大鼠心脏移植后淋巴细胞5种免疫分子表达的变化

目的 :观察大鼠异体异位心脏移植术后不同时间点 ,淋巴细胞相关免疫分子的表达水平、供心存活率及心肌组织的病理学改变 ,探讨免疫排斥反应的相关时间进程。方法 :分别经供体SD大鼠的心脏主动脉、肺动脉与受体Wistar大鼠的腹主动脉及下腔静脉吻合 ,进行异位心脏移植术。于术前及术后不同时间点 ,取血分离淋巴细胞。用流式细胞仪分别检测淋巴细胞上CD4、CD8、IL 2R、ICAM I和MHC II类分子的表达水平。对供心心肌组织进行常规病理学检查。结果 :于移植后2 4h ,只有MHC II类分子的表达水平增加 ,CD4、IL 2R和I CAM I的表达水平降低 ,CD8无改变。术后 72h,CD4、CD8及IL 2R的表达增加 ,其中CD8和IL 2R达峰值。术后 7～ 10d ,除CD4的表达继续增加外 ,其他 4种免疫分子的表达水平逐渐降低。术后不同时间点移植心脏的存活率分别为 :10 0 % (2 4h)、85 .7% (72h)、16 .7% (7d)、0 (10d和 12d)。病理学检查显示 ,移植后 2 4h ,心肌组织无明显的病理学变化 ,术后 3d ,7只大鼠中 4只出现ⅠA级及以上病理改变。术后 7d ,6只大鼠全部发生Ⅱ级以上的病理学变化。结论 :大鼠心脏移植后的 2 4h内 ,外周血淋巴细胞为以MHC II分子表达为主的抗原识别、呈递期 ,并伴有一过性免疫功能降低 ;术后 2 4～ 72h为T细胞活化期 。

硒对心脏移植大鼠外周血单个核细胞免疫分子、基因表达的影响

目的探讨微量元素硒对大鼠异体异位心脏移植后免疫排斥反应过程中免疫分子和基因表达的影响。方法大鼠分为对照及药物干预组。干预组分别于心脏移植术前后每天灌胃给予硒（40μg·kg^-1）及环孢素A（15mg·kg^-1），对照组给予同等体积生理盐水。3组分别在移植术前及术后1，3，7，10和12d取外周血，分离单个核细胞（PBMC）。荧光单克隆抗体（mAb）标记，流式细胞仪检测MHC-Ⅱ，CD4，CD8，R2-R和ICAM-Ⅰ免疫分子表达水平。荧光基因差异显示分析法检测多基因表达水平。国际器官移植排斥反应病理诊断标准对移植心肌组织进行病理分级。结果①对照组移植心脏存活率于术后3d时下降，7—12媳剧下降；硒组移植心脏存活率术后7d时下降，10—12d存活率为43％；环孢素A组术后3d移植心脏存活率下降50％，12d时为30％。②对照组及环孢素A组术后24h移植心肌组织分别有12．5％和33．3％发生Ⅱ级以上病理损伤，硒组术后7d出现Ⅱ级以上病理损伤。③与对照组比较，心脏移植术前后，硒对PBMC表面免疫分子MHGⅡ，CD8，IL-2R及ICAM-Ⅰ的表达均有抑制作用（P〈0．05或P〈0．01），环孢素A对ID2R有较强的抑制作用。④硒及环孢素A对心脏移植术后2，3-bisphosohoglycerate的mRNA表达均有抑制作用。与对照组比较，硒对gig18的mRNA为负调表达，环孢素A为正调表达。结论微量元素硒可能通过调节2，3-bisphosphoglycerate和gig18等细胞代谢和凋亡相关基因的转录，抑制PBMC表面免疫分子MHC-Ⅱ，CD8，IL-2R和ICAM-Ⅰ的表达，从而对心肌细胞起到保护作用，提高大鼠移植心脏存活率。

环孢素A对心脏移植大鼠外周血单个核细胞免疫分子表达的影响

目的 通过对大鼠心脏移植 ,探讨环孢素A对免疫排斥反应过程中免疫分子表达的影响。方法 将大鼠分为 2组 ,用药组大鼠心脏移植术前后以 15mg·kg-1体重环孢素A灌胃给药 ;对照组灌胃给予同等体积的生理盐水。 2组分别在移植前、移植术后 1,3,7,10和 12d取血 ,用荧光单克隆抗体 (mAb)标记单个核细胞免疫分子 ,流式细胞仪检测MHC II,CD4 ,CD8,ICAM I和IL2 R的表达水平。结果 大鼠心脏移植前 ,环孢素A组外周血单个核细胞表面免疫分子CD4的表达水平明显低于对照组 ,移植术后 ,环孢素A组的CD4和ICAM I的正调表达时相出现于移植后的前 2 4h内 ,环孢素A组的CD8于移植后第 2 4小时至第 3天时 ,出现一个负调表达的低谷 ,这一负调表达期比对照组延长了 2d ,而环孢素A组CD8开始正调表达时相是移植后第 3天 ,比对照组正调表达时相晚 2d ,比同组CD4和ICAM I开始正调表达时相晚 2～ 3d ,比同组IL 2R开始正调表达时相晚 2d。结论 ①环孢素A不抑制急性器官移植排斥反应早期 (抗原呈递期 )外周血单个核细胞对MHC Ⅱ 抗原肽复合物的表达过程 ;②环孢素A不能有效抑制ICAM I的表达 ,而是促进其表达 ;③环孢素A不能有效抑制MHC Ⅱ 抗原肽和ICAM I通过TCR共同介导的CD4 + T单个核细胞激活过程 。

mRNA差异表达片段与肺血栓栓塞的相关性研究

目的探讨mRNA差异表达片段与肺血栓栓塞症的关系。方法提取于2001年9月至2002年4月首都医科大学附属北京安贞医院呼吸内科收治的肺血栓栓塞症患者11例和健康对照者11名外周血单个核细胞总RNA,筛选肺动脉血栓栓塞患者差异表达的mRNA片段,并进行表达量鉴定和同源性比较。结果共分离、筛选出55条差异表达条带,选择其中10条(与对照组相比,上调或下调3倍以上)进行克隆测序分析,与GenBank进行读框分析比较,从中得到2个同源性低的未知基因,证实为新基因片段,分别命名为g44、g48;以g44为探针,进行Northern杂交,发现此片段在对照组及疾病组均有杂交信号,但疾病组杂交信号明显强于对照组的杂交信号。结论g44、g88,此片段在肺动脉血栓栓塞疾病组有较强的表达,提示其表达可能与疾病的发生发展密切相关。