目的:探讨应用RNAi技术沉默信号转导与激活因子3(Signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)基因对人卵巢癌SKOV3细胞的影响。方法:根据siRNA(Small interference RNAs,iRNA)设计原则,结合pSilencer2.1-U6-neo质粒特...目的:探讨应用RNAi技术沉默信号转导与激活因子3(Signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)基因对人卵巢癌SKOV3细胞的影响。方法:根据siRNA(Small interference RNAs,iRNA)设计原则,结合pSilencer2.1-U6-neo质粒特点,针对STAT3基因设计并合成2条寡聚DNA片段,退火后克隆入pSilencer2.1-U6-neo质粒,应用脂质体将重组质粒转染SKOV3细胞。通过RT-PCR及Western blot检测STAT3基因不同水平的表达,采用MTT实验、流式细胞仪检测细胞增殖、凋亡的变化。结果:目的siRNA实验组细胞STAT3蛋白及mRNA表达水平均明显下降,细胞增殖能力显著降低,而细胞凋亡率则显著升高。结论:应用RNAi技术沉默STAT3基因可以降低卵巢癌SKOV3细胞STAT3的表达,进而抑制细胞的生长、增殖及诱导细胞的凋亡。展开更多
目的通过RNA干扰技术抑制宫颈癌SiHa细胞转录活化因子3(signal transduction and activators of transcription3,STAT3)基因的表达,观察细胞放射敏感性的变化。方法构建pSTAT3-siRNA真核表达质粒并转染宫颈癌SiHa细胞,RT-PCR及Western b...目的通过RNA干扰技术抑制宫颈癌SiHa细胞转录活化因子3(signal transduction and activators of transcription3,STAT3)基因的表达,观察细胞放射敏感性的变化。方法构建pSTAT3-siRNA真核表达质粒并转染宫颈癌SiHa细胞,RT-PCR及Western blot法分别检测STAT3基因mRNA及蛋白表达。采用6MV直线加速器分别以不同剂量(0、2、4、6、8 Gy)X线照射细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡率,克隆形成实验检测细胞放射敏感性变化。结果与对照组细胞相比,pSTAT3-siRNA转染组细胞STAT3基因mRNA和蛋白水平表达均下降(P<0.05)。细胞经X线照射后,与对照组比较,pSTAT3-siRNA转染组细胞凋亡率升高,SF2值降低(P<0.05)。结论 pSTAT3-siRNA真核表达载体能够抑制宫颈癌SiHa细胞STAT3基因表达,增强其对放射线损伤的敏感性。展开更多
文摘目的:探讨应用RNAi技术沉默信号转导与激活因子3(Signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)基因对人卵巢癌SKOV3细胞的影响。方法:根据siRNA(Small interference RNAs,iRNA)设计原则,结合pSilencer2.1-U6-neo质粒特点,针对STAT3基因设计并合成2条寡聚DNA片段,退火后克隆入pSilencer2.1-U6-neo质粒,应用脂质体将重组质粒转染SKOV3细胞。通过RT-PCR及Western blot检测STAT3基因不同水平的表达,采用MTT实验、流式细胞仪检测细胞增殖、凋亡的变化。结果:目的siRNA实验组细胞STAT3蛋白及mRNA表达水平均明显下降,细胞增殖能力显著降低,而细胞凋亡率则显著升高。结论:应用RNAi技术沉默STAT3基因可以降低卵巢癌SKOV3细胞STAT3的表达,进而抑制细胞的生长、增殖及诱导细胞的凋亡。
文摘目的通过RNA干扰技术抑制宫颈癌SiHa细胞转录活化因子3(signal transduction and activators of transcription3,STAT3)基因的表达,观察细胞放射敏感性的变化。方法构建pSTAT3-siRNA真核表达质粒并转染宫颈癌SiHa细胞,RT-PCR及Western blot法分别检测STAT3基因mRNA及蛋白表达。采用6MV直线加速器分别以不同剂量(0、2、4、6、8 Gy)X线照射细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡率,克隆形成实验检测细胞放射敏感性变化。结果与对照组细胞相比,pSTAT3-siRNA转染组细胞STAT3基因mRNA和蛋白水平表达均下降(P<0.05)。细胞经X线照射后,与对照组比较,pSTAT3-siRNA转染组细胞凋亡率升高,SF2值降低(P<0.05)。结论 pSTAT3-siRNA真核表达载体能够抑制宫颈癌SiHa细胞STAT3基因表达,增强其对放射线损伤的敏感性。