费氏中华根瘤菌与耐盐有关基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

费氏中华根瘤菌（Ｓｉｎｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｆｒｅｄｉｉ）ＲＴ１９与耐盐有关的４．４ｋｂ ＤＮＡ片段含有３个相间的开放阅读框，经亚克隆及功能检测，证实其中的ＯＲＦ２与耐盐有关。将ＯＲＦ２分别克隆到表达载体以ｐＴＨｉｏＨｉｓＡ、Ｂ和Ｃ上，得到３个重组质粒ｐＧＡ、ｐＧＢ和ｐＧＣ，转化大肠杆菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）ＤＨ５α。经ＩＰＴＧ诱导后和作ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，发现只有ｐＧＣ编码的融合蛋白获得了表达。其分子量为５３ｋＤａ，恰好是ｔｒｘＡ基因编码的硫氧还蛋白与推测的蛋白质分子量之和。Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹证实，表达的蛋白质是ｔｒｘＡ基因和目的基因编码的。

桥梁过渡墩盖梁支撑体系分析

针对大体量混凝土施工中模板支架支撑稳定性问题,进行支架受力分析。基于阳江某特大桥工程,设计了钢管桩+贝雷梁+型钢组合的过渡墩盖梁支撑系统,并建立了过渡墩支撑体系的精细化有限元模型,分析了盖梁支架的强度、位移和稳定性性能,结果表明各支架构件均满足强度、刚度、稳定性等各项要求;钢管桩+贝雷梁+型钢组合的支撑体系具有安全稳定、灵活可调、承载能力高、施工效率高以及经济实用等优势;为保证施工安全,桩顶部、底部受力集中,建议设置加强肋,避免局部变形。为以后类似的工程提供了新的思路,具有较强的借鉴和指导价值。

苜蓿中华根瘤菌与耐盐有关DNA片段的亚克隆和测序分析

将苜蓿中华根瘤菌 (Sinorhizobiummeliloti) 0 4 2B与耐盐有关的 4kbClaⅠDNA片段克隆在 pML1 2 2上 ,用HindⅢ酶切下其 2 4kbDNA片段 ,回收后与 pBBR1 MCS2连接 ,然后转化大肠杆菌 (Escherichiacoli)DH5α,筛选到转化子GS2。将残留在 pML1 2 2上 1 6kbClaⅠ HindⅢDNA片段连同质粒一起回收 ,让其自连 ,转化大肠杆菌S1 7- 1 ,得到转化子GS0。以GS0为供体 ,0 4 2B的盐敏感突变株GZ1 7为受体 ,进行二亲本杂交 ,没有得到接合子。以GS2为供体 ,GZ1 7为受体 ,在辅助质粒pRK2 0 1 3的协助下 ,进行三亲本杂交 ,筛选到接合子GG2 ,获得 2 4kbHindⅢ与耐盐有关的DNA片段。将此片段连接到测序载体 pGEM 7Zf(+)上进行测序。测序结果表明 ,该 2 4kbHindⅢDNA片段含有 3个开放阅读框 (ORF)。在此基础上再一次亚克隆 ,获得 1 9kb与耐盐有关的DNA片段。

苜蓿中华根瘤菌与耐盐有关基因rstA在大肠杆菌中的高效表达及其产物的纯化

苜蓿中华根瘤菌(Sinorhizobiummeliloti) 0 4 2BM与耐盐有关的1 9kbDNA片段含有两个开放阅读框,采用PCR方法分别将它们扩增,连接到穿梭质粒上,并进行了耐盐功能检测,证明其中的ORF2具有耐盐性,定名为rstA基因。将它分别克隆到表达载体pThio HisA、B和C上,构建成重组质粒pGSA、pGSB和pGSC ,转化大肠杆菌(Escherichiacoli)Top10后,经IPTG诱导,pGSA获得高效表达。表达蛋白占菌体总蛋白的36 % ,但大多数以包涵体形式存在。对表达产物依次进行ProBondTM树脂亲和纯化、饱和硫酸铵盐析,最后得到纯度为95 %的融合蛋白。SDS PAGE显示纯化的蛋白质为分子量4 3kD的单一蛋白带。

大型桥梁施工控制网的建立与维护

详细介绍了现代大型桥梁施工控制网的建立方法和要求 ,具体的是选点与埋石、坐标系选择、投影面选择三方面问题 。

大型桥梁施工测量信息管理系统中信息可视化的实现

讨论了大型桥梁施工测量信息管理系统中测量信息的可视化实现问题,具体介绍了控制点信息、施工检测信息和变形监测信息的可视化的内容以及实现的方法。

科技期刊微信公众号的策划与运营——以“自动化学报”微信公众号为例

新媒体时代,针对科技期刊微信公众号运营的困境,以“自动化学报”微信公众号为例,介绍了微信公众号被认识、认知、认可的宣传推广过程与规律,分享了针对不同的目标用户,微信公众号宣传推广方法以及微信公众号维护方法:精心策划,贴心服务。

差压铸造在薄壁复杂铝合金铸件生产中的应用

通过对重力条件下生产的薄壁复杂铝合金产品的缺陷分析,提出了在差压条件下对铸造工艺进行改进的措施。结果表明:采用差压工艺,该铸件的充型能力大幅增强;力学性能明显提高;针孔、疏松组织及氧化夹渣对铸件的不利影响减轻,铸件的致密性大幅提高。

科技期刊著作权认知现状调查研究

对科技期刊而言,要践行中国特色知识产权发展之路,首先要了解科技期刊著作权认知现状。本文在对入选中国科技期刊卓越行动计划的102本期刊进行词频分析的基础上,结合著作权法设计发布“我国科技期刊著作权协议细则问题调查问卷”。调研结果显示,当前著作权认知存在版权保护意识淡薄;科研工作者版权知识欠缺,维权动力不足;期刊编辑版权认知水平参差不齐的问题。针对这些问题,笔者提出从上到下,上下合力,多层次、全方位地做好科技期刊著作权保护工作的策略。

工程控制网点位稳定性分析方法的研究

分析讨论平面施工控制网整体稳定性分析的方法及其存在的问题,并结合实例详细介绍在施工过程中利用测量边长等检验控制点稳定性的原理和评判标准。

长期贮存航天电连接器尘土污染的研究

针对长期贮存后的航天电连接器进行尘土污染对连接器电接触可靠性影响的研究,通过对长期贮存连接器的接触电阻、分离力检测和连接器内部及电接触表面尘土颗粒成分、分布密度、颗粒度的微观检测统计分析,发现连接器接触电阻随贮存时间增加而增加,不仅与分离力降低有关而且与尘土污染相关。尘土颗粒不仅在连接器的生产、装配、贮存等过程中进入连接器内部,而且在触点电镀过程中就沉积在镀层内。长期贮存环境中,尘土污染结合触点弹性材料的应力松弛、大气腐蚀等作用对连接器的电接触特性产生了综合影响。

我国新型农村合作医疗制度存在问题研究综述

国内外专家对我国新型农村合作医疗制度的研究主要集中在以下几个方面:我国新型农村合作医疗制度的定性问题、新型农村合作医疗运行过程中的逆向选择和道德风险问题、新型农村合作医疗的保障程度问题,本文对他们的观点进行了概括和总结,并提出了我国新型农村合作医疗制度需要进一步研究的问题。

铝合金薄壁壳体件差压数值模拟研究

利用有限元分析软件ProCAST对铝合金薄壁壳体件的浇注过程进行了数值模拟,获得了铸件充型的临界充型时间,为成形该类零件提供了参考,并在生产应用中获得了很好的效果。

浅析差压铸造件粘砂机理及解决措施

基于多年从事差压铸造工艺试验及研究的经验及数据,结合差压铸造理论,就铝合金差压铸造件产生粘砂的特点及原因进行了深入的研究和总结。研究结果表明,影响其粘砂的因素主要有铸造用砂及型砂本身物理特性、结壳时间、结晶增压压力、铸型(芯)表面质量、充型速度、铸件局部过热等因素的影响,并就上述影响因素提出了相应的解决措施。

中国跳小蜂科二新纪录种（膜翅目：跳小蜂科）

本文报道了作者于１９９３－０４～０５间在安徽省采集的寄生外虫的跳小蜂２种，即日本羽盾跳小蜂Ｃａｅｎｏｈｏｍａｌｏｐｏｄａｓｈｉｋｏｋｕｅｎｓｉｓ（Ｔａｃｈｉｋａｗａ）和狭顶扁角跳小蜂ＡｎｉｃｅｔｕｓａｎｇｕｓｔｕｓＨａｙａｔ，皆为中国新纪录种。文中描述了它们的形态特征，记录了它们的寄生和分布。

费氏中华根瘤菌与耐盐有关的DNA片段的亚克隆和测序

将费氏中华根瘤菌（Ｓｉｎｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｆｒｅｄｉｉ） ＲＴ１９与耐盐有关的２３ｋｂ ＤＮＡ片段用ＢａｍＨＩ酶切成大小不同的长度，分别与质粒 ｐＭＬ１２２连接，然后转化大肠杆菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ）Ｓ１７－１，筛选出３个转化子。以这些转化子为供体，ＲＴ１９的盐敏感突变株ＲＣ３－３为受体，分别进行二亲本杂交，筛选到接合子ＢＲ２，得到４．４ｋｂ与耐盐有关的ＤＮＡ片段。根据其物理图谱，酶切成６个ＤＮＡ片段，并分别连接到质粒ｐＵＣ１８进行测序。测序分析表明，该４．４ｋｂＤＮＡ片段含有ｆｉｘＯ、ｆｉｘＮ基因和３个开放阅读框（ＯＲＦ）。

在MCS-51单片机上移植μC/OS-Ⅱ

介绍了实时嵌入式操作系统μC/OS-Ⅱ及有关硬件移植的要点。在MCS-51系列中典型的单片机AT89C52上移植该操作系统,经过裁剪的操作系统通过了移植测试,成功加载和创建了一系列任务,并达到了实时性的要求。解决了嵌入式操作系统μC/OS-Ⅱ移植中的难题。

南京新济洲国家湿地公园湿地生态系统健康评估

湿地生态系统健康评估可为湿地公园修复和管理提供理论依据。基于2020年新济洲国家湿地公园综合考察和数据分析,从湿地自然环境、生态功能、社会环境3个方面选取了12个指标,采用层次分析法和模糊综合评价法评估了新济洲湿地生态系统的健康状况。结果表明:新济洲湿地生态系统的健康综合指数为0.702,处于Ⅱ级健康水平,健康状态良好;自然环境、生态功能的健康综合指数分别为0.719、0.707,处于Ⅱ级健康水平;社会环境的健康综合指数为0.592,处于Ⅲ级亚健康水平。湿地生态系统健康的主要制约因素为水质状况和人类活动强度,建议实时监测水质污染情况,加强湿地公园管理体系和建设施工的管控,减小施工对湿地环境的影响。

三维可视化控制技术在基坑支护中的应用

结合某深基坑支护工程实例,为有效避开基坑临近地下管线,解决阴角处锚杆间的相交等问题,运用Sketchup软件建立等比例三维模型,并不断根据现场进度及施工情况微调模型,形成可用于指导现场施工的三维可视化控制技术。案例分析表明,三维可视化技术用于基坑支护工程实践指导,具有较强的可行性与先进性,对于提升施工进度,降低施工风险,节约财力、物力等具有重要促进作用。

钢管混凝土独塔双索面斜拉桥稳定性分析

以钢管混凝土独塔双索面斜拉桥——息县淮河大桥为工程背景,采用ABAQUS软件开展数值模拟分析,假设桥墩及0号块为刚体,斜拉索为刚度极高的实心钢材,索塔底部与桥墩及0号块固结,索塔底部x,y,z向均不产生位移及转动,建立钢管混凝土索塔有限元模型,对斜拉索安装过程中索塔应力和变形进行计算分析,并与实测数据进行对比,验证有限元模型的可靠性。研究结果表明,索塔底部钢管和核心混凝土应力均较大,即应力集中区域为索塔底部固结区域;索塔在斜拉索索力不断增加的情况下发生偏移变形,但不影响整个桥梁的稳定性;数值模拟得到的索塔应力、塔顶位移变化规律接近实际施工过程中的变化规律,可知模拟结果可靠、可信。为保证施工质量及结构安全,需在应力集中区域埋设应力传感器。