铁死亡在急性肾损伤中的研究进展

急性肾损伤(AKI)是临床常见的危重疾病,具有较高的发病率和死亡率,其不良预后极大地加重了社会负担和患者的经济负担。AKI的发病机制复杂,涉及多种因素,新的证据表明铁死亡在AKI的发病中发挥着重要作用。本文就铁死亡发生时的细胞特征和调控机制,以及其在各种AKI类型中的研究进展进行综述。

糖化终末产物对内皮细胞氧化应激的影响

目的研究糖化终末产物(AGEs)对猪髂动脉内皮细胞(PIEC)氧化应激的影响。方法不同浓度AGEs干预PIEC一定时间后,MTT比色法检测细胞活力变化。运用活性氧(ROS)捕获剂双氢-乙酰乙酸二氯荧光黄(DCFH-DA)孵育细胞,通过流式细胞仪检测细胞内二氯荧光黄(DCF)的荧光强度而测得细胞内ROS水平。结果随着AGEs浓度的增加和作用时间的延长,PIEC活力明显下降(P<0.05);细胞活力下降与作用浓度及时间呈显著正相关(r=0.927,P<0.01)。经DCFH-DA孵育后流式细胞仪检测显示,AGEs处理组细胞内DCF平均荧光强度较空白对照组明显升高。结论AGEs抑制内皮细胞活力,使细胞内ROS生成明显增加,直接诱导内皮细胞的氧化应激。

血浆置换在急诊危重病中的应用

目的:评价急诊危重病患者中血浆置换(PE)的应用及对患者的临床疗效。方法:回顾性分析我院急诊重症监护室(EICU)2009年3月至2012年11月收治的13例行血浆置换治疗的病例,观察和比较生化指标和临床疗效。结果:13例患者平均ICU住院时间为(26.9±18.9)d,脓毒症组ICU住院时间短于非脓毒症组(P<0.01),平均病死率为46%,脓毒症组病死率高于非脓毒症组(P>0.05)。PE治疗后,血生化指标和炎症指标得到改善(P<0.05)。结论:PE可以作为急诊不同病种危重病患者尤其是脓毒症的辅助疗法。

脓毒症急性肾损伤研究进展

感染所致的全身炎症反应综合征定义为脓毒症,在脓毒症患者中急性肾损伤（acute kidney injury,AKI）的发生率高达47.9%,28 d病死率为32.7%-[1]。目前认为脓毒症相关急性肾损伤（sepsis-associated AKI,SAAKI）与死亡风险增加和住院时间延长独立相关-[2],相当大一部分AKI患者发展成终末期肾病-[3]。因此,SAAKI需要尽早干预,而其中的机制并未得到明确。在AKI相关的主要病因中脓毒症、

高浓度葡萄糖在内皮细胞氧化应激中的作用

目的探讨高糖对猪髂动脉内皮细胞(PIECs)氧化应激的影响。方法不同浓度高糖干预PIECs一定时间后,应用活性氧(ROS)捕获剂dihydroethidium(DHE)、双氢罗丹明123(DHR123)孵育细胞,通过荧光显微镜观察细胞内DHE染色,流式细胞仪检测细胞内罗丹明123(rh123)的平均荧光强度(MFI)而测得细胞内ROS水平;以二甲基吖啶硝酸盐为化学发光试剂,通过化学发光仪检测加入NADPH后发光值的变化,以反映高糖对PIECs中NADPH氧化酶(NOX)活性的影响。设立正常组和甘露醇组作为对照。结果随着高浓度葡萄糖作用浓度和时间的增加,荧光显微镜下高糖组细胞内DHE荧光增强;流式细胞仪检测显示,高糖组细胞内rh123的MFI较对照组明显升高;化学发光仪检测表明,高糖组细胞NOX活性升高显著。结论高糖导致细胞发生氧化应激,其对细胞的损伤作用可能与氧自由基生成过多、ROS蓄积有关,该效应可能由NOX介导。

气管插管固定器在机械通气患者中的应用

目的探讨气管插管固定器在急危重症患者中的临床应用价值。方法将82例经口气管插管患者，分为简易针筒胶带固定组32例、口含管胶带固定组22例和气管插管固定器组28例．进行人工气道受压率、自行拔管发生率及并发症发生率的比较。结果气管插管同定器组人工气道受压发生率（0）、自行拔管发生率（3．57％，1／28）及并发症发生率（0）与简易针筒胶带固定组的50．00％（16／32）、21．88％（7／32）、15．62％（5／32）比较均明显减少（P〈0．01或〈0．05）。且自行拔管发生率及并发症发生率均低于口含管胶带固定组的22．73％（5／22）、13．64％（3／22）（P〈0．05）．结论气管插管固定器能降低气管插管的移位，减少并发症的发生。

报道一例成人型Still氏病并发ARDS

目的探讨成人型Still氏病并发肺部病变的早期诊断。 方法对 1例成人型Still氏病并发ARDS病例进行总结分析。 结果患者在确诊成人型Still氏病数月后出现肺部症状 ,血常规异常 ,胸片示双下肺片状阴影 ,予强的松龙和抗感染 ,后又出现低氧血症 ,胸片示肺部有弥漫性渗出性病变 ,确诊为成人型Still氏病并发ARDS ,终因低氧血症 ,呼吸衰竭未能纠正而死亡。 结论对风湿病患者应重视早期的肺间质病变 ,以利于正确诊断与治疗。

规范血酮监测以减少糖尿病酮症酸中毒误诊误治——《中国糖尿病血酮监测专家共识》解读

糖尿病已成为我国目前最常见的慢性疾病,糖尿病酮症酸中毒(diabetic ketoacidosis,DKA)是内分泌代谢专科最常见的急性并发症,临床存在不同程度的误诊、误治。酮体监测为DKA诊疗的重要环节,中华医学会内分泌学分会组织专家共同制定了《中国糖尿病血酮监测专家共识》,本文从酮体的代谢、血酮监测的临床意义、适应证、DKA诊断与鉴别诊断及治疗过程血酮监测方法等方面进行详细解读。

促甲状腺激素受体的裂解和脱落

促甲状腺激素受体(TSHR)是一种重要的自身抗原,TSHR的裂解和脱落可诱发自身免疫。裂解的TSHR是甲状腺主要的功能性受体,α亚单位的脱落对于刺激型TSHR抗体(TSAb)的形成及TSAb和阻断型TSHR抗体(TBAb)之间的平衡有重要意义,对于TSHR胞外域裂解和脱落的相关研究不仅有助于深入理解TSHR的结构和功能,而且有助于阐明自身免疫性甲状腺疾病的发病机制及探寻新的治疗方法。该文就TSHR概况、受体裂解和脱落的机制及其意义作一综述。

主动脉夹层误诊为肾绞痛1例分析

病例：患者，男，54岁、因阵发双侧腰背部疼痛1h来我院泌尿外科就诊，考虑其为“肾绞痛”可能,予解痉等治疗。30min后，患者疼痛无缓懈,并出现大汗、头晕、胸闷等症状,转急诊抢救室。再次询问病史，发现此前患者曾有胸背部疼痛,疼痛向腰背部发展。

海洛因白质脑病一例报道

吸毒、滥用海洛因可导致急性或慢性中毒而损害神经系统.国内外对海洛因中毒引起的脑白质病变报道不多,现就我院收治的Ⅰ例报道如下.

从缺血性肾病的治疗困惑展望间充质干细胞治疗愿景

慢性肾动脉狭窄引起的缺血性肾脏疾病可能导致肾功能不可逆转的丧失,因其发病率和病死率呈上升趋势,有关临床和基础研究日益受到重视。慢性缺血性肾病的病理生理学是多方面的,涉及复杂的激素免疫和细胞的相互作用,并导致肾脏多种细胞类型损害,而且往往抵抗常规疗法。近年来多中心临床研究证明血管内支架治疗动脉粥样硬化引起的慢性肾动脉狭窄对血压控制,肾功能和预后均无显著益处。因此,有必要寻找新颖的方法来修复肾实质和保护肾脏功能。间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)通过旁分泌或内分泌作用赋予肾脏保护,并在一定程度上可直接转化为肾脏细胞,其抗炎和免疫调节性能作用于缺血性肾脏病致病机理的多个环节。本文就利用MSC预防治疗缺血性肾损伤的最新进展作一述评。

高糖对人腹膜间皮细胞氧化应激的影响

目的研究不同浓度葡萄糖对人腹膜间皮细胞(HPMC)氧化应激的影响。方法HPMC体外培养并行免疫组化鉴定,取第2代细胞用于实验。将不同浓度葡萄糖干预HPMC一定时间后,MTT比色法检测细胞活力;采用活性氧捕获剂双氢-乙酰乙酸二氯荧光黄(DCFH-DA)孵育细胞,通过流式细胞仪检测细胞内的荧光强度而测得细胞内活性氧(ROS)水平。分析不同浓度葡萄糖及不同作用时间对HPMC细胞活力及ROS水平的影响。结果高糖明显抑制HPMC细胞活力(P<0.05),随着葡萄糖浓度增加及作用时间的延长,抑制率呈上升趋势。高糖干预HPMC后,细胞内的平均荧光强度明显升高。结论高糖导致细胞发生氧化应激,其对细胞的损伤作用可能与氧自由基生成过多及ROS蓄积有关。

糖化终末产物受体在大鼠胰腺星形细胞中的表达

目的研究胰腺星形细胞(PSCs)是否表达糖化终末产物受体(RAGE),并探讨糖化终末产物(AGEs)对RAGE表达的调节作用。方法分离培养SD大鼠PSCs,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫细胞化学检测静息和活化的PSCs RAGE在mRNA和蛋白水平的表达,同时用RT-PCR检测AGEs刺激后RAGE表达的变化。结果静息和活化的PSCs均表达RAGE,且活化后表达水平提高;AGEs能上调RAGE的表达。结论静息和活化的PSCs均表达RAGE,活化的PSCs RAGE表达上调,提示PSCs是AGEs作用的靶细胞。

内毒素脂多糖对胰岛细胞株INS-1细胞活力及胰岛素分泌的影响

目的观察Toll样受体4(TLR4)在胰岛细胞株(INS-1)中的表达情况,探讨内毒素脂多糖(LPS)对INS-1细胞活力、胰岛素分泌功能以及TLR4表达的影响。方法采用RT-PCR技术和Western blotting方法检测INS-1细胞和经1 mg/L LPS刺激的INS-1细胞中TLR4 mRNA和蛋白的表达变化;分别用不同质量浓度的LPS(0.01、0.1、1、5、10 mg/L)刺激INS-1细胞,CCK8法检测细胞活力,GSIS法测定胰岛素分泌功能。结果 RT-PCR和Western blotting检测结果显示:LPS刺激使INS-1细胞TLR4mRNA和蛋白的表达显著增加(P<0.05)。当LPS在0.1～10 mg/L时,INS-1细胞活力受到抑制,且呈剂量时间依赖性(P<0.05);1 mg/L LPS刺激可使高糖环境下的INS-1细胞的胰岛素分泌量显著减少(P<0.05)。结论一定浓度范围内的LPS刺激可抑制INS-1细胞活力,并减少高糖培养条件下细胞胰岛素的分泌量。LPS刺激能上调INS-1细胞TLR4 mRNA和蛋白的表达。内毒素可能通过直接作用损伤胰岛β细胞。

人甲状腺刺激激素受体cDNA的克隆及真核表达载体的构建

目的克隆人甲状腺刺激激素受体(hTSHR)基因cDNA并构建其真核表达载体。方法以人甲状腺组织cDNA为模板,聚合酶链反应(PCR)扩增hTSHR基因编码区的全部序列,克隆入pGEM-T载体中,经限制性内切酶、DNA序列分析鉴定目的基因后,定向亚克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1中,并进行双酶切鉴定。结果PCR扩增的特异性片段长度为2 337 bp,以此构建的pGEM-T-hTSHR克隆载体,经限制性内切酶酶切及DNA序列分析证实载体中带有hTSHR基因编码区的目的片段,重组质粒pcDNA3.1-hTSHR经KpnⅠ和XbaⅠ双酶切后显示5 1000 bp和2 300 bp左右的2个条带,DNA序列分析显示与GenBank中的hTSHR基因cDNA序列一致,证明hTSHR基因已成功克隆入真核细胞表达载体pcDNA3.1中。结论成功构建了野生型pcDNA3.1-hTSHR重组真核表达载体。

急诊ICU机械通气患者下呼吸道真菌感染临床分析

目的分析急诊重症加强治疗病房(EICU)机械通气患者下呼吸道真菌感染的临床特点、菌株分布和治疗转归。方法回顾性分析124例在EICU机械通气中发生下呼吸道真菌感染患者的临床资料。结果124例机械通气患者中80例(64.5%)出现下呼吸道感染,其中伴有真菌感染21例(26.2%),皆为假丝酵母菌(白假丝酵母菌11例、热带假丝酵母菌5例、光滑假丝酵母菌3例、近平滑假丝酵母菌2例)。真菌感染(n=21)与非真菌感染患者(n=59)比较,ApacheⅡ评分较高,机械通气和住EICU时间较长,差异均有统计学意义(P<0.05)。11例白假丝酵母菌感染者无一例死亡,非白假丝酵母菌感染者死亡7例。结论EICU机械通气患者下呼吸道真菌感染发生率较高,主要是假丝酵母菌感染,以白假丝酵母菌为主。非白假丝酵母菌感染病死率高,对氟康唑耐药,提示应早期采取有效的干预措施。

α-硫辛酸对脂多糖诱导的大鼠胰岛细胞氧化应激和凋亡的影响

目的观察脂多糖(LPS)刺激大鼠胰岛细胞的氧化应激和凋亡情况,探讨α-硫辛酸(α-LA)对LPS诱导大鼠胰岛B细胞氧化应激和凋亡的作用。方法对照组予磷酸盐缓冲液(PBS),LPS不同质量浓度处理组(LPS 0.01组、LPS 0.1组、LPS 1组、LPS 5组、LPS 10组)分别予LPS 0.01、0.1、1、5、10μg/mL,α-LA+LPS组予α-LA 4μg/mL预处理1h后加入LPS 10μg/mL,分别刺激刚分离的大鼠胰岛。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测胰岛B细胞活力,以2’,7’-二氢二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)为荧光探针检测胰岛氧化应激的状态,应用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果不同质量浓度的LPS处理大鼠胰岛24h后,仅LPS10组的光密度值显著低于对照组(P<0.05);不同LPS质量浓度处理组大鼠胰岛B细胞产生的活性氧自由(ROS)呈剂量依赖性增多(r=0.95,P<0.01),胰岛B细胞凋亡率亦呈剂量依赖性升高(r=0.87,P<0.01)。LPS 1组、LPS 5组、LPS 10组的平均荧光强度(MFI),以及LPS 5组、LPS 10组的胰岛B细胞凋亡率均显著高于对照组(P值均<0.01);而α-LA+LPS组的MFI、胰岛B细胞凋亡率均显著低于LPS 10组(P值分别<0.05、0.01)。结论一定质量浓度范围内的LPS刺激抑制胰岛B细胞活力,可诱导大鼠胰岛发生氧化应激和细胞凋亡,α-LA可以降低LPS诱导的ROS产生并抑制胰岛B细胞的凋亡。

PBL结合情景模拟教学在急诊整合式课程中的应用

目的:探讨"以症状和临床问题为导向"的多学科整合式课程改革对医学生急诊医学学习效果、教学质量及学生评教的影响。方法:以上海交通大学医学院附属新华临床医学院2014年度选修急诊整合式课程的51名2009级五年制医学生为研究对象,2012年度选修急诊选修课的63名2007级五年制医学生为对照组。课程改革以"意识障碍"PBL授课为线索,结合情景模拟案例教学,整合相关多学科理论教学。比较课程改革前后课堂教学质量及学生对课程的满意度。结果:研究组课堂教学质量10项评教指标总分优于对照组,P=0.017,差异有统计学意义;82.4%的学生对该整合式课程形式非常满意。结论:实践验证了该模式的先进性,它是以提升学生综合能力为核心,提高学生自主学习和实践能力的医学教育创新模式,受到医学生的一致好评。