目的确定山药多糖复合酶法提取的最佳酶配比和最佳提取工艺条件。方法采用蛋白酶、纤维素酶、果胶酶复合处理提取山药多糖。以酶用量、酶作用温度、pH值、提取时间为因素水平,通过正交实验方法研究了3种酶量的最佳配比,及最佳提取工艺...目的确定山药多糖复合酶法提取的最佳酶配比和最佳提取工艺条件。方法采用蛋白酶、纤维素酶、果胶酶复合处理提取山药多糖。以酶用量、酶作用温度、pH值、提取时间为因素水平,通过正交实验方法研究了3种酶量的最佳配比,及最佳提取工艺条件。结果复合酶法提取山药多糖的最佳工艺条件:纤维素酶用量为1.5%、果胶酶用量为0.5%、酸性蛋白酶用量为2.0%配比,酶作用温度50℃,酶作用pH值为5.5,酶作用时间为60 m in。在此条件下,多糖提取率最高,总糖得率5.38%。结论该方法显著提高了山药多糖的提取率,可为山药多糖的大规模工业化生产提供了可借鉴的新方法。展开更多
[目的]克隆浙贝母环阿屯醇合成酶(Cycloartenol synthase,CAS)5`末端cDNA序列。[方法]利用简并引物及RT-PCR方法获得CAS的核心基因,应用cDNA末端快速扩增(Rapid-amplification of cDNA ends,RACE)技术快速克隆5`末端片段,采用NCBI网站上...[目的]克隆浙贝母环阿屯醇合成酶(Cycloartenol synthase,CAS)5`末端cDNA序列。[方法]利用简并引物及RT-PCR方法获得CAS的核心基因,应用cDNA末端快速扩增(Rapid-amplification of cDNA ends,RACE)技术快速克隆5`末端片段,采用NCBI网站上的Protein Blast软件进行氨基酸同源性比对。[结果]从浙贝母叶片中成功地克隆出一条长691bp的CAS基因5`末端cDNA片段,含起始密码子及163bp的5`延伸区。对5`末端的150个氨基酸同源性分析表明,该片段与C.asiatica,G.glabra,A.thaliana,W.somnifera的CAS同源性分别达72%,66%,71%,71%。[结论]上述结果表明所克隆的片段为浙贝母CAS的5`末端序列,为下一步CAS全长基因的克隆及CAS在浙贝母次生代谢中的功能研究打下基础。展开更多
文摘目的确定山药多糖复合酶法提取的最佳酶配比和最佳提取工艺条件。方法采用蛋白酶、纤维素酶、果胶酶复合处理提取山药多糖。以酶用量、酶作用温度、pH值、提取时间为因素水平,通过正交实验方法研究了3种酶量的最佳配比,及最佳提取工艺条件。结果复合酶法提取山药多糖的最佳工艺条件:纤维素酶用量为1.5%、果胶酶用量为0.5%、酸性蛋白酶用量为2.0%配比,酶作用温度50℃,酶作用pH值为5.5,酶作用时间为60 m in。在此条件下,多糖提取率最高,总糖得率5.38%。结论该方法显著提高了山药多糖的提取率,可为山药多糖的大规模工业化生产提供了可借鉴的新方法。
