棉花热激转录因子基因的克隆及其序列分析

利用RACE技术克隆出的棉花热激转录因子基因片段的3′端序列为探针,对棉花EST数据库进行BLAST搜索,筛选与探针高度同源的EST序列,再利用DNAMAN软件进行拼接,获得了棉花Hsf基因(GhHsf)。生物信息学分析表明,GhHsf基因的开放阅读框为1 515bp,编码504个氨基酸,分子量为55 513.7Da,理论等电点为5.45。具有热激转录因子家族固有的氨基酸保守结构域,并且与主要的高等植物Hsf具有较高的同源性。棉花热激转录因子的氨基酸序列中没有预测到信号肽以及跨膜区域。

拟南芥At4g05060基因的酵母双杂交诱饵表达载体的构建、表达及自激活检测

为研究At4g05060基因功能,采用PCR扩增拟南芥VAMP(vesicle-associated membrane protein)家族基因At4g05060的ORF序列,定向克隆至酵母双杂交诱饵表达载体pGBKT7,经酶切鉴定并测序后将其转化至酵母Y187细胞;然后采用Western blotting技术分析At4g05060基因在酵母中的表达水平,通过缺陷型培养基培养进行自激活检测。结果表明,成功构建酵母诱饵表达载体pGBKT7-At4g05060,并在酵母细胞正确表达,表达产物对报告基因无自激活作用。

NaCl胁迫对鹰嘴豆根尖细胞有丝分裂的影响

[目的]为鹰嘴豆的抗性研究奠定细胞遗传学基础。[方法]以鹰嘴豆根尖为材料,用不同浓度的NaCl溶液(0.05、0.10、0.15、0.20、0.25 mol/L)分别处理24和48 h,观察根尖分生组织细胞有丝分裂及染色体行为。[结果]当NaCl浓度≥0.1 mol/L时,处于分裂期的细胞逐渐减少,并且鹰嘴豆根尖细胞出现染色体黏连、后期染色体分离不同步、微核、染色体断裂、染色体桥、不均等分裂、后期滞后染色体等畸变现象。[结论]NaCl作为一种胁迫因子,对鹰嘴豆细胞的有丝分裂有抑制作用,且具有遗传毒性效应。

浅谈如何提高遗传学课堂教学质量的心得

遗传学是一门重要的专业基础课,理论性强、应用广泛。提高遗传学课堂教学质量以及培养学生综合素质,关键在于抓好课堂教学的各个环节。本文主要结合笔者多年的教学工作的体会,浅谈如何提高遗传学课堂教学质量的一些心得。

棉花热激转录因子GhHsf基因的表达及其烟草转化

【目的】了解棉花Gh Hsf基因的功能,分析该基因的表达模式,构建其植物表达载体并转化烟草获得转基因植株。【方法】利用半定量RT-PCR对棉花热激转录因子基因Gh Hsf的表达模式进行分析。构建p CAMBIA1301-Gh Hsf植物表达载体,采用农杆菌介导法转化烟草,并进行鉴定。【结果】棉花Gh Hsf基因在棉花各组织中为组成型表达;构建Gh Hsf基因植物表达载体p CAMBIA1301-Gh Hsf,转化烟草获得了转基因植株。【结论】棉花Gh Hsf基因在棉花的不同组织中是组成型表达,获得了转Gh Hsf基因烟草株,为进一步开展功能研究奠定基础。

探索遗传学课堂教学和实验教学的改革

遗传学作为生命科学的一门基础学科,涵盖面广、实践性强。本文根据多年的教学实践中积累的经验,对遗传学教学进行了探索,期望教学质量的提高,培养学生的独立操作能力,提高其综合素质。

除草剂丁草胺对小麦根尖细胞有丝分裂的影响

本文以小麦根尖为试验材料,探讨不同处理时间和不同处理浓度除草剂丁草胺对小麦根尖分生细胞有丝分裂的影响。结果表明:经100微摩尔/升丁草胺处理小麦根尖12小时后,细胞分裂指数低于对照组(4.91%),染色体畸变率最低,为0.50‰;由500微摩尔/升丁草胺处理小麦根尖72小时后,细肥分裂指数明显偏低,染色体畸变率为0.00‰。较高浓度丁草胺可以看作是对小麦的一种毒害因子,抑制细胞分裂。随着丁草胺处理浓度的增加和处理时间的延长,小麦根尖有丝分裂指数逐渐下降。同时,丁草胺影响染色体的形态,出现了微核、染色体多极化、染色体断片、染色体黏连、染色体桥等畸变类型。

不同预处理对鹰嘴豆根尖细胞染色体制片的影响

采用常规压片法,以鹰嘴豆根尖为材料,研究了秋水仙素、对二氯苯和8-羟基喹啉等预处理剂对积累鹰嘴豆根尖细胞中期分裂相的效果,并比较了不同预处理剂对中期染色体形态的影响。结果表明,3种预处理剂均能使根尖细胞的有丝分裂停留在中期,但0.1%的秋水仙素溶液进行预处理后的中期分裂相,染色体粗短,分散度不理想;0.006 mol/L的8-羟基喹啉溶液进行预处理后的鹰嘴豆中期染色体形态不清晰,边缘缺失;对二氯苯饱和水溶液4 h处理后的根尖细胞染色体背景清晰,缢痕明显,分散度较适宜,适合核型分析。