性别决定及SRY基因在胚胎发生中的表达

性别决定包括初级性别决定和次级性别决定。前者是由染色体决定性腺的发育方向，后者通常是指由性腺分泌的激素决定性腺以外的身体表型，即第２性征。新的研究发现，哺乳动物的雄性是由Ｙ染色体短臂上的一个被称为ＳＲＹ的基因所决定的。

哺乳动物的性别控制

较系统地阐述了哺乳动物性别控制在畜牧业生产及相关学科中的意义，全面客观地介绍了Ｘ、Ｙ性别精子的分离方法和胚胎性别鉴定方法等内容的研究现状和存在的问题。

核基质附着区(MAR)调控的人胰岛素样生长因子(hIGF-1)转基因兔的制备

用ＥｃｏＲＩ＋ＨｉｎｄⅢ双酶解含鸡α－珠蛋白基因５′端核基质附着区（ＭＡＲ）、小鼠金属硫蛋白基因启动子（ＭＴ－１）和人胰岛素样生长因子－１（ｈＩＧＦ－１）基因的ｐＭＴＳＭＣＡＧ质粒，０．６％琼脂糖凝胶电泳，玻璃乳回收纯化ＭＡＲ／ＭＴ／ｈＩＧＦ－１片段（３．９ｋｂ），用该片段制备转基因兔。利用水平显微注射系统注射１－细胞兔胚胎４６８枚，移植到３６只受体兔，有８只妊娠，共产下１９只活仔兔。采仔兔耳样提取基因组ＤＮＡ，应用ＰＣＲ技术分析其外源基因整合情况，获得８只阳性兔（显示出约６００ｂｐ外源ＤＮＡ条带）。再对８只阳性兔的ＰＣＲ产物进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交，得到５只整合有ＭＡＲ／ＭＴ／ｈＩＧＦ－１外源基因的转基因兔，转基因整合率为２６．３％（５／１９）。用１只阳性转基因公兔（５０２号）繁殖了６窝，共获得４２只仔兔。采仔兔耳样提取基因组ＤＮＡ后，如上用ＰＣＲ分析和做Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交，Ｆ１代中有５只整合有ＭＡＲ／ＭＴ／ｈＩＧＦ－１融合基因。

绵羊SRY基因的分子克隆及序列分析

本研究利用常规方法提取绵羊基因组ＤＮＡ，根据人的ＳＲＹ基因核心序列设计合成了一对引物Ｐ１、Ｐ２。用ＰＣＲ技术对公、母绵羊基因组ＤＮＡ进行体外扩增，将所扩增出的公绵羊特异性ＳＲＹ基因片段重组到质粒ＤＮＡｐＵＣ１９的ＳｍａＩ部位并转化到Ｅ．ｃｏｌｉＤＨ１０Ｂ中。挑选阳性克隆进行微溶分析，并用限制性内切酶ＥｃｏＲＩ、ＨｉｎｄⅢ酶解。鉴定结果表明，插入片段长度与ＰＣＲ扩增带相符，约２０３ｂｐ。用Ｓａｎｇｅｒ的双脱氧末端终止法测定绵羊ＳＲＹ基因核心序列的部分序列，结果表明，用ＰＣＲ分离并重组到质粒载体中的绵羊ＳＲＹ基因核心序列部分序列长度为２０３ｂｐ，这与设计完全相符。其中该序列的１５５个ｂｐ与人的ＳＲＹ基因相应序列的同源性为８２．５８％（１２８／１５５）。可见哺乳动物ＳＲＹ基因的核心序列具有高度保守性，种间差异很小。

牛雄性特异性DNA片段的分子克隆

根据小牛胸腺ＤＮＡ复性动力学原理，采用改进的“删除富集法”，对Ｙ特异性ＤＮＡ片段进行富集。以ｐＵＣ１８为宿主菌，构建成富集有Ｙ特异性的部分Ｙ染色体文库。分别以牛雄性和雌性基因组ＤＮＡ为探针，对克隆子进行“差异筛选”，筛选到若干个雄性特异性信号。对其中１个克隆子进行分析鉴定，测得其插入片段大小约为１．４ｋｂ。将其标记成探针。命名为Ｐ－ｄ。分别与２０个公牛基因组ＤＮＡ样品和８个母牛基因组ＤＮＡ样品杂交，阳性信号符合率为８５％，阴性信号符合率为８７．５％。初步证明Ｐ－ｄ具有雄性特异性。研究表明，用本实验方法所克隆到的雄性特异性ＤＮＡ探针鉴别牛胚胎的性别是可能的。

AI后移植IVF胚诱发黄牛－胎双犊的研究

在黄牛自然发情人工授精后的第７ｄ，再移植１枚体外受精胚胎，使受体牛同时怀有自身胎儿和与自身无血缘关系的胎儿，从而诱发一胎双犊。共对７头受精牛进行了人工诱发一胎双犊的处理，结果有３头受体牛妊娠分娩，妊娠率为３／７，产犊４头，双犊率为１／３。

遗传标记及其在动物遗传育种中的应用

遗传标记及其在动物遗传育种中的应用李善如１葛宝生２陈永福３张忠诚４引言利用标记来选择和培育动物具有悠久的历史。在早期，是以外形外貌为标记来促进品种外貌达到一致性。通过外貌标记选择优良种畜曾得到一定效果，如我国古代用“相马经”指导选马。但仅通过外表对动...

高效整合转基因兔研究

用含有核基质附着区（ＭａｔｒｉｘＡｔｔａｃｈｍｅｎｔＲｅｇｉｏｎｓ，ＭＡＲ）的鸡珠蛋白基因与含有鼠金属硫蛋白（ＭＴ）基因启动子的人－类胰岛素促生长因子１（ｈ－ＩＧＦ－１）基因构建表达了载体。研究了ＭＡＲ对转基因兔整合率的影响。结果表明，带有ＭＡＲ的表达载体转基因兔整合率达到２６．３％，为一般不含ＭＡＲ构件转基因克整合率的两倍，对提高转基因动物生产效率，将起到重要作用。

新时期公安边防警官犯罪原因分析及其预防

公安边防警官犯罪虽然在整个公安边防部队犯罪案件所占比例不大，但近年来呈现出不断上升的趋势，应引起高度重视。本文针对新时期公安边防队伍中警官犯罪这一问题，对警官犯罪的新情况。新趋势和复杂性，从其发生的主要原因，共有原因以及边防警官犯罪的特有原因和个体原因等几个方面做了比较全面细致地剖析。同时，对导致公安边防警官犯罪的边防口岸复杂环境、警官的。心理、观念和政治素质等主观因素，以及领导的表率作用，部队管理监督制度等客观因素做了阐述。并结合新时期公安边防工作的实际，提出了预防措施。

观音山车站弱场改造的转发器方案

宝成线北段扩能改造后观音山站上下行出现车机联控不畅的问题，本文提出了利用转发器方案履行感应弱场区的整改措施。

TGZ—400型车站感应电台控制电路的改造

本文对ＴＧＺ－４００型车站感应电台控制电路存在的问题进行了分析，提出了相应的解决方法，提高了该电台控制电路的可靠性。

利用IVM/IVF技术生产试管犊牛的研究

本研究利用卵母细胞体外成熟(IVM)、体外受精(IVF)技术,体外生产牛胚胎,以获得试管牛。结果表明:卵母细胞体外培养22～24h后,其成熟率为85％;体外受精率为83％。体外受精卵分别在颗粒细胞单层(CCM)和输卵管细胞单层(OCM)上培养,其胚胎最后产量(以授精时卵母细胞的数目为基数)分别为19％和29％,差异极显著(P<0.01)。若体外受精卵先在CCM中培养72h后,再将已发生卵裂的(>4细胞)胚胎移到OCM中培养,其胚胎最后产量为35％。这表明:早期胚胎在其发育过程中至少存在着三个发育时期,即1—8细胞、8—16细胞和8细胞—囊胚三个阶段,各阶段需要不同的培养环境。IVM/IVF胚胎移植到受体黄牛体内后,其足月时的妊娠率为15％。

生脉饮塑料包装工艺与稳定性研究

目的改进生脉饮(党参方)塑料包装的灌装(灭菌)工艺,使生产操作简单可控,质量指标符合内控标准,并保持稳定。方法采用正交实验法对煮沸灭菌及保温灌装工艺进行优选,确定最佳工艺后连续生产3批进行工艺验证、稳定性实验,重点考察pH、密度、含量等指标。结果工艺条件确定为:保温温度控制为60℃,药液pH控制在4.0,保温灌装时限控制在8 h内,检测结果符合内控标准,并且质量稳定。结论实验结果为确定正式的生产工艺提供了实验依据。