)。CI与MAP/CI对脓毒症休克相关死亡的预测界值分别为2.6 L/(min·m^(2))(灵敏度为79%,特异度为83%,曲线下面积为0.841,P<0.05)和11.4(灵敏度为83%,特异度为73%,曲线下面积为0.769,P<0.05);CI对脓毒症休克新生儿28 d内全因死亡的预测界值为2.9 L/(min·m^(2)),灵敏度和特异度均为69%,曲线下面积为0.717(P<0.05)。结论CI与MAP/CI有助于临床医生早期预测脓毒症休克新生儿的死亡。

血小板相关指标对超低出生体质量儿动脉导管未闭的早期预测价值

目的分析血小板相关指标对于超低出生体质量儿(ELBW)动脉导管未闭(PDA)的早期预测价值。方法回顾分析2013年6月至2016年6月收治的79例ELBW患儿,其中无PDA48例(nPDA组),PDA 31例(PDA组);31例PDA患儿中,无血流动力学意义的PDA(nhsPDA组)17例,有血流动力学意义的PDA(hsPDA组)14例。比较nPDA组与PDA组,以及nhsPDA组与hsPDA组的临床特征及血小板相关指标,采用多元logistic回归模型分析各因素对PDA发生的影响。采用ROC曲线分析相关指标对PDA的早期预测价值。结果与nPDA组相比较,PDA组胎龄小,男婴比例高,血小板分布宽度(PDW)小,差异有统计学意义(P均<0.05)。多元logistic回归分析提示PDW越低,发生PDA风险越大(OR=1.26,95%CI:1.05~1.52)。ROC曲线分析发现,PDW最佳诊断界值为13.4 GSD,对PDA早期预测灵敏度为67.74%,特异度为68.75%。hsPDA组胎龄小于nhsPDA组,剖宫产比例低于nhsPDA组,差异有统计学意义(P均<0.05),hsPDA组与nhsPDA组间血小板相关指标差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 PDW对ELBW的PDA具有一定的早期预测价值,伴PDW<13.4 GSD的ELBW,需高度警惕PDA。

超未成熟双胎儿临床救治结局及变化分析:一项广东省多中心回顾性研究

目的探讨广东省超未成熟双胎儿临床救治结局及变化趋势。方法回顾性选择2008年1月至2017年12月广东省26家三级甲等医院新生儿科入院的胎龄<28周双胎儿269对,按照入院年份分为前5年组和后5年组,双胎中以出生体重高低分为重婴和轻婴。收集孕母围生期和新生儿住院资料,分析前、后5年双胎儿存活率、并发症发生率的差异。结果后5年组超未成熟双胎儿、双胎中重婴、双胎中轻婴的重度窒息发生率、出生头围低于前5年组(P<0.05)。后5年组超未成熟双胎儿均死亡的比例低于前5年组,且后5年组双胎中重婴、双胎中轻婴的病死率低于前5年组(P<0.05)。后5年组双胎中重婴、双胎中轻婴肺出血、动脉导管未闭、脑室周围-脑室内出血、新生儿呼吸窘迫综合征的发生率均低于前5年组,支气管肺发育不良发生率高于前5年组(均P<0.05)。结论广东省26家三级甲等医院入院的胎龄<28周超未成熟双胎儿的存活率显著上升,且双胎内无论是重婴还是轻婴,发生重度窒息、肺出血、动脉导管未闭、脑室周围-脑室内出血、新生儿呼吸窘迫综合征的比例均明显下降,而发生支气管肺发育不良比例增加。伴随诊疗水平提升,未来需要由产前诊断、产科、新生儿科等组成多学科协作,共同制定科学的双胎妊娠管理策略。[中国当代儿科杂志,2022,24(1):33-40]

双胎输血综合征预后不良的影响因素分析

目的探讨分析双胎输血综合征(TTTS)所致预后不良的影响因素。方法收集2018年1月至2021年5月在广东省妇幼保健院新生儿科住院的TTTS患儿的临床资料,根据供体和受体分为供血组和受血组,根据预后结局分为预后不良组和预后良好组,并进行回顾性分析。结果共纳入86例有效病例,供血组和受血组在性别、出生胎龄、剖宫产、Apgar评分、肌酐最大值、低血压发生率、血管活性药物评分最大值方面比较差异均无统计学意义(均P>0.05);供血组的出生体质量、生后初始血红蛋白值分别为(1.39±0.45)kg、(159.90±27.95)g/L,均低于受血组的(1.67±0.48)kg、(173.75±29.73)g/L,差异均有统计学意义(均P<0.05),供血组小于胎龄儿的发生率高于受血组[38.1%(16/42)比4.5%(2/44)],差异有统计学意义(P<0.001);两组病例中新生儿呼吸窘迫综合征、支气管肺发育不良、动脉导管未闭、坏死性小肠结肠炎、早产儿视网膜病、败血症、心脏异常表现和脑损伤发生率比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。预后不良组与预后良好组中性别、剖宫产率、小于胎龄儿发生率、初始血红蛋白值、血肌酐最大值、Quintero分期和产前是否治疗的比较差异均无统计学意义(均P>0.05);两组中受血者与供血者比例及发生TTTS孕周比较差异均无统计学意义(均P>0.05);预后不良组的出生胎龄[(29.56±2.40)周]、出生体质量[(1.23±0.46)kg]、Apgar评分均低于预后良好组(均P<0.05),血管活性药物评分最大值高于预后良好组[7(29)比0(5)],差异有统计学意义(P<0.001);两组中支气管肺发育不良、早产儿视网膜病、坏死性小肠结肠炎、败血症的发生率比较差异均无统计学意义(均P>0.05),预后不良组中新生儿呼吸窘迫综合征[100.0%(19/19)]、动脉导管未闭[52.6%(10/19)]、急性肾损伤[22.1%(4/19)]、低血压[57.9%(11/19)]及心脏异常表现[63.2%(12/19)]的发生率均高于预后良好组,差异均有统计学意义(均P<0.05),其中心脏异常表现中的肺动脉高压、心功能不全、右向左分流、三尖瓣反流、二尖瓣反流的发生率明显升高。结论TTTS可导致新生儿预后不良,心脏异常表现及血流动力学异常与预后不良相关。

新生儿难治性脓毒性休克早期预测指标分析

目的探讨新生儿难治性脓毒性休克的早期预测指标。方法选择2020年7月至2021年12月广东省妇幼保健院新生儿重症监护病房收治的脓毒性休克新生儿进行回顾性分析,根据病程中的最高脓毒性休克评分(septic shock scores,SSS)分为难治组和非难治组,比较两组患儿围生期情况、诊断脓毒性休克时的实验室检查结果及血流动力学参数,并进行多因素logistic回归分析得出独立危险因素,并对独立危险因素进行受试者工作特征曲线分析,得出截断值作为脓毒性休克发生不良预后的早期预测指标。结果共纳入130例患儿,难治组54例,非难治组76例。与非难治组相比,难治组患儿诊断脓毒性休克时的pH、BE值、每搏指数、心输出量、心脏指数明显降低(P<0.05),平均动脉压与心脏指数比值(mean arterial pressure to cardiac index ratio,MAP/CI)[(12.7±5.2)比(8.8±2.9)]、SSS[床边式SSS:1(0,3)分比0(0,0)分;计算式SSS:4.4(1.3,19.2)分比1.3(1.2,1.4)分;改良版计算式SSS:16.7(3.4,20.6)分比2.6(1.8,4.0)分]明显升高(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,MAP/CI高是新生儿难治性脓毒性休克的独立危险因素,曲线下面积0.734,最佳截断值为11.6,敏感度62%,特异度87%,阳性预测值79%,阴性预测值77%;改良版计算式SSS高是新生儿脓毒性休克死亡的独立危险因素,曲线下面积0.845,最佳截断值为5.8,敏感度83%,特异度72%,阳性预测值21%,阴性预测值97%。结论MAP/CI升高(≥11.6)、改良版计算式SSS升高(≥5.8)可分别作为新生儿难治性脓毒性休克诊断及预测死亡的早期指标。

早产儿难治性脓毒性休克结局预测指标分析

目的探讨血管活性药物评分(vasoactive-inotropic score,VIS)、液体超负荷(fluid overload,FO)、血乳酸水平对早产儿难治性脓毒性休克结局的预测价值。方法选择2016年1月至2021年12月广东省妇幼保健院新生儿科诊断难治性脓毒性休克并需要使用氢化可的松治疗的早产儿进行回顾性分析,根据疾病转归分为预后良好组和预后不良组,并按不同胎龄进行分析,通过受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析氢化可的松治疗前VIS最大值、FO和血乳酸均值与难治性脓毒性休克患儿结局的关系,计算ROC曲线截点值,得出各指标对早产儿难治性脓毒性休克结局的预测效能。结果共纳入50例难治性脓毒性休克早产儿,预后良好组20例,预后不良组30例。两组胎龄<32周早产儿使用氢化可的松治疗前VIS最大值、FO和血乳酸均值比较,差异均无统计学意义(P>0.05);胎龄32~36周早产儿中预后不良组使用氢化可的松治疗前VIS最大值[(56.1±15.7)比(37.1±12.9)]、FO(%)[108.2(78.6,137.7)比55.5(10.3,100.7)]和血乳酸均值(mmol/L)[8.3(4.6,12.0)比4.8(-0.8,10.5)]均高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05),其中血乳酸均值ROC曲线下面积最大,截点值为4.1 mmol/L,约登指数为1.732。结论VIS、FO和乳酸水平不能判断极早产儿难治性脓毒性休克结局,但有助于中晚期早产儿的病情判断,其中血乳酸均值预测效能最佳。

血流动力学监测质量改进对脓毒性休克新生儿液体超负荷及预后的影响

目的探讨血流动力学监测质量改进对脓毒性休克新生儿液体超负荷(fluid overload, FO)及结局的影响。方法回顾性分析广东省妇幼保健院无创心排量监测及功能性心脏超声项目实施前后收治的脓毒性休克新生儿病例资料, 2018年1月至2019年12月为改进前组, 2020年1月至2021年12月为改进后组, 改进前组常规进行液体复苏, 经验性选择血管活性药物治疗, 改进后组根据血流动力学参数指标指导液体复苏和(或)使用血管活性药物。比较两组患儿休克后24 h、48 h、72 h的FO、扩容量、有创呼吸支持时间、血管活性药物评分、休克评分及相关并发症的发生率及全因死亡率。结果共纳入284例患儿, 改进前组136例, 改进后组148例;改进后组虽然胎龄、出生体重、发病时体重均低于改进前组(P<0.05), 但48 h、72 h的FO、72 h内扩容量、肺出血和脑室周围白质软化发生率低于改进前组[48 h FO(%):29.0(-11.3, 73.7)比52.5(11.3, 79.0), 72 h FO(%):8.6(-30.9, 67.2)比38.3(-8.5, 76.1), 72 h内扩容量(ml/kg):11.3(0.0, 34.1)比39.4(12.2, 67.5), 肺出血:12.2%(18/148)比23.5%(32/136), 脑室周围白质软化:2.7%(4/148)比8.1%(11/136)], 差异均有统计学意义(P<0.05);两组24 h的FO及其他并发症发生率和全因死亡率差异均无统计学意义(P>0.05)。两组中发生脑室周围白质软化、肺出血患儿的胎龄、出生体重比较, 差异无统计学意义(P>0.05)。结论血流动力学监测质量改进可有效改善脓毒性休克新生儿FO, 降低肺出血及脑室周围白质软化发生率。

应用激光共聚焦扫描显微镜技术检测缺氧人肺微血管内皮细胞内钙离子浓度动态变化

目的:探讨应用激光共聚焦扫描显微镜(LSCM)技术检测缺氧状态的人肺微血管内皮细胞(HPMVEC)内钙离子(Ca2+)浓度动态变化的价值。方法:HPMVEC常规培养,按观察时间点不同分为5个缺氧培养组(1h hyp组、2h hyp组、4h hyp组、6h hyp组和8h hyp组)以及1个对照组(0h con组)共6个组,每组设8个复孔,应用LSCM技术测定缺氧后HPMVEC内Ca2+浓度水平及随时间推移的变化。结果:LSCM技术显示HPMVEC内Ca2+的荧光强度1h hyp组与0h con组比较、2h hyp组与1h hyp组比较、4h hyp组与2h hyp组比较、6h hyp组与4h hyp组比较、8h hyp组与6h hyp组比较有显著差异(P<0.05)。线性回归分析结果显示Ca2+荧光强度与缺氧时间成正相关(r=0.969,P<0.01)。结论:HPMVEC内Ca2+浓度随缺氧时间增长而增高;LSCM在动态检测缺氧状态下HPMVEC内的Ca2+浓度变化中具有明显优势。

重组人白细胞介素-10对缺氧条件下人肺微血管内皮细胞凋亡的影响

目的研究低氧条件下,重组人IL-10(rhIL-10)对人肺微血管内皮细胞(HPMVEC)凋亡和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活性的影响。方法常规培养HPMVEC细胞株,分为5组:正常对照组(常规培养);缺氧对照组(50 mL·L-1CO2,950mL·L-1N2);缺氧培养并加入rhIL-10,并按rhIL-10剂量(10×103ng.L-1、50×103ng.L-1、100×103ng.L-1)分为rhIL-10低剂量干预组、rhIL-10中剂量干预组、rhIL-10高剂量干预组。培养4 h、12 h、24 h、48 h离心收集细胞,化学比色法检测细胞核内Caspase-3活性,24 h核荧光染色并在荧光显微镜下观察荧光强度,并进行统计学分析。结果 4 h,凋亡蛋白Caspase-3相对活性各组间无明显差异(P>0.05);12 h,缺氧对照组,rhIL-10低、中剂量干预组与正常对照组比较显著升高(Pa<0.05),rhIL-10高剂量干预组与正常对照组比较无明显差异(P>0.05),rhIL-10各剂量干预组与缺氧对照组比较显著降低(Pa<0.05);24 h,缺氧对照组、rhIL-10各剂量干预组与正常对照组比较显著升高(Pa<0.05),rhIL-10各剂量干预组与缺氧对照组比较明显降低(Pa<0.05);48 h,缺氧对照组和rhIL-10低剂量干预组与正常对照组比较显著升高(Pa<0.05),低、中、高剂量rhIL-10干预组与缺氧对照组比较明显降低(Pa>0.05);缺氧凋亡峰值见于24 h。24 h,各组行凋亡细胞核Hoechst荧光染色,缺氧对照组和rhIL-10低、中、高剂量干预组灰度值与正常对照组比较均显著升高(Pa<0.05);rhIL-10低、中、高剂量rhIL-10干预组与缺氧对照组比较显著降低(Pa<0.05)。结论缺氧可促进HPMVEC凋亡,rhIL-10可一定程度地抑制HPMVEC凋亡,这些变化可能与急性缺氧性各器官疾病密切相关。

双歧杆菌对溃疡性结肠炎小鼠外周血和肠系膜淋巴结CD4^+ CD25^+ Foxp3^+调节T细胞表达的影响

目的探讨双歧杆菌治疗溃疡性结肠炎与CD4+ CD25+ Foxp3+调节T细胞的相关可能机制。方法采用DSS制作UC小鼠结肠炎模型,随机分成3组:正常对照(NC)组,模型(MD)组,双歧杆菌治疗(BbT)组。造模7 d后,给予双歧杆菌后续治疗7 d。评估小鼠疾病活动指数(DAI),结肠行HE染色及病理学评分(HDS);流式细胞仪检测外周血和肠系膜淋巴细胞中表达CD4+ CD25+ Foxp3+的Treg细胞的百分比率。结果 BbT组的DAI明显低于模型组(P<0.05);MD组HDS明显高于正常组(P<0.05);BbT组的HDS明显低于模型组(P<0.05);模型组外周血和肠系膜淋巴细胞CD4+ CD25+ Foxp3+Treg细胞占CD4+T细胞的百分率明显低于正常组(P<0.05);BbT组结肠外周血和肠系膜淋巴细胞CD4+ CD25+ Foxp3+Treg细胞占CD4+T细胞的百分率明显高于模型组(P<0.05)。结论双歧杆菌可以提高CD4+ CD25+ Foxp3+Treg数量,调节机体和肠道免疫功能,对UC发挥了一定的治疗作用。

广东省不同地区新生儿胆红素脑病发病情况调查

目的了解广东省新生儿胆红素脑病发病率及地理分布特征。方法采用分层随机抽样调查法随机选取广东省设有新生儿科的二甲以上医院21家,收集选取医院新生儿科2014年在该院住院并按该医院诊断标准明确诊断胆红素脑病患儿的基本资料,包括胎龄、性别、孕产史,最高胆红素值及胆红素脑病发病相关资料。结果共纳入二级甲等以上医院21家,其中珠江三角洲地区11家,粤东地区4家,粤北地区2家,粤西地区4家,其中1家未收治本疾病患儿,余20家均有收治胆红素脑病患儿。21家医院2014年收治患者总数52 769例,分娩总数为140 601,纳入诊断胆红素脑病患儿共159例,其中珠江三角洲患儿107例,粤北地区13例,粤东地区13例,粤西地区26例,广东省胆红素脑病发病率为1.13‰,占21家医院收治患者总数的3.01‰。其中好转出院93例,签字出院60例,死亡6例。结论广东省胆红素脑病发病率仍较高,各区域间发病率有统计学差异,其中粤东地区发病率较其他地区低。

RhoA—Rock信号通路抑制剂对缺氧人肺微血管内皮细胞丝状肌动蛋白细胞骨架的影响

目的用RhoA—Rock信号通路抑制剂探讨肺出血时肺微血管内皮细胞的调控因素。方法人肺微血管内皮细胞常规培养，分为4组：对照组、抑制剂组、缺氧组和抑制剂缺氧组。异硫氰酸荧光素一鬼笔环肽与胞浆内丝状肌动蛋白（filamentous actin，F—actin）结合而发出红色荧光，共聚焦显微镜扫描观察F—actin的变化情况并记录相应荧光值。结果细胞缺氧组1h、12h和24h的F—actin平均荧光强度分别为对照组的（64．3±5．5）％、（60．3±4．2）％和（47．8±4．6）％；抑制剂缺氧组1h、12h和24h分别为对照组的（66．2±3．2）％、（67．1±6．2）％和（72．5±6．1）％。细胞缺氧组缺氧1h后，F—actin平均荧光强度降低[（64．3±5．5）％]，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05），至缺氧24h，F—actin含量已下降至对照组的（47．8±4．6）％，差异有统计学意义（P〈0．05）。抑制剂缺氧组缺氧1h后，F—actin平均荧光强度较缺氧组1h有所升高，为对照组的（66．2±3．2）％，抑制剂组缺氧24h后F．actin平均荧光强度为对照组的（72．5±6．1）％，与缺氧组缺氧24h相比差异有统计学意义（P〈0．05）。而抑制剂组不经缺氧的F—actin平均荧光强度与对照组相比无显著变化（P〉0．05）。缺氧后细胞皮质状结构消失，应力纤维排列紊乱，随着缺氧时间的延长，F—actin逐渐解聚断裂。用RhoA-Rock信号通路抑制剂预处理细胞后再缺氧，核周围F—actin所形成的皮质状结构重新出现，细胞浆内应力纤维的排列和分布趋向于规律，F—actin断裂减少。结论RhoA—Rock信号通路在肺微血管内皮细胞缺氧过程中介导了F—actin的损伤，用RhoA-Rock信号通路抑制剂干预可以为新生儿肺出血的治疗研究提供一个新的方向。

激光共聚焦扫描显微镜检测缺氧人肺微血管内皮细胞丝状肌动蛋白的变化

目的研究人肺微血管内皮细胞丝状肌动蛋白(F-actin)在缺氧前后的变化,探讨在血管内皮细胞水平研究新生儿肺出血机制的方法。方法人肺微血管内皮细胞常规培养,分为对照组和1、2、4、6、12 h和24 h缺氧培养组,每组设8个复孔,异硫酸氢荧光素-鬼笔环肽与胞浆内F-actin结合而发出红色荧光,共聚焦显微镜扫描观察F-actin的变化情况并记录相应荧光值。结果缺氧1 h组F-actin平均荧光强度明显降低,为对照组的66.3%±5.3%,差异有统计学意义(P<0.05),缺氧24 h F-actin含量下降至对照组的47.1%±6.9%。缺氧后,细胞变得狭长,细长的丝状伪足明显可见,核周F-actin的分布明显减少,皮质状结构消失,应力纤维排列紊乱或部分消失,随着缺氧时间的延长F-actin逐渐解聚断裂。结论通过观察缺氧前后肺血管内皮细胞F-actin变化,可以为在内皮细胞水平研究新生儿肺出血发病机制提供实验研究基础。

去甲肾上腺素治疗新生儿脓毒性休克疗效研究

目的探讨去甲肾上腺素在脓毒性休克新生儿救治中的疗效及安全性。方法选择2019年1月至2020年11月广东省妇幼保健院新生儿重症监护病房收治的脓毒性休克并使用去甲肾上腺素治疗的患儿进行前瞻性研究,入选患儿均在去甲肾上腺素治疗前及治疗后1 h应用功能性超声心动图进行血流动力学监测,并同时记录血压、心率、血气分析结果;记录诊断休克至开始去甲肾上腺素治疗期间(T0)及治疗开始后24 h(T1)的液体入量及尿量,分析患儿血流动力学参数、血管活性药物使用、液体超负荷及临床转归情况。结果共纳入66例患儿,其中轻度休克27例,中度休克33例,重度休克6例,男婴48例,早产儿38例,胎龄(35.2±4.1)周,出生体重(2476±909)g;休克诊断时间中位数为生后2 d,休克评分中位数4分。开始去甲肾上腺素治疗时间中位数为诊断休克后7.5 h;与接受去甲肾上腺素治疗前相比,治疗后1 h的每搏输出量、每搏输出量指数、心输出量、心脏指数、左室射血分数、缩短分数、收缩压、舒张压、平均动脉压及血pH、BE均明显升高,心率和中-重度休克组血乳酸明显下降,治疗后24 h尿量明显增多,液体超负荷明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。越早开始去甲肾上腺素治疗,休克病程中所需的多巴胺最大剂量越低(r=0.325,P=0.008)、血管活性药物下调时间越早(r=0.383,P=0.003)、使用时间越短(r=0.319,P=0.015)。66例患儿中,58例休克纠正,14例28 d内死亡。结论去甲肾上腺素对于脓毒性休克新生儿治疗是有效、可行的,可明显改善血流动力学参数。

血管活性药物评分、休克评分和乳酸水平对脓毒性休克足月儿结局的预测价值

目的探讨血管活性药物评分(vasoactive-inotropic score, VIS)、休克评分和乳酸水平对脓毒性休克足月儿结局的预测价值。方法选择2019年1月至2020年10月广东省妇幼保健院新生儿科住院并诊断为脓毒性休克的足月儿进行回顾性研究, 根据结局分为存活组和死亡组, 比较两组患儿相关因素的差异, 通过多因素Logistic回归分析脓毒性休克足月儿死亡的独立危险因素, 并利用受试者工作特征曲线比较VIS、休克评分及乳酸水平对脓毒性休克足月儿结局的预测效能。结果共纳入82例脓毒性休克足月儿, 存活组71例, 死亡组11例。存活组与死亡组脓毒性休克足月儿的VIS 最大值、休克评分最大值、乳酸最大值、第2个24 h VIS平均值、第1个及第2个24 h乳酸平均值比较, 差异均有统计学意义(P<0.05);VIS 最大值(OR=1.038, 95%CI 1.014~1.063)、休克评分最大值(OR=2.372, 95%CI 1.126~4.999)和第1个24 h乳酸平均值(OR=2.983, 95%CI 1.132~7.862)均与足月儿脓毒性休克死亡结局相关(P<0.05);VIS最大值曲线下面积最大, 截断值为58.5。结论三者中, VIS对脓毒性休克足月儿死亡结局预测价值最好, 休克评分次之, 乳酸水平较差。