吉粒芬治疗终末期肝病合并脓毒血症临床疗效及免疫学机制研究

目的观察吉粒芬(recombinant human granulocyte colony-stimulating factor,rhG-CSF)在终末期肝病(end-stage liver disease,ESLD)合并脓毒血症中临床疗效及预后影响。方法选取2022年1月至2023年12月ESLD合并脓毒血症患者90例,采用简单随机抽样法分成rhG-CSF组、胸腺肽针组、对照组,每组30例。比较三组间治疗前后肝功能、细胞因子水平、治疗有效率、并发症及ESLD模型(model for end-stage liver disease,MELD)评分系统。结果rhG-CSF组治疗总有效率为96.67%,明显高于另外两组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,rhG-CSF组、胸腺肽组肝功能、细胞因子水平及免疫功能恢复情况均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗及随访12周后,rhG-CSF组并发症最少,病死率最低。结论rhG-CSF辅助治疗ESLD合并脓毒血症临床疗效佳,可增强抗感染能力,改善预后。

肝性脑病患者脑白质病变临床特征及其与病变部位关系的研究

目的分析肝性脑病患者(HE)脑白质病变(WML)临床特征及其与病变部位的关系。方法选择2018年1月至2020年12月杭州市西溪医院收治的HE患者57例,分析患者WML特征;根据改良Scheltens量表对WML患者进行评分及分组,≥8分为重度WML组(29例),<8分为轻度WML组(28例),比较两组患者一般资料、实验室检测指标及终末期肝病模型(MELD)评分,对不同HE分级患者WML评分进行比较,探讨不同部位WML评分与HE患者临床特征的相关性。结果57例HE患者WML总分8.0(4.0,12.5)分,其中脑室周围WML发生率最高94.7%,评分2.0(2.0,4.0)分,深部WML评分5.0(2.0,10.0)分。重度WML组患者较轻度WML组患者肝硬化病程长,差异有统计学意义(P<0.05)。不同HE分级患者WML总分、深部WML评分、额叶、顶叶、颞叶及枕叶WML评分,差异均有统计学意义(均P<0.05)。年龄与脑室周围和顶叶WML呈正相关(r=0.368、0.319,均P<0.05),肝硬化病程与脑室周围及枕叶WML呈正相关(r=0.402、0.321,均P<0.05),TC水平与脑室周围、额叶、颞叶、枕叶WML呈正相关(r=0.268、0.291、0.302、0.315,均P<0.05),血氨水平与额叶、枕叶WML呈正相关(r=0.394、0.281,均P<0.05)。结论HE患者肝硬化病程越长,WML越严重;HE分级越高WML越严重。年龄、肝硬化病程、TC及血氨水平与WML病变部位有相关性。

血浆置换治疗HIV感染合并早中期乙肝肝衰竭

目的探讨血浆置换(PE)治疗人类免疫缺陷病毒(HIV)感染合并早中期乙肝肝衰竭(H13V-LF)的临床疗效及应用价值。方法30例HIV感染合并早中期HBV-LF患者随机分为对照组和PE组,每组各15例。对照组予以卧床休息、能量支持、护肝及抗HIV等内科常规治疗,PE组给予内科常规治疗联合血浆置换治疗。比较PE治疗前后两组患者的总胆红素(TBIL)、肌酐(Cr)、凝血酶原时间的国际标准化比值(INR)、终末期肝病模型(MELD)评分、CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、白细胞介素-6(IL-6)及IL-8的水平变化,同时计算两组患者的3个月存活率。结果经治疗后,PE组的TBIL水平、Cr水平、INR、MELD评分以及IL-6、IL-8、CD8细胞水平均低于对照组,CD4细胞水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。PE组患者的3个月存活率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PE联合内科治疗HIV感染合并早中期HBV-LF在临床症状及肝功能改善、炎症细胞因子清除、短期预后等方面的效果均优于常规内科治疗,且无明显副作用。

终末期肝病合并感染患者病原菌分布与耐药性分析

目的分析终末期肝病(ESLD)患者合并感染的病原学、耐药特征及预后.方法回顾性分析125例ESLD合并感染患者的主要病原菌和药敏实验结果.结果125例ESLD合并感染患者中,共分离培养到130株病原菌菌株,革兰氏阴性菌(G-菌)86株,占66.15%.其中,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌最多;革兰氏阳性菌(G+菌)34株,金黄色葡萄球菌、葡萄球菌人亚种、屎肠球菌排名前3,真菌10株,新型隐球菌最多.多重耐药菌(MDR)33株.产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)菌共检出38株,ESBLs(+)菌检出率为21.05%.在G+致病菌中,红霉素、克林霉素、四环素对G+菌株均耐药,青霉素G对其中4种菌株耐药,对其中3种菌株耐药的为苯唑西林、环丙沙星.在G-致病菌中,除琼氏不动杆菌外,氨苄西林、头孢唑啉对其他G-致病菌株均耐药;对其中5种致病菌株耐药的有复方新诺明、庆大霉素、氨苄西林/舒巴坦;对其中4种致病菌株耐药的有头孢替坦、头孢曲松、妥布霉素、呋喃妥因.结论ESLD合并感染患者的病原菌以G-菌为主,且菌种多样化.MDR呈上升趋势,耐药率较高,临床应根据病原菌种类和药敏结果合理使用抗感染治疗,改善其预后.

复方鳖甲软肝片联合恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎伴脾功能亢进患者的临床疗效

CHB是全世界严重的公共卫生问题，每年约有65万人死于CHB引起的并发症。脾功能亢进是肝炎后肝硬化严重且常见的并发症，主要表现为脾脏肿大，一种或数种血细胞成分减少，骨髓呈造血细胞增生象。药理研究证实，中药主要通过保护肝细胞、抑制纤维增生、缩小脾脏、改善脾脏循环等作用达到治疗脾功能亢进的效果。

骨髓间充质干细胞在不同培养体系中对肝星状细胞的影响及其潜在机制研究

目的探讨骨髓间充质干细胞（BMMSC）在不同共培养体系与肝星状细胞（HSC）共培养后细胞因子及TLR4通路表达的变化。方法将分离提纯的HSC分别经0、50、100、150 g/L脂多糖处理48 h，细胞增殖（CCK）-8检测HSC增殖率以确定最佳浓度。在该脂多糖浓度下，2×105/mL HSC分为单纯培养组、1∶1与BMMSC直接共培养组和Transwell共培养组，检测各组上清液IL-6、TNF-α。再将细胞分为无脂多糖下BMMSC组、HSC组、脂多糖＋BMMSC组、脂多糖＋HSC组、Transwell HSC组、Transwell所有细胞组、直接共培养所有细胞组，用实时荧光定量PCR检测各组α-肌动蛋白（α-SMA）和Ⅰ型胶原mRNA表达水平，用蛋白质印迹法检测TLR4、髓样分化因子88（MyD88）、核因子-κB蛋白表达。各样本均数比较采用单因素方差分析。结果与无脂多糖相比，HSC在50、100、150 g/L脂多糖浓度下增殖率分别为（129.77±11.26）%、（162.90±13.15）%、（55.12±11.6）%，差异均有统计学意义（t值分别为5.91、10.70和8.65，均P〈0.05）。单纯HSC组IL-6和TNF-α浓度分别为（252.02±30.94） ng/L、（148.00±10.27） ng/L，直接共培养组分别为（88.52±6.61） ng/L、（72.63±5.54） ng/L，Transwell共培养组分别为（103.76±7.14） ng/L、（81.79±6.92）ng/L，直接共培养组和Transwell组与单纯HSC组比较差异有统计学意义（t值分别为12.66、15.82和11.81、12.34，均P〈0.05）。直接共培养组与间接共培养组相比差异有统计学意义（t值分别为3.83、2.53，均P〈0.05）。与无脂多糖组相比，HSC在脂多糖中的α-SMA和Ⅰ型胶原表达均有明显增加，差异均有统计学意义（t值分别为14.16、11.84，均P〈0.05）。经与BMMSC Transwell共培养后，Transwell HSC组的α-SMA和Ⅰ型胶原表达均有显著降低，差异均有统计学意义（t值分别为11.98、4.47，均P〈0.05）。Transwell所有细胞组与直接共培养组相比，α-SMA和Ⅰ型胶原表达增加，差异均有统计学意义（t值分别为3.70、3.19，均P〈0.05）。脂多糖＋HSC组与HSC组相比，TLR4、MyD88、核因子-κB的蛋白表达均有上升，而Transwell HSC组各蛋白较脂多糖＋HSC组有明显下降，且Transwell所有细胞组与直接共培养组相比各蛋白表达升高，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。结论BMMSC对HSC激活及其相关炎性细胞因子分泌有抑制作用，可能是通过TLR4通路及细胞间接触产生作用。

腺苷A2A受体激动剂联合骨髓间充质干细胞移植对急性肝功能衰竭小鼠负向免疫调节作用的研究

目的探讨腺苷A2A受体激动剂（CGS21680）联合骨髓间充质干细胞（BMMSC）移植治疗急性肝功能衰竭（ALF）的疗效及可能机制。方法50只6～8周雄性C57BL/6小鼠普通饲养1周后，采用随机数字法将小鼠分为健康对照组6只，模型对照组11只，BMMSC组11只，CGS21680/BMMSC组11只，CGS21680组11只。除健康对照组外，其余小鼠腹腔注射D-GalN和脂多糖建立ALF模型。10 h后，CGS21680/BMMSC组、CGS21680组腹腔注射腺苷A2A受体激动剂CGS21680（2.1 mg/kg）。另外，BMMSC组、CGS21680/BMMSC组尾静脉注射BMMSC 1×10^6/只。24 h后，苏木精-伊红染色观察肝脏组织病理变化，流式细胞仪检测各组小鼠脾脏Treg占CD4＋T淋巴细胞比例变化，ELISA试剂盒检测血清炎性因子IL-6、TNF-ɑ含量，实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测肝组织TLR4、核因子-κB表达水平。应用单因素方差分析（one-way ANOVA）和SNK-q检验。结果健康对照组血清IL-6为（23.67±2.97） pg/mL，模型对照组为（151.47±6.03） pg/mL，BMMSC组为（72.10±3.74） pg/mL，CGS21680/BMMSC组为（53.35±2.50） pg/mL，CGS21680组为（84.85±3.25） pg/mL，健康对照组与其他4组比较差异均有统计学意义（t值分别为46.02、25.51、19.58和34.03，均P〈0.01）。健康对照组血清TNF-ɑ水平为（24.62±3.19） pg/mL，模型对照组为（102.25±2.10） pg/mL、BMMSC组为（54.71±2.23） pg/mL，CGS21680/BMMSC组为（42.20±4.72） pg/mL，CGS21680组为（81.76±3.50） pg/mL，健康对照组与其他4组比较差异均有统计学意义（t值分别为46.49、19.97、7.72和29.57，均P〈0.01）。健康对照组脾脏Treg比例与模型对照组、BMMSC组、CGS21680/BMMSC组和CGS21680组比较差异均有统计学意义（t值分别为51.67、12.22、5.91和18.21，均P〈0.01）。健康对照组肝组织TLR4 mRNA水平与模型对照组、BMMSC组、CGS21680/BMMSC组和CGS21680组比较差异均有统计学意义（t值分别为26.31、21.33、13.24和27.14，均P〈0.01）；健康对照组肝组织核因子-κB mRNA水平与模型对照组、BMMSC组、CGS21680/BMMSC组和CGS21680组比较差异均有统计学意义（t值分别为16.56、16.34、7.83和13.11，均P〈0.01）。健康对照组肝组织TLR4蛋白水平与模型对照组、BMMSC组、CGS21680/BMMSC组和CGS21680组比较差异均有统计学意义（t值分别为35.60、10.38、6.05和18.02，均P〈0.05）；健康对照组肝组织NF-κB蛋白水平与模型对照组、BMMSC组、CGS21680/BMMSC组和CGS21680组比较差异均有统计学意义（t值分别为10.80、7.30、4.61和13.24，均P〈0.05）。结论腺苷A2A受体激动剂联合BMMSC移植可显著上调ALF小鼠体内Treg比例，抑制TLR4/核因子-κB通路的激活，两者协同调节作用，进而进一步抑制肝脏炎性反应。

杭州市西溪医院66例输入性疟疾患者临床特征

目的分析杭州市西溪医院2014年2月—2019年12月收治的疟疾患者临床资料及药物治疗情况,为临床早期诊断、评估轻重以及治疗提供参考数据,促进临床合理用药。方法收集2014年2月—2019年12月收治入院的66例疟疾患者资料,分为轻症组和重症组,对两组患者的实验室检测指标结果、药物使用情况进行比较,并采用多因素二元Logistic对两组患者的指标作逐步回归分析。结果17例重症恶性疟患者治疗中,10例患者尽早、足量、足疗程使用青蒿琥酯针及后续双氢青蒿素哌喹片巩固治疗,效果良好。34例轻症恶性疟疾患者,28例单独使用双氢青蒿素哌喹片,效果敏感,治愈率高。8例间日疟和4例卵形疟,6例患者使用磷酸氯喹加磷酸伯氨喹八日方案,6例患者选用青蒿素类药物,效果均良好。经Pearson单因素分析,轻症组与重症组在年龄、治愈时间、白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板、谷草转氨酶、总胆红素、C-反应蛋白及降钙素原间差异具有统计学意义(P<0.05);经多元Logistic回归分析,影响疟疾轻重症分型的相关因素包括:年龄、白细胞计数、降钙素原。结论青蒿素类注射液治疗后联用青蒿素类复方(ACTs)能更有效治疗重症恶性疟疾。在缺乏首选药物的情况下单用青蒿素类药物治疗间日疟、卵形疟效果良好。影响疟疾发病后重症化的因素有年龄、治愈时间、白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板、谷草转氨酶、总胆红素、C-反应蛋白及降钙素原,其中年龄、白细胞及降钙素原对疟疾严重程度的预测评估意义重大。

姜黄素衍生物C66对转化生长因子-β刺激的大鼠肝星状细胞增殖和活化的研究

目的观察姜黄素衍生物C66对TGF-β刺激的大鼠肝星状细胞（HSC）增殖及α-平滑肌动蛋白（R-SMA）、Ⅰ型胶原表达的影响及其与大麻素受体（CB）1的关系。方法体外培养HSC-T6细胞，分为对照组、C66不同浓度组（1、2、5、10和20／,tool／L），细胞计数试剂盒一8检测其吸光度（A）值。选取最佳C66作用浓度及时间，分为对照组、TGF-β干预组、TGF＋β＋CB1拮抗剂组、TGF-β＋C66干预组、TGF-β＋CB1拮抗剂＋C66联合干预组，分别培养48h，以蛋白质印迹法、实时荧光定量PCR检测CB1、α—SMA、I型胶原蛋白及mRNA的表达，以蛋白质印迹法检测磷酸化c—jun氨基末端激酶（p-JNK）、C—jun氨基末端激酶（JNK）表达水平。多样本均数方差齐性者采用LSD法进行两两比较，方差不齐者采用DunnettT3检验，组间比较采用单因素方差分析。结果C66能有效抑制HSCT6增殖，呈现浓度和时间依赖性，其中10μmol／LC66作用48h对HSC—T6的抑制效果最明显，抑制率为54％。与对照组相比，单独TGF-β1干预组CB1、Ⅰ型胶原、α-SMA蛋白表达明显升高，差异均有统计学意义（￡值分别为6．188、3．48和20．64，均P〈0．05）。与对照组相比，单独TGF-β1干预组CB1、I型胶原、Ⅰ-SMAmRNA相对表达显著升高，差异均有统计学意义（￡值分别为4．705、9．492和38．27，均P〈0．05）。与对照相组比，TGF—B1干预组p-JNK水平显著升高，差异有统计学意义（t=9．567，P〈0．05）。结论C66能有效抑制HSC—T6细胞的增殖及胶原合成，且联合使用CB1拮抗剂效果更明显，该过程可能涉及JNK磷酸化水平的调节，有助于理解肝纤维化发生、发展的机制及为治疗肝纤维化寻找新的靶点。

杭州地区终末期肝病患者合并感染病原学特征分析

目的探讨终末期肝病(ESLD)患者合并感染的病原学特征及预后。方法选择本院150例ESLD合并感染患者为研究对象,分析ESLD合并感染患者常见感染部位、类型和主要病原菌。结果150例ESLD合并感染患者中,感染种类最多的为脓毒血症,其次为泌尿道感染、肺部感染、腹腔感染,发生率分别为35.3%、26.0%、19.3%、12.0%。共分离培养到150株病原菌菌株,其中革兰阴性菌101株,占67.3%,以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为主;革兰阳性菌39株,以金黄色葡萄球菌、葡萄球菌人亚种、屎肠球菌为主;真菌10株,新型隐球菌最多。血培养、尿培养中,均以革兰阴性致病菌感染为主;痰培养、腹水培养中均无革兰阳性致病菌;导管培养、穿刺液培养中均只有革兰阳性致病菌;大便培养中只有革兰阴性致病致病菌;脑脊液培养中只有真菌感染。结论熟悉并准确了解目前ESLD患者感染的常见组织部位、病原菌的类型,并通过及时有效的抗感染治疗,改善其预后。