细胞焦亡在糖尿病创面愈合中的研究进展

糖尿病创面是糖尿病的常见并发症之一,具有迁延难愈的特点,严重者将使患者面临截肢的风险,如何有效地管理和治疗糖尿病慢性难愈合创面已成为亟需解决的难题。焦亡是一种炎症类型的程序性细胞死亡,通常由炎症小体引发,焦亡驱动的细胞死亡过程主要由半胱天冬酶-1引起的传统信号通路和半胱天冬酶-4/5/11诱导的非经典信号通路介导。许多证据表明,细胞焦亡在糖尿病创面愈合过程中扮演着极其重要的作用,本文综述了近年来细胞焦亡相关信号通路的机制及其对糖尿病创面的影响,以期指导糖尿病难愈合创面的临床治疗和机制研究。

基于CT影像组学结合机器学习预测复杂性与非复杂性急性阑尾炎

目的探讨和验证不同影像组学模型在复杂性与非复杂性急性阑尾炎的术前鉴别诊断中的价值。方法回顾性分析212例经手术病理证实为急性阑尾炎患者的临床资料及CT平扫图像,从CT图像中提取影像组学特征,经过特征的降维和筛选,分别采用Logistic回归、支持向量机(SVM)和随机森林等算法构建影像组学模型,通过比较受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)、准确度、95%置信区间(95%CI)等指标获得最佳的影像组学模型。此外,应用单因素和多因素Logistic回归分析来筛选临床特征并建立临床模型。通过多变量逻辑回归将影像组学标签与临床标签相结合,构建一个组合模型。最后,采用ROC曲线分析来评估模型的性能,并利用决策曲线分析(DCA)来评估模型的临床价值。结果最终筛选出年龄和C反应蛋白2个临床特征。从每个患者CT图像共提取出1834个影像组学特征,并确定了16个最有价值的影像组学特征。在影像组学模型中,SVM表现出最佳的预测效率和稳定性,训练集和测试集的AUC分别为0.916(95%CI为0.862~0.970)和0.842(95%CI为0.739~0.945)。在所有模型中,组合模型的诊断效能最佳,训练集和测试集的AUC分别为0.943(95%CI为0.896~0.990)和0.855(95%CI为0.759~0.951)。DCA提示组合模型具有更好的预测性能和临床价值。结论结合影像组学特征与临床特征的组合模型对复杂性与非复杂性急性阑尾炎具有良好的预测能力,可以为临床决策提供了一种无创、有效的方法,避免不必要的手术切除。

基于网络药理学及分子对接探讨湿润烧伤膏促进糖尿病溃疡愈合的作用机制

目的:利用网络药理学和分子对接技术对湿润烧伤膏治疗糖尿病溃疡的主要活性成分和潜在作用机制进行探讨。方法:基于TCMSP数据库筛选湿润烧伤膏主要活性成分和作用靶点,从GeneCards、OMIM、PharmGkb、TTD、DrugBank数据库中查找糖尿病溃疡相关靶点,使用STRING 11.5数据库构建蛋白互作(PPI)网络筛选核心靶点,在Cytoscape 3.8.2软件中制作“药物-靶点-疾病”网络图筛选核心活性成分,使用R语言软件进行基因GO功能和KEGG通路富集分析,最后应用分子对接对筛选结果进行初步验证。结果:筛选出湿润烧伤膏37个活性成分映射100个作用靶点,糖尿病溃疡疾病靶点5527个,交集靶点77个,PPI网络拓扑分析提示TP53、TNF、HSP90AA1等为关键靶点;“药物-靶点-疾病”网络图显示刺槐素、汉黄芩素、槲皮素、吴茱萸次碱等为核心活性成分;GO功能分析主要涉及血管生成、离子转运、管径调节、细胞因子受体结合等过程,KEGG富集分析主要包括PI3K-Akt、AGE-RAGE等信号通路;分子对接显示核心活性成分和关键靶点均具有较好的对接活性。结论:湿润烧伤膏治疗糖尿病溃疡是多成分、多靶点、协同调节的结果,为湿润烧伤膏的临床应用和糖尿病溃疡治疗的研究提供一定的理论依据。

MEBT/MEBO对慢性难愈合创面组织内Nrf2/HO-1/NQO1信号通路的影响

目的探讨皮肤再生医疗技术(MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合创面组织内核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶1(HO⁃1)/醌氧化还原酶1(NQO1)信号通路的影响。方法选取90只SPF级Wistar雄性大鼠适应性饲养1周后,采用随机数表法将其随机分为空白组、对照组、模型组、MEBO组和贝复新组,每组18只。其中空白组大鼠只做备皮处理,对照组大鼠建立急性创面模型,模型组、MEBO组和贝复新组大鼠建立慢性难愈合创面模型。模型建立后,空白组大鼠备皮处皮肤及对照组、模型组大鼠创面予以生理盐水纱布换药处理,MEBO组大鼠创面予以湿润烧伤膏(MEBO)药纱换药处理,贝复新组大鼠创面予以重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶药纱换药处理,对比观察各组大鼠创面愈合率、组织病理学变化情况以及皮肤/创面组织内丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及Nrf2、HO⁃1、NQO1蛋白与HO⁃1、NQO1 mRNA表达水平。结果干预第3天,各组大鼠创面愈合率尤以对照组最高、贝复新组次之(P均<0.05);干预第7、14天,各组大鼠创面愈合率尤以MEBO组最高、贝复新组次之(P均<0.05)。HE染色结果显示,干预第3、7、14天,对照组、MEBO组和贝复新组大鼠创面组织内坏死细胞及炎性细胞逐渐减少,成纤维细胞与毛细血管逐渐增多,而模型组大鼠创面组织内坏死细胞和炎性细胞减少不明显;Masson染色结果显示,干预第3、7、14天,对照组、MEBO组和贝复新组大鼠创面组织内胶原纤维由细少且紊乱逐渐趋于粗大且平整,而模型组大鼠创面组织内胶原纤维虽逐渐增粗、增多,但排列仍较紊乱。干预第7天,对照组、MEBO组和贝复新组大鼠创面组织内MDA表达水平均明显低于模型组(P均<0.05);干预第3、7天,对照组、MEBO组和贝复新组大鼠创面组织内SOD表达水平均明显高于模型组(P均<0.05)。干预第3、7天,MEBO组和贝复新组大鼠创面组织内Nrf2、HO⁃1、NQO1蛋白以及HO⁃1、NQO1 mRNA表达水平均明显高于空白组、对照组和模型组(P均<0.05),且干预第7天,MEBO组大鼠创面组织内Nrf2、HO⁃1蛋白以及HO⁃1 mRNA表达水平均明显低于贝复新组(P均<0.05)。结论MEBT/MEBO可能能够通过激活Nrf2/HO⁃1/NQO1信号通路减轻大鼠慢性难愈合创面氧化应激损伤,促进创面再生修复。

MEBT/MEBO调控肌成纤维细胞促进糖尿病难愈合创面修复的机制研究

目的探讨湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)是否通过调控糖尿病难愈合创面肌成纤维细胞,影响α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ,COL-1)的表达水平,从而促进创面愈合。方法90只SPF级成年雄性Wistar大鼠以随机数表法分为5组,空白组、对照组、模型组、MEBO组、贝复新组,每组18只,适应性喂养7 d后构建糖尿病模型,成模后统一制备创面。创面形成后第0天、第3天、第7天、第14天拍照记录创面愈合情况,每组随机取6只大鼠创面组织,进行HE、Masson染色以观察各组创面组织病理形态变化,免疫荧光观察创面组织α-SMA、COL-1的分布及表达情况,Western Blot检测创面组织α-SMA、COL-1的蛋白表达水平。结果①同一时间点组织学观察各组病理形态改善均优于模型组,治疗后期创面愈合率MEBO组、贝复新组优于模型组。②WB:与对照组比较,创面发生第3天、第7天、第14天过程中,模型组创面组织α-SMA、COL-1蛋白表达均明显下降(P<0.05);与模型组比较,创面第7天、第14天,MEBO组、贝复新组创面组织α-SMA、COL-1表达显著升高(P<0.05)。③免疫荧光:与对照组比较,第3天、第7天、第14天的模型组α-SMA蛋白表达均较低,其中第7天时具有显著性差异(P<0.05);模型组COL-1蛋白表达均显著偏低(P<0.05)。与模型组比较,第7天、第14天MEBO组、贝复新组α-SMA表达均较高(P<0.05),两用药组COL-1表达也较高,而贝复新组与模型组的比较差异有统计学意义(P<0.05),MEBO组COL-1表达介于模型组与对照组之间,但与模型组的比较差异不明显(P>0.05)。结论MEBT/MEBO可能通过提高α-SMA和COL-1的蛋白表达水平,促进肌成纤维细胞转化及细胞外基质的沉积,从而加速糖尿病难愈合创面修复。

巨噬细胞极化调控机制及在创面愈合中的作用和作用机制研究进展

巨噬细胞是具有高度可塑性的多功能免疫细胞,在不同因素诱导下可极化为功能不同的促炎型(M1型)和抗炎型(M2型)。巨噬细胞的极化受微小RNA、长链非编码RNA及丝裂原活化蛋白激酶等信号通路调控。在创面愈合早期炎症阶段,M1型巨噬细胞释放抗菌介质、分泌炎症因子,介导创面炎症反应;在创面愈合增殖阶段,M1型巨噬细胞逐渐极化为M2型巨噬细胞,分泌白细胞介素10、精氨酸酶-1、血小板生长因子等抗炎细胞因子,抑制炎症反应、促进血管生成;在创面重塑和组织再生阶段,巨噬细胞通过调控基质金属蛋白酶的表达,减少组织纤维化及促进皮肤毛囊再生,加速创面愈合。

MEBT/MEBO对慢性难愈合创面NF-κB p65、IκBα、IKK及其磷酸化蛋白表达水平的影响

目的探讨创疡再生医疗技术(MEBT/MEBO)对慢性难愈合创面组织中核因子κB(NF-κB)p65、NF-κB抑制蛋白(IκB)、IκB激酶(IKK)及其磷酸化蛋白表达水平的影响。方法选取SPF级雄性Wistar大鼠90只适应性饲养1周后,按照随机数表法将其随机分为空白组、对照组、模型组、MEBO组和贝复新组,每组18只。空白组大鼠仅做备皮处理,对照组大鼠建立急性创面模型,模型组、MEBO组、贝复新组大鼠建立慢性难愈合创面模型。空白组大鼠备皮处皮肤及对照组、模型组大鼠创面采用生理盐水纱布换药处理,MEBO组大鼠创面采用湿润烧伤膏(MEBO)药纱换药处理,贝复新组大鼠创面采用重组牛碱性成纤维细胞生长因子换药处理,对比各组大鼠干预第3、7、14天创面愈合率、组织病理学变化,以及皮肤/创面组织中NF-κB p65、IκBα、IKK及p-NF-κB p65、p-IκBα、p-IKK蛋白表达水平。结果(1)干预第3、7天,各组大鼠创面愈合率均无明显差异(P均>0.05);干预第14天,模型组大鼠创面愈合率明显低于对照组、MEBO组(P均<0.05),其余各组间创面愈合率均无明显差异(P均>0.05)。(2)干预第7天,MEBO组、贝复新组大鼠创面组织中胶原纤维量均明显增加,可见大量成纤维细胞和新生毛细血管及少量毛囊结构生成;干预第14天,MEBO组、贝复新组大鼠创面组织中胶原纤维量明显多于模型组,可见整齐排列的毛细血管及成熟的毛囊、皮脂腺等组织,而模型组大鼠创面组织中仍可见少量炎症细胞浸润,但已有大量成纤维细胞生成。(3)干预第7、14天,空白组、对照组、MEBO组大鼠创面组织中NF-κB p65、IKK、p-NF-κB p65、p-IKK、p-IκBα蛋白表达水平均明显低于模型组(P均<0.05);干预第7天,MEBO组大鼠创面组织中NF-κB p65、IκBα蛋白表达水平均明显高于贝复新组(P均<0.05),IKK、p-NF-κB p65、p-IKK、p-IκBα蛋白表达水平均明显低于贝复新组(P均<0.05);干预第14天,MEBO组大鼠创面组织中IKK、IκBα蛋白表达水平均明显低于贝复新组(P均<0.05)。结论MEBT/MEBO促进慢性难愈合创面愈合的机制可能与创面组织中NF-κB p65、IκBα、IKK及其磷酸化蛋白的表达水平有关。

MEBT/MEBO通过mTORC信号通路对慢性难愈合创面MMP-3、MMP-8表达水平的影响

目的 探究皮肤再生医疗技术(MEBT/MEBO)通过哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物(mTORC)信号通路对慢性难愈合创面组织中基质金属蛋白酶-3 (MMP-3)、基质金属蛋白酶-8 (MMP-8)表达水平的影响:方法 选取SPF级雄性Wistar大鼠60只适应性饲养7 d后,按照随机数表法将其随机分为空白组、对照组、模型组、rb-bFGF组、MEBO组,每组12只,其中空白组大鼠只做备皮处理,对照组大鼠于脊柱两侧建立急性创面模型,模型组、rb-bF-GF组、MEBO组大鼠于脊柱两侧建立慢性难愈合创面模型。模型建立后,空白组大鼠备皮处皮肤及对照组、模型组大鼠创面予以生理盐水纱布换药处理,rb-bFGF组大鼠创面予以重组牛碱性成纤维细胞生长因子(rb-bFGF)换药处理,MEBO组大鼠创面予以湿润烧伤膏(MEBO)换药处理,对比观察各组大鼠干预第3、7、14天时创面愈合率以及皮肤/创面组织中MMP-3、MMP-8、p-mTORC蛋白及相应mRNA的表达水平。结果 干预第7、14天,对照组、rb-bFGF组、MEBO组大鼠创面愈合率均明显高于模型组(P均<0.05)。干预第3、7、14天,对照组、rb-bFGF组、MEBO组大鼠创面组织中MMP-3、MMP-8、p-mTORC蛋白及MMP-3、MMP-8 mRNA表达水平均呈先升高后降低的趋势,而模型组呈持续升高的趋势;干预第3、7天,rb-bFGF组和MEBO组大鼠创面组织中MMP-3、MMP-8、p-mTORC蛋白及MMP-3、MM P-8 mRNA表达水平均明显高于模型组(P均<0.05),而干预第14天,rb-bFGF组和MEBO组大鼠创面组织中MMP-3、MMP-8、p-mTORC蛋白及MMP-3、MMP-8mRNA表达水平均明显低于模型组(P均<0.05),且干预第3、7天rb-bFGF组大鼠创面组织中MMP-3、MMP-8蛋白表达水平均明显低于MEBO组(P均<0.05),而干预第3、7、14天两组大鼠创面组织中MMP-3、MMP-8 mRNA表达水平均无明显差异(P均>0.05);干预第3、7、14天,各组大鼠创面组织中mTORC mRNA表达水平均无明显变化(P均>0.05)。结论 MEBT/MEBO可通过调控mTORC信号通路中MMP-3和MMP-8的表达水平促进慢性难愈合创面愈合。

抖空竹在大班幼儿教学中的实践研究

非物质文化遗产是人类文明的宝藏。为了让幼儿多接触传统文化,教师可以结合非物质文化遗产展开教学,帮助幼儿在了解传统文化的同时锻炼身心和动手能力,促进幼儿综合素质提升。抖空竹就是集锻炼、游戏、德育为一体的良好体育活动。

MEBT/MEBO对糖尿病大鼠创面中CaN/NFAT信号通路表达的影响

目的探讨皮肤再生医疗技术(MEBT/MEBO)对糖尿病大鼠创面中钙调神经磷酸酶(CaN)/活化T细胞核因子(NFAT)信号通路表达的影响。方法分笼饲养无特定病原体(SPF)级Wistar雄性大鼠48只,根据随机数字表法分为对照组、模型组(糖尿病大鼠创面模型)、美宝组(糖尿病大鼠创面模型+MEBT/MEBO治疗)、贝复新组(糖尿病大鼠创面模型+贝复新治疗),其中,治疗组于模型制作成功后立即给药。于3、7、14 d时各组随机抽取4只大鼠取材,拍照记录其创面愈合情况,进行创面愈合率计算、苏木精-伊红(HE)染色、实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)、免疫荧光染色检测,采用单因素方差分析法、LSD检验法做统计学分析。结果3 d时,对照组和模型组创面愈合率有明显差异(P<0.05);7、14 d时,与模型组相比,对照组、美宝组和贝复新组创面愈合率更高(P<0.05)。3、7、14 d时,对照组、美宝组和贝复新组中NFAT、CaN表达水平明显高于模型组,对照组、美宝组中NFAT mRNA表达水平明显高于模型组(P<0.05);14 d时,对照组NFAT mRNA表达水平明显高于模型组(P<0.05)。3、7、14 d时,模型组IL-2表达水平较对照组、美宝组、贝复新组更高。结论MEBT/MEBO可能通过上调CaN/NFAT信号通路的表达促进糖尿病大鼠创面愈合。

皮肤再生医疗技术对糖尿病创面诱导型一氧化氮合酶和精氨酸酶1表达水平的影响

目的探讨皮肤再生医疗技术湿润暴露疗法(MEBT)/湿润烧伤膏(MEBO)对糖尿病创面诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶1(Arg1)表达水平的影响。方法选取48只Wistar雄性大鼠随机分为4组,空白组、MEBO组、贝复新组和对照组,每组各12只,其中空白组构建正常大鼠急性创面模型,MEBO组、贝复新组和对照组构建糖尿病大鼠创面模型。模型建立后,MEBO组和贝复新组分别给予创面外敷两层MEBO纱条和重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶(贝复新)纱布,对照组和空白组以两层生理盐水纱布覆盖。通过HE染色、免疫荧光法和qRT-PCR检测观察各组大鼠造模后第3、7、14天创面愈合情况、组织形态学变化,以及创面组织中M1/M2型巨噬细胞标志物iNOS、Arg1 mRNA表达变化。结果(1)造模后第7、14天,MEBO组、空白组、贝复新组愈合率均高于对照组(P<0.05);(2)造模第3天,MEBO组、对照组和贝复新组iNOS mRNA表达水平高于空白组,而Arg1 mRNA表达水平低于空白组;造模后第7、14天,与对照组相比,MEBO组、贝复新组Arg1 mRNA表达水平较高,iNOS mRNA表达水平较低(P<0.05)。结论MEBT/MEBO可加速糖尿病创面愈合,其作用机制可能与抑制iNOS、促进Arg1表达,参与调控巨噬细胞M1/M2极化有关。

MEBT/MEBO治疗慢性难愈合创面疗效和安全性的Meta分析

目的:评价皮肤再生医疗技术治疗慢性难愈合创面的疗效和安全性。方法:计算机检索中国生物医学文献数据库(CBM)、万方数据库(Wanfang database)、中国知网(CNKI)、Cochrane library、PubMed数据库中应用湿润暴露疗法(moist exposed burn therapy,MEBT)/湿润烧伤膏(moisture burn ointment,MEBO)治疗慢性难愈合创面的随机对照研究,检索时限为2012年至2022年,筛选文献、提取资料,使用Cochrane评分手册评价纳入文献的质量,并采用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果:共纳入14篇随机对照研究,包括1228例患者,试验组应用MEBT/MEBO加常规治疗,对照组进行常规治疗。Meta分析结果显示,试验组创面愈合率更高(RR=1.84,95%CI 1.50~2.26,P<0.001),试验组治疗有效率更高(RR=4.81,95%CI 3.18~7.27,P<0.001),试验组创面平均愈合时间更短(SMD=-1.39,95%CI-1.60~-1.17,P<0.001),试验组创面肉芽组织出现时间更早(SMD=-1.85,95%CI-2.15~-1.55,P<0.001),所有纳入研究均无不良反应及并发症病例报道。结论:MEBT/MEBO治疗慢性难愈合创面有良好疗效,且安全性高,但受纳入文献质量和数量的限制,结论仍需更多高质量随机对照研究进一步验证。