嵌套引物P1/P7-U3/U5检测葡萄黄化(stolbur)植原体时扩增出的额外片段分析

当采用嵌套引物P1 /P7(U5 /P7) U3 /U5的巢式PCR检测植原体时,伴随着正常的0. 85kb片段还经常扩增出一条额外片段。与其它常见的非特异性片段不同,该额外片段十分稳定,与正常片段总是同步出现,二者的强度呈正比。经测定,额外片段的大小为0. 36kb。迄今,这一现象仅在采用P1 /P7(U5 /P7)- U3 /U5引物的巢式PCR中出现。在采用P1 /P7、U5 /P7或-U3 /U5引物的常规PCR中从未出现过。另外,已知这一现象至少在葡萄黄化stolbur和榆黄化植原体的检测过程中出现。对该现象产生的原因进行了深入研究,方法是将额外片段从凝胶中分离出来,用不同的引物在不同的条件下进行重新扩增,同时结合已知的植原体16SrRNA基因序列进行综合分析判断。结果表明,该额外片段源于植原体16SrRNA基因上存在的一个与U5引物部分互补的位点。对额外片段的测序结果进一步证实了分析的正确性。据此,指出了该额外片段在植原体检测中的可能用途。

东北春麦区小麦白粉菌的侵染循环

小麦白粉菌(Blumeria graminis DC.Speer)可以在我国东北的南部冬麦区以菌丝垫形态潜伏在小麦苗基部叶片和叶鞘上越冬,以混在干燥保存的小麦种子中的闭囊壳越夏。自生麦苗和白粉病的野生寄主在侵染循环中不起作用。小麦白粉菌的毒力频率(Vf)分析表明,公主岭、沈阳、海城、大连和烟台的小麦白粉菌同属于一个群体。东北春麦区小麦白粉病初发日期和高空天气图分析表明,东北春麦区小麦白粉病的初侵染菌源来自胶东半岛冬麦区。在一定的天气系统控制下,小麦白粉菌的分生孢子随夏初的偏南气流,在700毫巴高度层向北传播,进入东北春麦区。随降雨沉降,并侵染小麦植株。

进口美国大豆上发现大豆花叶病毒

大豆作为种子在我国是禁止进境的，但是每年仍有相当数量用作榨油的大豆经口岸入境。１９９７年１２月由烟台动植物检疫局送检的美国大豆，经隔离温室种植观察，发现了一株大豆花叶病毒，现报告如下。１材料与方法１．１应检样品来自美国路易斯安那州的大豆（ＵＳＡ．Ｎｏ...

紫外光诱导小麦白粉菌形成闭囊壳的初步研究

一般认为,小麦白粉菌闭囊壳的形成与小麦生育期、营养状况及环境条件有关。在小麦进入孕穗期以后,闭囊壳才能形成。温室中不能形成闭囊壳。作者用紫外光照射三叶期的小麦盆栽病苗,在温室内诱导其上的白粉菌形成了闭囊壳,现简报如下:

不同引物对植原体的检测灵敏度比较研究

用常规PCR和巢式PCR对目前常用的各种植原体引物 (fP1 /rP7、fU5/rP7、fU5/rU3、fAY/rEY和fFD9/rFD9)的检测灵敏度进行了比较研究。研究发现 ,它们的检测灵敏度并不相同。最灵敏的引物 (fAY/rEY)要比最不灵敏的引物 (fFD9/rFD9)的灵敏度至少高出数千倍。因此 ,按照不同的检测目的选择所用的检测引物是明智的 ,特别是当待测样品中的植原体浓度极低时 ,比如葡萄组织样品中植原体的检测。据此提出了用于不同检测目的时的最佳引物。

唐菖蒲病毒病

唐菖蒲 Gladiolus hybridus Hort 是鸢尾科唐菖蒲属的花卉植物。其花期长、花朵大、花色多而鲜艳,尤其适于做切花,因而具有很高的观赏价值。但由于唐菖蒲病毒病的发生,使唐菖蒲的产量和质量受到很大影响。在我国,近年来花卉事业蓬勃发展,与国外的花卉交流日益频繁,传入唐菖蒲病毒的机率亦随之增加。因此,对唐菖蒲病毒的检疫和防治应当予以重视。

病原微生物的生物大分子指纹图谱分类及分型鉴定技术

对当今流行的生物大分子指纹分类及分型鉴定技术进行了综合分析。探讨了这些技术的适用范围、稳定性、易用性和分析效率等。提出了适合于检验检疫的分类及分型鉴定技术及其在检验检疫中的应用价值。对进一步拓展PCR -RFLP和AFLP技术的适用范围进行了研究。结果表明 :PCR -RFLP技术可以不经过分离培养 ,直接应用于难以人工培养和分离提纯的病原微生物 ,如植原体的分类鉴定。经过恰当设计 ,AFLP技术也同样适用于对植原体的分类鉴定。

美国的梨火疫病

美国的梨火疫病烟台动植物检疫局葛泉卿梨火疫病可侵染包括苹果、梨和山楂在内的蔷薇科３７属１４０余种植物，造成严重损失。病害大流行时甚至可造成整个果园的毁灭。我国尚无此病。但如何防止梨火疫病传入我国已经成为一个十分严峻的问题。一、病害简史和发生现状自１７...

小麦矮腥黑穗病菌冬孢子的显微电泳初步研究

引言目前,各口岸所鉴定小麦矮腥病菌Tilletia controversa Kuhn(以下简称TCK)主要是测量其孢子大小、网目大小、网脊高及胶鞘厚度来加以判断,只有找到非常典型的矮腥孢子才能出证。事实上,在进口的小麦中常混有大量的禾本科杂草种子,其上的腥黑穗孢子与 TCK

植物检疫的抽样检验方法及其统计学原理浅析

在植检业务中,对小批量的货物,如小量的种子、苗木等,可以全部检验;对于大宗货物,如粮食、饲料等,则不可能全部检验。有时,即使是小批量的货物,由于一些检验操作,如病菌分离培养,对样品具有破坏性,因而也不可能全部检验。

菜豆晕疫病菌的分离与鉴定

菜豆晕疫病菌的分离与鉴定王淑秋葛泉卿（烟台动植物检疫局２６４０００）烟台市某公司从台湾引进一批四季豆种子，我局对种子进行了检疫。我们用离体叶片法〔１〕从该批种子中分离到一种病原细菌，经鉴定证明为菜豆晕疫病菌ＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｙｒｉｎｇａｅＰＶ?..

热水和甲醛处理对萌芽期种用马铃薯的影响

热水和甲醛处理对萌芽期种用马铃薯的影响王淑秋，葛泉卿（烟台动植物检疫局２６４Ｏ００）由国外特许引进的马铃薯种薯，由于贮藏运输环节多、时间长及生产国与我国生长季的差异等原因，待到达口岸时常常已处于萌芽期。参照ＦＡＯ推荐的对休眠期种用马铃薯用５５Ｃ热水处...

美国五针松和日本赤松感染松材线虫后的反应及线虫的分布趋势

松材线虫 Bursaphelenchus xylophilus(Steiner et Buhrer)Nickle 在日本造成黑松 Pinus thunbergii Parl.和赤松 P.densiflora Sieb.et Zucc.的严重死亡。接种试验表明:黑松和赤松对松材线虫侵染是敏感的;

自洗涤液中分离小麦腥黑穗病孢子的萌发试验

自洗涤液中分离小麦腥黑穗病孢子的萌发试验王淑秋，张万义，葛泉卿，宫兆林（烟台动植物检疫局２６４０００）在进口小麦检验工作中，准确鉴定分离到的小麦腥黑穗病孢子是矮腥还是网腥，是一项重要工作内容。在实际工作中，我们体会到，在能找到病瘿或分离到比较典型的孢...

葡萄金黄化病和葡萄带叶蝉在中国的潜在分布区

从文献中提取葡萄金黄化病（flavescence dorée，FD）及其传播介体葡萄带叶蝉Scaphoideus titanus Ball的发生和分布信息，建立数据库，并导入生物地理信息系统软件DIVA-GIS。依据葡萄带叶蝉的生物学特性，筛选出能够准确反映影响葡萄带叶蝉分布的生物气候变量，采用DIVA-GIS内建的ENFA模型进行预测分析。结果表明：以月平均温（上限＋下限）、最冷月最低温（上限）和最热月最高温（下限）变量为参数，以欧洲的已知分布为源数据，用BIOCLIM算法可以准确预测出包括美国和加拿大的大湖区和纽约州的芬格湖群（Finger Lakes）在内的大片区域是葡萄带叶蝉在北美洲的适生区。这与葡萄带叶蝉在北美洲的已知分布区十分吻合。然后，用上述参数对葡萄带叶蝉在中国的潜在分布区进行了分析。结果表明：葡萄带叶蝉在中国中东部的广大区域（23～42°N，101～124°E）都可以生存。此外，在新疆石河子附近和台湾省中部也有小片的可生存区域。在中国的十大主要葡萄产区中，渤海湾产区的胶东半岛和辽东半岛、甘肃、云南高原葡萄产区是葡萄带叶蝉的适生区域。进一步的分析表明：葡萄金黄化病的潜在分布区和适生区与葡萄带叶蝉是一致的。随着全球气候变暖，葡萄金黄化病和葡萄带叶蝉在中国的潜在分布区有向北移动的趋势，在渤海湾葡萄产区的潜在分布区会进一步扩大。

人工培养液在植原体昆虫介体筛选中的适用性

研究了一种人工培养液对各种常见的昆虫(主要是叶蝉)的亲和性和适用性。结果表明,该人工培养液适于本试验中大多数昆虫的人工饲养。用此方法,悬钩子广头叶蝉 Macropsis fuscula Zetterstedt 和桤树广头叶蝉 Oncopsis alniSchrank 分别被再次确认为悬钩子矮化植原体和桤树黄化植原体的传播介体;田旋花麦蜡蝉 Hyalesthes obsoletus Signoret 再次被确认为葡萄黄化(stolbur)植原体的传播介体。此前,上述三种叶蝉已被传统的人工接种方法鉴定为相应植原体的传播介体。危害桤树的河谷树叶蝉 Allygus modestus Scott 尽管虫体 DNA 检测结果经常为阳性,但迄今其人工培养液的检测结果都是阴性,因此,我们认为河谷树叶蝉不是桤树黄化植原体的传播介体。Eppendorf 管人工培养液饲养法不仅适用于潜在的植原体介体昆虫的筛选鉴定,而且可用于介体昆虫的生物防治研究。此外,本研究首次发现自然感染了葡萄上的一种被德国人称为“Vergi-lungskrankheit”植原体(AY 组)的草地脊冠叶蝉 Aprodes makarovi Zachvatkin。