单肺通气时肺组织缺氧诱导因子1_α和葡萄糖转运蛋白1的表达

目的研究单肺通气期间肺组织缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和葡萄糖转运蛋白1(GLUT-1)的表达情况,探讨其在非通气侧肺组织代谢中的作用。方法行开胸手术患者32例,随机分为双肺通气组(DLV组,n=8)和单肺通气组(OLV组,n=24),其中OLV组按单肺通气时间长短再分为三个亚组,即OLV1组(单肺通气30min)、OLV2组(单肺通气1h)和OLV3组(单肺通气2h)。用Westen-blot法检测非通气侧肺组织中的HIF-1α和GLUT-1蛋白含量。结果 OLV2、OLV3组HIF-1α蛋白表达量显著高于DLV组(P<0.05)。OLV3组GLUT-1蛋白表达量显著高于DLV组(P<0.05)。结论 HIF-1α和GLUT-1可能在单肺通气非通气侧肺组织细胞能量摄取中起关键作用。

血管内皮生长因子和促红细胞生成素在单肺通气期间的表达及意义

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)和促红细胞生成素(EPO)在单肺通气(OLV)肺泡细胞低氧代谢的表达及其意义。方法 37例行开胸食管癌手术患者随机分为单肺通气组(OLV组)17例,双肺通气组(TLV组)20例。每组患者分别于OLV或TLV前(T1)、OLV或TLV后30min(T2)、60min(T3)、90min(T4)、120min(T5)、手术结束时(T6)抽取静脉血,检测血清VEGF、EPO水平;并分别于T1、T3、T6时点行血气分析,监测血红蛋白(HGB)水平。结果 OLV组T6时点PaO2值明显低于TLV组(P<0.05),除T1、T2外,OLV组各时点VEGF浓度均高于TLV组(P<0.05),OLV组T5、T6时点的血清EPO浓度明显高于TLV组(P<0.05)。结论在单肺通气期间VEGF和EPO因子表达明显上调,可能参与肺组织损伤及修复过程。

广西健康青年H9、H6亚型禽流感病毒血清抗体调查

目的调查广西医科大学2007年新生中H9、H6亚型流感病毒的抗体水平,以了解广西健康青年是否已受到H9、H6亚型禽流感病毒感染。方法广西医科大学2007级新生血清168份,通过HI实验进行抗体检测。结果以HI抗体滴度≥1∶10为流感病毒抗体阳性,H9亚型抗体阳性率13.69%;有两份H6亚型抗体阳性。结论广西健康青年人群已受到禽流感H9亚型病毒株的感染,H6亚型也可能感染了人群。

肺组织低氧代谢中葡萄糖转运蛋白1的表达及其作用

目的探讨单肺通气对大鼠肺组织葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)表达的影响。方法 30只Sprague Dawley大鼠经10%水合氯醛4.5mL/kg腹腔注射麻醉后行气管插管术,建立单肺通气模型,将建模后大鼠随机分为对照组(n=6)与实验组(n=24),对照组大鼠采用主支气管插管双肺通气;实验组大鼠均为右主支气管插管通气,左侧肺不通气,按左侧肺不通气时间随机分为实验0.5h组、实验1.0h组、实验2.0h组及实验4.0h组,每组6只。采用透射电子显微镜观察大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)超微结构,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测大鼠肺组织GLUT1mRNA的表达情况。结果对照组AECⅡ细胞核内染色质分布均匀,细胞质内板层小体圆形且密度均匀,微绒毛清晰。各实验组AECⅡ的细胞核染色质、细胞质内板层小体、细胞膜及微绒毛等有不同程度的改变。与对照组比较,实验0.5h组、实验1.0h组大鼠肺组织GLUT1mRNA表达量显著降低(P<0.05);实验2.0h组大鼠肺组织GLUT1mRNA表达量略有降低,但差异无统计学意义(P>0.05);实验4.0h组大鼠肺组织GLUT1mRNA表达量明显增加(P<0.05)。除实验1.0h组与实验0.5h组大鼠肺组织GLUT1mRNA的表达差异无统计学意义外(P>0.05),其余各实验组两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论低氧条件下,肺组织GLUT1mRNA的上调对AECⅡ具有保护作用。

氟比洛芬酯对单肺通气下食管癌手术患者肺内分流及动脉氧合的影响观察

目的探讨氟比洛芬酯对单肺通气下食管癌手术患者肺内分流及动脉氧合的影响。方法择期行胸食管癌根治术的患者60例,随机分为F组和C组各30例。在麻醉诱导前15 min,F组静脉给予氟比洛芬酯,C组给予等量生理盐水。于侧卧双肺通气5 min(T1)、单肺通气30 min(T2)和恢复双肺通气30 min(T3)采集动静脉血样行血气分析并记录血流动力学指标,计算肺内分流率(Qs/Qt)。结果两组血液动力学指标、平均气道压(Pmean)、p H比较,差异无统计学意义(P均>0.05)。与T1时比较,两组T2、T3时Pa O2降低,Qs/Qt升高(P均<0.05);与T2时比较,两组T3时Pa O2升高,Qs/Qt降低(P均<0.05);与C组比较,F组T2、T3时Qs/Qt降低,T3时Pa O2升高(P均<0.05)。结论麻醉前15 min静脉给予氟比洛芬酯可减少食管癌根治术患者单肺通气时肺内分流,提高动脉氧合。

程序性坏死特异性抑制剂-1对呼吸机相关性肺损伤的保护作用

目的探讨程序性坏死特异性抑制剂-1(Nec-1)对呼吸机相关性肺损伤(VILI)大鼠的保护作用。方法将40只SD大鼠按随机数字表法分为自主呼吸组(C组)、正常潮气量(VT)组(N组)、高VT组(H组)和Nec-1组共4组,每组10只。C组保持自主呼吸,N组、H组和Nec-1组分别给予8、40、40 mL/kg的VT行机械通气,Nec-1组在机械通气开始时静脉给予Nec-1(1 mg/kg)。通气4 h后收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织标本,测定BALF中总细胞数、总蛋白水平、白细胞介素(IL)-6、IL-1β及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。测定肺组织湿/干质量比值(W/D),HE染色观察肺组织病理学改变并进行肺组织评分;采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)分别检测肺组织中受体相互作用蛋白1(RIPK1)、RIPK3和核转录因子-κB p65(NF-κB p65)的m RNA及蛋白表达。结果 C组和N组大鼠BALF中和肺组织各指标差异均无统计学意义。H组大鼠BALF中总细胞数、总蛋白、炎性因子IL-6、IL-1β、TNF-α水平、肺组织W/D比值、肺组织病理评分及肺组织内RIPK1、RIPK3、NF-κB p65的m RNA和蛋白相对表达水平较C组和N组明显升高(P<0.01)。与H组相比,Nec-1组大鼠BALF中和肺组织各指标水平下降(P<0.01)。结论 RIPK1/RIPK3/NF-κB信号传导通路参与大鼠VILI,Nec-1对大鼠VILI的肺脏具有一定的保护作用。

全麻下肺叶切除术后拔管延迟的因素分析

目的探讨影响肺癌患者行肺叶切除术后拔管延迟的因素。方法采用回顾性调查方法,收集广西医科大学附属肿瘤医院2008年10月至2013年10月706例在全麻下实施肺癌肺叶切除的患者的临床资料,记录患者一般情况、术前检查、术中和术后管理等相关因素,采用非条件Logistic逐步回归模型方法分析,筛选导致患者术后拔管延迟的相关因素。将706例分为正常拔管组655例和拔管延迟组51例。分析两组患者术后并发症的发生率和住院时间,以及拔管延迟与术后并发症、住院时间的关系。结果全组患者术后拔管延迟发生率为7.2%(51/706)。拔管延迟组和正常拔管组患者术后并发症的发生率分别为35.3%(18/51)和15.6%(102/655),拔管延迟组患者术后并发症的发生率明显高于正常拔管组,差异有统计学意义(P<0.05)。拔管延迟组和正常拔管组患者的平均住院时间分别为(17.5±6.2)d和(14.1±7.3)d,拔管延迟组患者的住院时间明显长于正常拔管组,差异有统计学意义(P<0.05)。经非条件Logistic逐步回归模型分析显示影响患者术后拔管延迟有5个独立危险因素:男性(OR=1.511,P=0.046);年龄>60岁(OR=6.568,P<0.001);单肺通气时间过长(OR=1.268,P=0.047);尿量<17 ml/h(OR=1.456,P=0.032);术前肺功能异常(OR=1.579,P=0.033)。结论肺癌患者行肺叶切除术术后拔管延迟将增加术后住院时间和并发症的发生。术后发生拔管延迟主要与患者术前肺功能较差、老年、男性患者、尿量及单肺通气时间长等多种因素的协同作用相关。

高浓度/低容量与低浓度/高容量左旋布比卡因在胸科术后硬膜外镇痛的效果比较

目的比较高浓度/低容量与低浓度/高容量左旋布比卡因镇痛液在胸科术后硬膜外镇痛中的效果及安全性。方法将开胸手术肺癌患者58例,采用随机数字表法分为高浓度/低容量组(A组)与低浓度/高容量组(B组),每组29例,两组术前、术中措施、麻醉及术式均相同,于手术结束前15 min,A组用0.25%左旋布比卡因100 ml,B组用0.125%左旋布比卡因200 ml硬膜外镇痛,两组镇痛时间均为48 h。观察两组术后4 h、8 h、12 h、24 h及48 h视觉模拟镇痛评分(VAS)、Ramsay镇静评分、Bromage运动神经阻滞评分、心率、平均动脉压、血氧饱和度和不良反应。结果 B组各时点VAS、Bromage运动神经阻滞评分,平均动脉压均低于A组(P均<0.05),但B组各时点的Ramsay镇静评分高于A组(P均<0.05),两组心率、血氧饱和度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论与高浓度/低容量相比,低浓度/高容量左旋布比卡因镇痛液用于胸科术后硬膜外镇痛,具有镇痛、镇静效果好、运动神经阻滞效应轻、平均动脉压波动大等特点。

盐酸戊乙奎醚抑制白细胞介素-1β诱导A549细胞分泌细胞间黏附分子-1及其机制的研究

目的探讨盐酸戊乙奎醚(PHC)抑制白细胞介素-1β(IL-1β)诱导A549细胞分泌细胞间黏附分子-1(ICAM-1)及其作用机制。方法体外培养A549细胞株,分别用培养液(A组)、PHC(B组)、IL-1β(C组)和IL-1β+PHC(D组)处理,NF-κB DNA结合活性试剂盒检测刺激后1 h NF-κB DNA结合活性;反转录-聚合酶链反应检测刺激后4 h ICAM-1 mRNA表达;酶联免疫吸附法检测刺激后24 h ICAM-1蛋白表达。结果 IL-1β刺激后,C组NF-κB DNA结合活性、ICAM-1 mRNA和蛋白明显升高(P<0.01),D组NF-κB DNA结合活性、ICAM-1 mRNA和蛋白高于A组(P<0.05),但低于C组(P<0.05),PHC预处理能抑制IL-1β诱导的NF-κB DNA结合活性、ICAM-1 mRNA和蛋白表达升高。结论 PHC可抑制IL-1β诱导A549细胞分泌ICAM-1,其机制可能通过抑制NF-κB激活。

广西医科大学2007年新生H3N2亚型流感病毒抗体调查

目的:调查广西医科大学2007年新生H3N2亚型流感病毒抗体,了解健康青年人群血清中H3N2亚型流感病毒抗体的水平,从而预测广西H3N2流感病毒引起的流感流行的趋势。方法:抽取广西医科大学2007年新生血清168份,通过血凝抑制实验进行抗体检测。结果:以血凝抑制抗体滴度≥1:10为H3N2亚型流感病毒抗体阳性,H3N2亚型流感病毒抗体阳性率为26.19%,抗体滴度≥1:40的占阳性的22.73%。结论:H3N2亚型流感病毒引起的流感在广西有流行,但流行强度不高,抗体滴度水平对人群的保护能力较低。

盐酸戊乙奎醚对肺泡Ⅱ型上皮细胞氧化损伤的影响

目的探讨盐酸戊乙奎醚对肺泡Ⅱ型上皮细胞氧化损伤的保护作用。方法用过氧化氢(H2O2)加入A549细胞培养液中制成A549细胞氧化损伤模型,实验分为空白对照组(C组)、H2O2处理组(H组)和盐酸戊乙奎醚-过氧化氢处理组(P组)。用MTT方法测A549细胞存活率,用TUNEL方法测定细胞凋亡指数,并测定细胞内的丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)、烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(NADPH)含量。结果与C组比较,H组的细胞存活率下降,凋亡指数增加,MDA含量上升,SOD、GSH、NADPH的含量下降(P<0.05)。与H组比较,P组的细胞存活率增加,凋亡指数下降,MDA含量下降,SOD、GSH、NADPH的含量增加(P<0.05)。结论盐酸戊乙奎醚对A549细胞过氧化损伤具有保护作用。

兔症状性脑血管痉挛期基底动脉ETRA、ETRB和eNOS基因表达的变化

目的:通过检测兔症状性脑血管痉挛模型基底动脉内皮素受体(ETRA、ETRB)和eNOS mRNA的表达及其变化,探讨ETRA、ETRB和eNOS在症状性脑血管痉挛(DCVS)引发脑血管损伤机制中的作用。方法:采用Endo法建立兔DCVS模型,将双侧颈总动脉结扎2周后存活的32只兔随机分为两组,即枕大池注生理盐水组(C组,8只)和注自体血组(D组,24只),后者以枕大池注自体血后观察的时间点分为3个亚组,即枕大池注自体血后第4天组(D4组)、第7天组(D7组)、第14天组(D14组),各亚组8只。评估各组神经功能、基底动脉痉挛程度及形态学变化,采用RT-PCR法测基底动脉中ETRA、ETRB和eNOS mRNA表达变化。结果:(1)神经功能评估、基底动脉痉挛的形态学变化及痉挛程度均较好的拟合DCVS的发生和变化。(2)C组兔脑基底动脉可见ETRA、ETRB和eNOS mRNA表达;与C组比较,ETRA mRNA在D4组、D7组、D14组均有升高(P>0.05);与C组比较,ETRB mRNA在D4组即有升高(P<0.05),D7组达高峰(P<0.01);与C组比较,D7组eNOS mRNA的表达减少更为明显(P<0.05)。结论:本实验建立的兔DCVS模型能较满意地模拟临床SAH后脑基底动脉的病理变化,兔基底动脉血管壁ETRA、ETRB、eNOS mRNA表达的变化及其演变时程与痉挛血管病理改变程度密切相关。

开胸手术术后肺部感染的危险因素分析

目的探讨开胸手术气管插管全麻术后,引起医院内肺部感染的相关危险因素。方法回顾性分析近5年行开胸手术的986例患者的临床资料,记录患者一般情况、术前检查、术中和术后管理等相关因素,采用非条件Logistic回归模型分析与术后肺部感染发生相关的因素。结果开胸手术术后肺部感染例数共58例,发生率为5.89%,非条件Logistic回归分析提示术前肺功能较差、使用吸入麻醉药、未使用单肺通气技术、手术时间较长4个独立危险因素与术后肺部感染率升高相关。结论开胸手术术后肺部感染是多因素协同作用引起的,主要与患者术前较差的肺功能、麻醉中使用吸入麻醉药、未使用单肺通气、手术进行时间较长多种因素相关。

程序性细胞死亡因子-1在大鼠肺缺血再灌注损伤中的作用

目的探讨程序性细胞死亡因子-1(PD-1)在大鼠肺缺血再灌注损伤中的作用与机制。方法将30只SD大鼠随机分成对照组、再灌注2 h组、再灌注6 h组、再灌注24 h组、再灌注72 h组,每组6只。采用左肺门全夹闭法造肺缺血再灌注模型。各组取左肺组织。计算肺组织湿干重比值(W/D);用HE染色法和电镜观察肺组织病理学变化;采用ELISA法检测肺组织IL-1β、IL-4、IL-6、IL-10水平;采用Western Blot法检测肺组织PD-1表达;采用免疫组化法检测肺组织CD11c、CD16、CD206、Arg1的表达。结果与对照组比,肺缺血再灌注2 h组开始有肺损伤,包括肺组织形态学和微结构的改变,肺损伤评分升高,再灌注6 h组损伤最严重,而后损伤程度逐渐减轻(P <0.05)。与对照组比,各实验组肺组织IL-1β、IL-4、IL-6、IL-10水平升高(P <0.05);其中,IL-1、IL-6、IL-10于再灌注6 h组达到高峰;IL-4于再灌注24 h组达到高峰。Western Blot显示,与对照组比,各实验组PD-1表达增高(P <0.05);其中再灌注6 h组表达最高。免疫组化显示,与对照组比,肺组织CD11c、CD16、CD206、Arg1在再灌注6 h组表达增高(P <0.05);与再灌注6 h组比,再灌注72 h组表达降低(P <0.05)。结论 PD-1可能参与了大鼠肺缺血再灌注损伤的发生,其机制可能与PD-1介导的肺巨噬细胞极化导致的炎症反应有关。

肿瘤相关性贫血对吸入和静脉麻醉效能的影响

目的比较不同程度肿瘤相关性贫血对七氟烷吸入麻醉和丙泊酚全凭静脉麻醉效能的影响。方法选择择期行腹腔镜手术的肿瘤相关性贫血患者120例,按照患者术前血红蛋白水平分为三组:正常血红蛋白组(A组:n=40,Hb≥120 g/L)、轻度贫血组(B组:n=40,90≤Hb<120 g/L)、中度贫血组(C组:n=40,60≤Hb<90 g/L),各组再随机分为七氟烷吸入麻醉(S组,n=20)和丙泊酚全凭静脉麻醉(P组,n=20)两个亚组。分别于诱导前(T1)、插管前(T2)、插管即刻(T3)、气腹建立时(T4)、拔除气管导管时(T5)和术后2 h(T6)抽取静脉血,记录各时点血氧饱和度(Sp O2)、平均动脉压(MAP)、心率(HR)和脑电双频指数(BIS);记录气腹压、气腹时间、总出血量、输血量和总输液量;比较每组患者血管活性药物使用情况、所需丙泊酚或七氟烷用量、睁眼时间、拔管时间及术后躁动和恶心呕吐的发生率;用酶联免疫吸附试验检测血清皮质醇、5-羟色胺(5-HT)的浓度。结果 S组内比较七氟烷用量差异无统计学意义(P>0.05),而CP组患者诱导及维持期丙泊酚用量较AP组明显减少(P<0.05)。S组睁眼时间比P组短(P<0.05),术后躁动、恶心呕吐的发生率比P组高(P<0.05)。S组和P组患者T3、T5时点较T1时点的皮质醇与5-HT浓度明显升高,较T2时点明显下降,差异有统计学意义(P<0.05),组间与组内比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论肿瘤相关性贫血患者丙泊酚全凭静脉麻醉较七氟烷吸入麻醉术后苏醒慢,但躁动及呕吐发生率低。中度贫血患者较正常血红蛋白患者丙泊酚全凭静脉麻醉用药少,但血管活性药物使用率高。

氯诺昔康与曲马多对肝癌术后自控镇痛的临床疗效及安全性评价

目的评价氯诺昔康与曲马多对肝癌术后自控镇痛的临床疗效和安全性。方法将54例全麻下肝癌手术患者随机分为试验组28例和对照组26例。试验组予以氯诺昔康96 mg+0.9%氯化钠至150 m L,自控镇痛泵入;对照组予以曲马多96 mg+0.9%氯化钠至150 m L,自控镇痛泵入。于术后4,12,24,48 h,用视觉模拟评分法和舒适度评分法对患者进行镇痛及舒适度评价;同时记录2组患者术后48 h内不良反应发生率。结果 2组患者术后各时点镇痛及舒适度评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。试验组不良反应发生率为14.3%,对照组不良反应发生率为19.2%(P>0.05)。结论氯诺昔康与曲马多均可用于肝癌术后自控镇痛,其临床疗效及不良反应无显著差异。

羟考酮预防结直肠癌手术患者全麻后寒战

目的观察羟考酮对结直肠癌手术患者全麻后寒战的预防作用。方法拟全麻下行结直肠癌手术的患者120例,随机分为羟考酮组和对照组,每组60例。两组麻醉诱导和维持方法相同。羟考酮组在手术结束前30 min静脉给予羟考酮注射液0.08 mg·kg^(-1),对照组给予等体积的氯化钠注射液。监测心率(HR)、平均动脉压(MAP)、血氧饱和度和鼻咽温度,记录麻醉前(T_0)、手术开始时(T_1)、手术结束时(T_2)、拔管时(T_3)、拔管后30 min(T_4)和60 min(T_5)患者的HR和MAP值。观察并记录T_3、T_4和T_5时的视觉模拟量表(VAS)评分和Ramsay镇静评分,记录拔管后1 h内寒战分级及不良反应发生的情况。结果最终完成114例,羟考酮组58例,对照组56例。与T0时比较,对照组患者T_3、T_4和T_5时间点HR明显增快(P<0.05),MAP增高(P<0.05),而羟考酮组HR和MAP无明显变化。对照组寒战发生率为36%(21/58),明显高于羟考酮组(14%,8/56,P<0.05)。T_3、T_4和T_5时间点羟考酮组患者的Ramsay镇静评分高于对照组,VAS评分低于对照组(均P<0.05)。两组均无严重不良反应发生,恶心、呕吐发生率组间无显著差异(P>0.05)。结论手术结束前30 min给予羟考酮0.08 mg·kg^(-1)可有效预防结直肠癌手术患者全麻后寒战的发生。

肺泡巨噬细胞Toll样受体9-髓样分化因子88信号通路在呼吸机相关性肺损伤中的作用机制研究

目的 探讨肺泡巨噬细胞Toll样受体9（TLR9）-髓样分化因子88（MyD88）信号通路在呼吸机相关性肺损伤（VILI）中的作用.方法 清洁级SD大鼠30只,按随机数字表法将大鼠分为3组,每组10只.A组保留自主呼吸作为对照;B组给予正常潮气量（VT,7 mL/kg）机械通气4h;C组给予大VT（40 mL/kg）机械通气4h.机械通气结束时,透射电镜下观察大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞（AECⅡ）超微结构改变;测定肺组织湿/干质量（W/D）比值以及支气管肺泡灌洗液（BALF）中总蛋白、白细胞介素（IL-6、IL-1β）的浓度;用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）分别检测肺泡巨噬细胞TLR9、MyD88、核转录因子-κB（NF-κB）的蛋白及其mRNA表达.结果 A、B组大鼠AECⅡ细胞超微结构基本正常;C组AECⅡ胞质内板层小体、细胞膜、细胞核中的染色质及微绒毛等均有不同程度的损伤性改变.C组较A组、B组肺组织W/D比值（5.54±0.17比4.58±0.17、4.69±0.16）,BALF中总蛋白（g/L：6.33±0.61比0.45±0.05、0.47±0.04）、IL-6（μg/L：1.989±0.103比1.033±0.061、1.010±0.069）、IL-1β（ng/L：2.79±0.25比1.05±0.15、1.23±0.22）,肺泡巨噬细胞TLR9、MyD88、NF-κB的蛋白表达[TLR9（A值）：0.770±0.042比0.300±0.027、0.310±0.037,MyD88（A值）：0.950±0.091比0.560±0.082、0.580±0.084,NF-κB（A值）：1.020±0.076比0.740±0.052、0.700±0.076]均明显升高,差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）.B组肺泡巨噬细胞TLR9、MyD88、NF-κB的mRNA表达分别是A组的（1.13±0.32）倍、（1.18±0.33）倍、（1.11±0.22）倍,差异均无统计学意义（均P＞0.05）;C组肺泡巨噬细胞TLR9、MyD88、NF-κB的mRNA表达分别是A组的（8.66±0.69）倍、（6.41±0.53）倍、（5.29±0.71）倍,差异均有统计学意义（均P＜0.01）.结论 肺泡巨噬细胞TLR9-MyD88信号通路参与并介导了机械通气所致的肺损伤.

Racl／MAPK／ERK通路在大鼠呼吸机相关性肺损伤中的作用及机制

目的探讨Ras相关C3肉毒素底物1／丝裂素活化蛋白激酶，细胞外信号调节激酶（Rac1／MAPK／ERK）信号通路在大鼠呼吸机相关性肺损伤（VILI）中的作用及其机制。方法将30只SD大鼠按随机数字表法分为自主呼吸组、正常潮气量（VT）组和大VT组，每组10只。自主呼吸组大鼠保留自主呼吸；正常VT组和大VT组大鼠均行气管切开后气管插管，双肺分别给予6mL/kg和40mL／kg VT的机械通气并维持麻醉。通气4h后处死大鼠取心脏血、支气管肺泡灌洗液（BALF）和肺组织。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清和BALF中白细胞介素（IL-1β、IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、髓过氧化物酶（MPO）及巨噬细胞炎症因子-2（MIP-2）水平。测定肺组织湿／干重比值（W／D）；苏木素-伊红（HE）染色后，光镜下观察肺组织病理学改变，并进行病理学评分；透射电镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞（AECⅡ）超微结构改变；采用免疫组化法检测肺组织磷酸化细胞外信号调节激酶（p-ERK）阳性表达，采用免疫荧光技术检测肺组织Rac1和F-肌动蛋白（F-actin）的阳性表达；采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）检测肺组织ERK及Rael的mRNA表达；采用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测肺组织Rac1、p-ERK及F-aetin的蛋白表达。结果①与自主呼吸组比较，机械通气两组肺W/D比值均明显升高，以大VT组升高更为显著（6．64±0．88比1．79±0．36，P〈0．01）。②自主呼吸组肺组织及AECⅡ超微结构无明显病理学改变。正常VT组肺组织有轻微水肿及少量炎性细胞浸润；AECⅡ板层小体较少，细胞膜绒毛分布欠均匀。大VT组肺组织明显水肿，肺间隔增宽，肺泡充血，伴有大量炎性细胞浸润，肺泡结构紊乱；AECⅡ形态不规则，核固缩明显，胞质中板层小体数量减少且分布不均。大VT组肺组织病理学评分明显高于自主呼吸组和正常VT组（分：12．00±2．00比6．00±1．51、8．50±0．93，均P〈0．01）。③与自主呼吸组比较，机械通气两组血清及BALF中IL-1β、IL-6、TNF-α、MPO、MIP-2水平均明显升高，以大VT组升高更为显著[血清IL-1β（ng／L）：104．2±15．1比20.3±8.3，IL-6（ng／L）：46．6±11．5比22．7±7．5。TNF-α（ng／L）：39．4±6．5比5．4±1．9，MPO（ng／L）：0．66±0．24比0．06±0．03，MIP-2（ng／L）：109．2±25．8比22．8±8．4；BALF中IL-1β（ng／L）：121．5±25．6比24．0±7．5，IL-6（ng／L）：136．7±32．7比31．4±10．5，TNF-α（ng／L）：98．0±14．8比10．1±2．6，MPO（ng／L）：0．80±0．31比0．08±0．04，MIP-2（ng／L）：144．4±28．9比41．2±20．7；均P〈0．01]。④自主呼吸组仅有极少量p-ERK、Rac1和F-actin阳性表达；正常VT组阳性表达有所增加；大VT组P-ERK阳性表达明显增加，Rac1、F-actin分别分布于细胞膜和细胞质，阳性表达进一步增强。⑤大VT组ERK、Rac1基因和p-ERK、Rac1、F-actin蛋白表达量明显高于自主呼吸组和正常VT组[ERK mRNA（2^-△△Ct）：8．23±2．83比1、3．02±1．38，p-ERK蛋白（灰度值）：1．15±0．36比0．61±0．23、0．88±0．22；Rac1 mRNA（2^-△△Ct）：4．45±2．26比1、1．22±0．39，Rac1蛋白（灰度值）：0．91±0．16比0．48±0．11、0．55±0．10；F-actin蛋白（灰度值）：0．70±0．09比0．49±0．08、0．55±0．04；均p〈0．01]。结论VILI模型大鼠肺组织F-actin表达明显上调，AECⅡ骨架重构和细胞膜通透性改变，推测F-actin可能通过激活Rac1／MAPK／ERK信号通路加重VILI。

调控Toll样受体2/核转录因子-κB信号通路对呼吸机相关性肺损伤大鼠的影响

目的 观察Toll样受体2/核转录因子-κB（TLR2/NF-κB）信号通路预处理在呼吸机相关性肺损伤（VILI）中的作用。方法 将30只雄性SD大鼠按随机数字表法分为3组，每组10只。A组：经气管导管缓慢滴入10μg/kg TLR2单克隆抗体（TLR2-mAb）200μL干预后，40 mL/kg潮气量（VT）行机械通气；B组：8 mL/kg VT行机械通气；C组：滴入10μg/kg无生物学活性的TLR2-mAb作为同型抗体干预后，40 mL/kg VT行机械通气。于通气4h计算肺湿/干质量（W/D）比值，镜下观察肺组织病理学及细胞超微结构改变；用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清和支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞介素（IL-1β、IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平；用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测肺组织TLR2、NF-κB及髓样分化因子88（MyD88）的mRNA表达。结果 显微镜下观察显示：A、B组肺组织无明显病理学改变，肺泡巨噬细胞、Ⅰ型和Ⅱ型肺泡上皮细胞超微结构无明显损伤；C组可见明显肺泡腔融合，肺间隔增宽，大量炎性细胞聚集，肺泡巨噬细胞、Ⅰ型和Ⅱ型肺泡上皮细胞胞膜破坏，胞质大量空泡化，细胞器破坏严重，细胞核固缩，核周隙明显增宽。A、B组肺W/D比值以及血清和BALF中炎症细胞因子水平均较C组明显降低〔肺W/D比值：1.151±0.026、1.128±0.048比1.403±0.062；血清IL-1β（ng/L）：37.05±5.61、34.52±4.31比51.45±8.18，IL-6（ng/L）：53.65±5.16、55.77±5.62比89.96±7.08，TNF-α（ng/L）：71.93±13.29、67.36±11.42比96.20±11.60；BALF中 IL-1β（ng/L）：56.48±6.16、54.44±7.26比99.77±8.41，IL-6（ng/L）：172.44±21.26、163.47±18.70比216.22±23.90，TNF-α（ng/L）：235.81±42.75、231.72±40.38比374.85±69.61，均P＜0.01〕，而A组与B组上述指标差异均无统计学意义（均P＞0.05）。A、B组肺组织TLR2、MyD88和NF-κB的mRNA表达均明显低于C组〔TLR2 mRNA（2-ΔΔCt）：1.021±0.287、0.938±0.196比3.862±0.871，MyD88 mRNA（2-ΔΔCt）：1.235±0.277、1.300±0.306比3.618±1.107，NF-κB mRNA（2-ΔΔCt）：0.519±0.036、1.043±0.170比20.280±9.466，P＜0.05或P＜0.01〕，而A组与B组上述因子基因表达差异均无计学意义（均P＞0.05）。结论 TLR2-mAb预处理通过阻断TLR2/NF-κB信号通路可减轻VILI模型大鼠炎症细胞因子的释放，在一定程度上减轻VILI。