基于HPLC指纹图谱与主成分分析相结合的四黄烧伤膏提取工艺研究

目的利用正交试验优选四黄烧伤膏的提取工艺,并建立四黄烧伤膏HPLC指纹图谱,为该制剂的质量评价提供参考。方法以四黄烧伤膏复方为模型药物,采用HPLC法建立指纹图谱,对指纹图谱共有峰峰面积进行主成分分析,以总因子得分为评价指标,采用正交试验法,对提取次数、提取时间、溶剂倍量等条件进行优化,筛选出最优提取工艺参数。结果在特征图谱研究中,共确定了12个共有峰。利用主成分分析法提取的2个主成分累计方差贡献率达到84.751%,计算9个样本的综合得分指标。正交试验得出的最佳提取工艺为加水10倍量,提取3次,每次2 h。结论该研究所建立的方法简单有效,适合四黄烧伤膏复方的提取,可以为四黄烧伤膏提取工艺优化提供参考。

基于HUVEC细胞膜色谱的莱菔子中抗血管性疾病活性成分筛选及验证

目的:构建人脐静脉细胞膜色谱(HUVEC/CMC)模型,并将其应用于莱菔子中抗血管性疾病活性成分的快速筛选。方法:采用HUVEC/CMC模型二维在线联用HPLC-ESI IT TOF MS系统对莱菔子活性成分进行分离、筛选和鉴定,并将筛选的活性成分进一步作用于氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的HUVEC,验证其保护作用。结果:利用所建立的方法从莱菔子中共筛选出2个保留组分,通过与对照品比对,鉴定出1个成分为芥子酸。与模型组比较,芥子酸低、中、高预处理组细胞存活率显著增加,细胞中ICAM-1和VCAM-1的含量下降,并呈剂量依赖性;Bcl-2蛋白表达水平下降、Bax蛋白表达升高,具有统计学意义(P<0.05)。结论:构建的HUVEC/CMC在线联用HPLC-ESI IT TOF MS系统可用于快速筛选复杂中药体系中活性成分,为细胞膜色谱的应用和莱菔子的开发提供了参考。