稳定表达CRFR1的HEK293细胞株建立与功能鉴定

目的建立稳定表达CRFR1的HEK293细胞株,并鉴定cAMP评价体系构建是否成功。方法采用Lipofectamine2000将CRFR1质粒转染至HEK293细胞中,经G418筛选单克隆阳性细胞,采用Western blot技术、RT-PCR法、免疫荧光法证实稳定表达CRFR1细胞株构建成功。并用CRF刺激稳定表达CRFR1的HEK293细胞株,绘制CRF刺激HEK293-CRFR1细胞释放cAMP的量效曲线。结果 Western blot、RT-PCR、免疫荧光结果表明,CRFR1受体在HEK293细胞系中成功表达。cAMP释放量效实验显示,CRF刺激HEK293-CRFR1细胞释放cAMP的EC50为(5.64±0.05)×10-10mol·L-1。结论成功建立了稳定表达CRFR1的HEK293细胞株,并且cAMP含量评价体系构建成功,为研究CRFR1的生物学功能及筛选CRFR1受体靶向药物奠定了基础。

促肾上腺皮质激素释放因子对海马神经元树突生长发育的影响

应激对于认知和情感有重要影响,促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)作为应激反应的主要调节器,通过调控下丘脑-垂体-肾上腺轴的功能,协调机体对应激的反应。近年研究表明,应激可导致小鼠海马神经元树突分支异常,树突棘缺失,而促肾上腺皮质激素释放因子受体-1(CRFR1)缺失小鼠或在CRFR1拮抗剂存在下则表现出正常的树突分支。另外,CRFR1作为G蛋白偶联受体(GPCR),可通过不同的信号通路影响海马神经元结构及相关因子的表达。目前,CRF对海马神经元损伤的分子机制仍不明确,本文就应激下CRF及其受体信号通路对海马神经元生长发育影响的研究进展做一综述。

蛋白信号分子在神经母细胞瘤发生发展中的作用及机制

神经母细胞瘤(NB)是儿童期常见的源于交感神经系统的颅外实体肿瘤。NB发病部位多变,发病机制复杂,临床表现差异大,低危或中危NB患者预后良好,高危临床表型的NB患者预后差。近年研究表明,NB中转录调节因子、激酶、受体等各种信号蛋白的异常表达与NB的发生、生长、迁移和侵袭,以及NB患者的预后相关。本文就不同信号蛋白在神经母细胞瘤发生发展中的作用及机制进行综述。