鲍曼不动杆菌及铜绿假单胞菌体外抗菌活性的分析及培养基的影响

目的了解当前鲍曼不动杆菌及铜绿假单胞菌的体外抗菌活性以及在低碱性氨基酸培养基中对碳青霉烯类抗菌药物最低抑菌浓度(MIC)的影响。方法收集临床分离的鲍曼不动杆菌47株、铜绿假单胞菌53株。按美国临床实验室标准化协会(CLSI)琼脂稀释法检测菌株对帕尼培南、亚胺培南、美罗培南、头孢他啶、头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦、头孢吡肟、左氧氟沙星、环丙沙星、阿米卡星10种抗菌药物的MIC;同法分别检测鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌在低碱性氨基酸培养基和水解酪蛋白胨(MH)培养基上对帕尼培南、亚胺培南、美罗培南的敏感性。采用配对t检验比较2组试验结果。结果 47株鲍曼不动杆菌对亚胺培南、左氧氟沙星的耐药率最低,分别是17.10%和14.90%,哌拉西林-他唑巴坦耐药率高达78.70%。53株铜绿假单胞菌对阿米卡星的耐药率最低,为20.75%;头孢他啶的耐药率高达71.70%。在低碱性氨基酸的培养基中,鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌对碳青霉稀类抗菌药物的敏感性差异有统计学意义(P<0.05)。结论碳青酶烯类药物是治疗鲍曼不动杆菌引起的重症感染的重要药物。由于碱性氨基酸的浓度较高,鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗菌药物的敏感性在使用MH培养基检测时被低估。

血浆(1,3)-β-D-葡聚糖检测对血液病患者侵袭性真菌病的诊断价值

目的：评价（1，3）-β-D-葡聚糖（BDG）检测（简称G试验）对恶性血液病患者侵袭性真菌病（IFD）的诊断价值。方法回顾性分析399例血液系统肿瘤患者每周2～3次的血浆G试验数据，以《血液病/恶性肿瘤患者侵袭性真菌感染的诊断标准与治疗原则（修订版）》中的标准作为判断标准，利用SPSS 11.5统计软件分析G试验对IFD的诊断价值。结果 G试验诊断IFD的敏感性为78.5%，特异性为79.8%，阳性预测值为75.0%，阴性预测值为82.7%。结论血浆BDG水平与IFD感染有直接联系，每周检测2～3次，结合影像学判断方法能帮助诊断和排除IFD，提高IFD临床诊治效果。

半乳甘露聚糖抗原动态监测与血液病患者侵袭性曲霉病抗真菌治疗预后的相关性

目的 分析血清半乳甘露聚糖抗原（galactomannan,GM）检测结果在成人血液病患者侵袭性真菌感染（IFD）抗真菌治疗中的意义。方法 回顾性研究在肺部曲霉感染的高危血液病患者,每周2-3次检测血清GM。按照欧洲癌症/真菌病研究组的研究和治疗组织（EORTC-MS）规定的定义对侵袭性曲霉病（IA）进行分组。结果 82例患者中确诊IA1例,临床诊断IA28例,拟诊的IFD23例,排除IFD30例。以确诊和临床诊断作为阳性病例计算GM检测的灵敏度为79.3%（23/29）,以拟诊和无IFD作为阴性病例计算,试验特异度为83.0%（44/53）,阳性预测值为79.3%（23/29）,阴性预测值为88.0%（44/50）。本组82例患者在中位数为19.7（9-26）d开始采取预防性氟康唑治疗。GM阳性值出现时间比高分辨率计算机断层扫描（HRCT）或胸部X线检查（CXR）提前4-14 d。结论 血液科高危患者血清GM每周检测2-3次,GM试验出现阳性比HRCT和CXR阳性报告提前4-14 d,GM升高与曲霉侵袭量有关。GM结果可作为侵袭性曲霉病高危人群的早期干预治疗参考指标。

血清1,3-β-D葡聚糖和半乳甘露聚糖检测对造血干细胞移植受者侵袭性真菌感染的诊断意义

目的:评价血清1,3-β-D葡聚糖(BDG)检测(G试验)和半乳甘露聚糖检测(GM试验)对造血干细胞移植(HSCT)受者侵袭性真菌感染(IFI)的诊断价值。方法:采用Platelia Aspergillus酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒和GKT-5M Set动态真菌检测试剂盒对64例HSCT受者移植后每周2次同时进行血清GM试验和G试验,并根据欧洲癌症研究治疗组织/真菌病研究组(EORTC/MSG)的诊断标准定义临床诊断真菌感染病例,对两种检测方法的检测结果作ROC曲线分析,采用χ2检验对GM试验不同阳性阈值之间及GM与G试验之间诊断结果的一致性进行分析。结果:单次GMⅠ值>0.7和G试验BDG质量浓度>26.0pg/L分别为GM和G试验阳性折点时曲线下面积最大,两者灵敏度分别为87.0%、69.6%,特异度分别为92.7%%和85.4%。单次GMⅠ值>0.7与连续2次GMⅠ值>0.5的结果一致性较差(Kappa=0.308,P<0.05);GM与G试验结果的一致性较好(Kappa=0.446,P>0.05)。结论:GM试验和G试验是诊断IFI可靠的诊断方法,两者对IFI临床诊断意义的一致性较好;采用一次试验检测时,选择GM试验更为理想,且以单次GMⅠ>0.7作为阳性阈值为佳。

临床分离真菌耐药性分析

目的监测分析临床分离真菌对抗菌药物的耐药现状,以加强抗真菌药物的合理应用。方法对我院2007年1月至2007年6月分离鉴定出的479株真菌用目前常用的5种抗真菌药物进行药物敏感性试验和分析。结果479株真菌中念珠菌和其他真菌分别占98.3%和1.7%,其中前3位依次是白念珠菌(69.5%)、光滑念珠菌(16.9%)和热带念珠菌(8.8%)。在5种抗真菌药物中,耐药率由高到低依次为伊曲康唑(12.7%)、氟康唑(9.8%)、伏立康唑(7.5%)、氟胞嘧啶(1.8%)和两性霉素B(1.0%)。结论临床分离的真菌对当前常用抗真菌药物的耐药菌株增多,应引起重视。

1852例血培养结果影响因素分析

目的分析上海交通大学医学院附属瑞金医院血培养结果的影响因素。方法采用BD BACTECFX全自动血培养仪及VITEK MS检测系统培养和鉴定细菌。采用Logistic回归分析和受试者工作特征(ROC)曲线评价各变量对血培养结果的影响。结果共收集1 852瓶血培养样本,其中155瓶阳性,阳性检出率为8.37%。检出革兰阳性菌59株(38.06%)、革兰阴性菌90株(58.06%)、真菌6株(3.87%)。血培养平均报阳时间为34.81 h。Logistic回归分析结果显示,患者年龄[比值比(OR)=1.161,95%可信区间(CI)1.069～1.260,P=0.000]、采血时患者体温(OR=2.680,95%CI 1.918～3.744,P=0.000)、采血量(OR=1.475,95%CI 1.059～2.055,P=0.022)及白细胞计数(OR=3.758,95%CI 2.676～5.278,P=0.000)是血培养阳性的影响因素。结论患者年龄、采血量、白细胞计数、采血时患者体温对血培养阳性结果有影响。应正确采集血培养样本,以提高早期血流感染(BSI)的检出率,帮助临床及时进行抗感染治疗。

黏菌素耐药肺炎克雷伯菌耐药性及同源性

目的了解黏菌素耐药的肺炎克雷伯菌耐药特点、临床分布、耐药性表型及基因型,并对菌株进行同源性分析。方法收集2021年1月-2021年12月上海交通大学医学院附属瑞金医院临床分离的黏菌素耐药肺炎克雷伯菌共17株,使用微生物质谱检测系统(MOLDI-TOF MS)进行菌株鉴定,Vitek-2 Compact全自动微生物分析仪进行药敏试验,肉汤稀释法确认黏菌素敏感性,对菌株携带的耐药基因型进行PCR扩增和序列分析,分析菌株之间的同源性。结果17株黏菌素耐药的肺炎克雷伯菌菌株中,血液中分离率最高(4株占23.5%),科室分布以ICU为主(11株占64.7%);黏菌素耐药的肺炎克雷伯菌对β-内酰胺酶抑制剂复合制剂、头孢吡肟、环丙沙星、左氧氟沙星耐药率达100%;均携带bla_(SHV)和bla_(TEM),未检出mcr基因;其中16株(94.1%)多位点序列分型(MLST)为ST-11型;17例分离出黏菌素耐药肺炎克雷伯菌患者均合并多种基础疾病,13例(76.5%)为男性,年龄(37~96)岁,住院天数(33~146)天,9例(52.9%)死亡,4例(23.5%)检出前未接受任何黏菌素相关治疗;系统进化树显示不同部位分离的15株黏菌素耐药肺炎克雷伯菌在进化关系上具有同源性。结论黏菌素耐药肺炎克雷伯菌为广泛耐药菌株,大多携带多种耐药基因,治疗难度大,需引起临床重视,加强耐药菌株防控,合理选用抗菌药物。

安尔碘皮肤消毒剂对常见耐药细菌的体外杀菌试验

目的了解安尔碘皮肤消毒剂对临床耐药菌的最小杀菌浓度。方法采用对倍稀释法,以安尔碘皮肤消毒剂不同浓度对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和泛耐药鲍氏不动杆菌作用不同时间,观察杀菌效果。结果安尔碘皮肤消毒剂在有效碘含量为8.125μg/ml时,作用1 min后,可将检测的所有菌株全部杀灭。结论安尔碘皮肤消毒剂为强而有效的杀菌剂。

三种表型试验单用和联用鉴定金黄色葡萄球菌能力的评估

目的对单个和联合三个表型生化试验鉴定金黄色葡萄球菌进行评价。方法以PCR检测spa基因以及Vitek-2系统鉴定结果作为参考方法，分析比较DNA酶试验（DNase）、高盐甘露醇平板生长试验（MSA）、试管法测血浆凝固酶（TCT）单用鉴定金黄色葡萄球菌的敏感度、特异性、阳性预测值、阴性预测值、阳性似然比、阴性似然比、约登指数等参数，并分析联合应用三者鉴定金黄色葡萄球菌这一方案与参考方法的一致性、经济成本和相关诊断参数。结果本研究共收集到葡萄球菌属菌株324株，其中金黄色葡萄球菌293株、非金黄色葡萄球菌3l株，单个表型试验不能准确地鉴定金黄色葡萄球菌，联合三个表型试验方案与参考方法的一致性较好（Kappa值为0．9441）、经济成本较低，敏感度和特异性分别为100％、90．3％。结论DNA酶试验、高盐甘露醇平板生长试验和试管法测血浆凝固酶三者联合可以经济有效地鉴定金黄色葡萄球菌。

显色培养基联合简单生化试验鉴定常见氧化酶阴性革兰阴性杆菌的能力验证

目的对显色培养基联合简单生化反应鉴定常见氧化酶阴性革兰阴性杆菌的方案进行能力验证。方法以VITEK 2 Compact全自动微生物分析系统鉴定细菌作为参考方法，计算联合应用科玛嘉定位显色培养基、吲哚试验、鸟氨酸脱羧酶试验、赖氨酸脱羧酶试验鉴定临床标本中常见氧化酶阴性革兰阴性杆菌的敏感度、特异性、似然比、约登指数、Kappa值等参数并进行McNemar检验，分析这一方案的真实性、与参考方法的一致性并比较经济成本。结果通过对8个属10个种共318株氧化酶阴性革兰阴性杆菌鉴定结果的分析表明，黏质沙雷菌、嗜麦芽窄食单胞菌、鲍曼不动杆菌的敏感度和特异性均为100％，大肠埃希菌、产气肠杆菌、肺炎克雷伯杆菌的敏感度和特异性均大于90％，阴沟肠杆菌、产酸克雷伯杆菌、弗劳地枸橼酸杆菌和奇异变形杆菌的特异性均大于90％，但灵敏度为75％～90％；除了弗劳地枸橼酸杆菌的Kappa值为0．5947外，其余均大于0．85；McNemar检验P值均大于0．05；本研究方案成本只有参考方法的10％。结论显色培养基联合简单生化试验可快速经济有效地鉴定数种常见氧化酶阴性革兰阴性杆菌。

细菌内毒素的致病机制及临床意义

细菌内毒素的研究已有200多年的历史，早在18世纪有人将腐烂的鱼或肉中的液体经静脉注射到动物体内，发现能使动物发热，故称其为“致热物质”。1892年，Pfeiffer发现了细菌崩解时逸散出的内毒素。不久，Coley用以医治恶性肿瘤的Coley毒素组分被Shear证明为细菌内毒素。20世纪50年代后，人们逐渐认识到从这些革兰阴性菌分离得到的物质实际上为同一种成分即所有革兰阴性菌细胞壁外膜上的主要结构成分，对细菌的生长和活力至关重要，并将这些物质统称为内毒素或脂多糖（LPS）。