共生微生物对仔猪肠道发育、代谢和线粒体功能的影响

【目的】以猪为动物模型研究共生微生物对宿主肠道发育代谢的调控作用。【方法】经无菌剖腹产、无菌饲养等技术培育无菌(germ-free,GF)仔猪和无特定病原(specific pathogen-free,SPF)仔猪,通过形态学观察、液相色谱分析、RNA-seq等方法研究共生微生物对仔猪肠道形态、代谢、基因表达及线粒体功能的影响。【结果】共生微生物对仔猪肠道的形态结构、短链脂肪酸含量、氨基酸代谢和肠道细胞线粒体含量等方面产生不同程度的影响;共生微生物影响仔猪肝脏、回肠和结肠组织的整体基因表达,调控线粒体氧化磷酸化、氨基酸代谢、脂质代谢等生物学过程相关基因表达,导致线粒体功能发生改变,从而影响仔猪肠道营养物质的吸收与代谢。【结论】共生微生物通过调控肠道细胞线粒体从而影响仔猪肠道发育和代谢,为“微生物-宿主互作”调控仔猪肠道健康相关研究奠定理论基础。

肠道微生物对宿主适应性免疫的影响

肠道微生物与宿主共同进化,形成了不可分割的宿主-微生物共生关系。这些共生微生物通过参与适应性免疫的发育和维持,在机体免疫系统中发挥了重要作用。适应性免疫系统通过B细胞介导的体液免疫和T细胞介导的细胞免疫维持机体稳态。肠道微生物可以直接调节B、T细胞的分化和活化,保护机体免遭病原体感染。本文综述肠道微生物对宿主早期免疫系统发育、细胞免疫和体液免疫的调控作用,以期为研究“微生物-宿主互作”对宿主适应性免疫的调控作用提供理论参考。

基于细胞体外培养筛选最适胎牛血清

为了探索小鼠骨髓瘤细胞(Sp2/0)与猪胎儿成纤维细胞(PFF)对胎牛血清(FBS)的需求差异,以期筛选出最适血清,首先采用两种不同来源的FBS培养Sp2/0和PFF,观察细胞形态、克隆形成,分析细胞活率与数量.结果显示:无论采用国产FBS1还是进口的FBS2培养Sp2/0,其细胞克隆数、细胞数量和活率差异均无统计学意义(p>0.05),但进口FBS2培养的PFF,其细胞克隆数、细胞数量和活率均显著高于国产FBS1(p<0.05).随后用进口FBS2的3个不同批号培养PFF,结果显示:3个批号的FBS2均能促进细胞生长,细胞结构清晰,呈梭形;培养7 d,3个批次的FBS2均有细胞克隆形成,但FBS2-1形成的克隆小,且细胞克隆数极显著低于FBS2-2和FBS2-3(p<0.01);培养10 d,FBS2-1的细胞数量和细胞活率极显著低于FBS2-2和FBS2-3(p<0.01).虽然FBS2-2的细胞克隆数极显著低于FBS2-3(p<0.01),但是FBS2-2的细胞克隆大,且细胞数量极显著高于FBS2-3(p<0.01).结果表明:Sp2/0与PFF对FBS的需求有差异,无论是国产FBS1还是进口FBS2,均能满足Sp2/0体外培养的需要,但PFF在进口FBS2中的生长性能极显著优于国产FBS1,FBS2-2是PFF体外培养的最适血清.

短链脂肪酸调控骨骼肌生理功能研究进展

近年来,肠道菌群与宿主整个生命过程的相互作用受到越来越多的关注。肠道菌群可产生具有生物活性的可吸收代谢物,对维持宿主的健康起到了不可替代的作用。短链脂肪酸(short chain fatty acids,SCFAs)是肠道菌群发酵膳食纤维产生的主要代谢产物,主要包括乙酸、丙酸和丁酸,其作为介导肠道菌群与宿主各器官之间互作的媒介,广泛参与到宿主的生理活动中,其中也包括骨骼肌。骨骼肌作为机体最大和最重要的器官之一,维持其正常生理功能对于机体健康至关重要。目前关于SCFAs调控宿主的研究多集中在其他组织器官,调控骨骼肌的相关报道较少。鉴于SCFAs广泛的生理作用和骨骼肌自身的重要性,笔者就肠-肌轴理论、SCFAs的产生途径、转运及其对骨骼肌(质量、耐力、纤维特性)的调控作用进行综述,旨在加深对SCFAs调控骨骼肌这一生理过程的认识,为探索骨骼肌相关疾病的生物靶点提供新的思路。

大鼠糖尿病溃疡动物模型的初步研究

目的构建大鼠糖尿病溃疡动物模型,观察评价该模型的临床及病理特点。方法利用磁片循环压迫的方法,构建大鼠糖尿病溃疡动物模型,并从整体,组织和生化三个层次对糖尿病溃疡进行了研究。结果构建出了一个可以复制的糖尿病溃疡动物模型,该模型具有组织坏死、白细胞聚集以及高浓度晚期糖化终末产物等特征。结论利用缺血再灌注法构建了大鼠糖尿病溃疡动物模型。其病理改变与人极为相似,是一种很好的用于糖尿病溃疡发病机制和治疗研究的动物模型。

四种药物对丙二醛和晚期糖化终末产物抑制作用的比较

目的比较四种黄酮类物质抗氧化能力和防止晚期糖化终末产物的形成能力。方法通过对黄连素,槲皮素,水飞蓟宾和水飞蓟素四种不同的黄酮类中药对肝匀浆中丙二醛(MDA)生成和晚期糖化终末产物(AGE)生成的抑制作用的研究,比较四种黄酮类物质预防糖尿病并发症的能力。结果水飞蓟素具有很好的抑制肝匀浆中丙二醛(MDA)生成和晚期糖化终末产物(AGE)生成作用,其IC50分别为2×10-10g/ml和5.6×10-4g/ml。结论水飞蓟素可以用来预防糖尿病并发症。

人源化抗体转基因动物的研究进展与趋势

人源化抗体转基因动物是人源化抗体药物开发的战略核心资源,能为抗体序列发现提供源头创新保障,并为突发性生物安全事件提供应急预案。文章对人源化抗体转基因动物的发展历程进行综述回顾,重点介绍目前世界上常用的人源化抗体转基因动物品系,并对其应用情况和发展趋势进行分析展望。

超高压处理对卤制鹅胗灭菌保鲜与品质的影响

为了揭示超高压处理对卤制鹅胗灭菌保鲜与品质的影响,以100、200、300、400、500、600 MPa的压力对卤制鹅胗进行处理,保压15 min,以未经高压处理的样品为对照,室温(20±5)℃存放至第1、5、9天测定样品的菌落总数、大肠杆菌及沙门氏菌等微生物指标,同时对样品的pH值、嫩度、色差等理化指标以及感官指标进行分析。结果表明:400 MPa以上压力保压15 min可以有效抑制大肠杆菌和沙门氏菌的生长;200～500 MPa处理对pH值的影响不显著(P>0.05),在9 d存放期中,pH值整体呈下降趋势,鹅胗样品中心点pH值高于边缘部位;超高压处理对嫩度没有显著影响(P>0.05);超高压处理对表面色差有显著影响(P<0.05)。从感官上分析,高压处理对卤制鹅胗的口感、气味及质地等感官品质影响不显著。超高压处理不仅具有较好的杀菌效果,而且最大限度地保证了卤制鹅胗的品质。

辐照猪皮与重组人表皮生长因子凝胶治疗小面积Ⅱ度烧伤的临床观察

目的观察辐照猪皮与重组人表皮生长因子(recombinant human epidermal growth factor,rhEGF)凝胶用于治疗Ⅱ度烧伤的临床疗效。方法选择135例Ⅱ度烧伤患者,分成3组,分别是辐照猪皮组、rhEGF凝胶组和对照组(碘伏油纱组),观察创面愈合时间、患者疼痛度、换药工作量、色素沉着度、愈合后效果以及1年后随访效果。结果不同治疗方式的愈合时间:对照组>rhEGF凝胶组>辐照猪皮组。辐照猪皮组和rhEGF凝胶组对Ⅱ度烧伤创面的治疗效果均优于对照组,平均愈合时间提前3～5 d,差异有统计学意义(P<0.01),且辐照猪皮组效果要略优于rhEGF凝胶组(P<0.05);rhEGF凝胶组和辐照猪皮组的患者疼痛度减轻及换药工作量相对对照组明显减少(P<0.01),且患者创面愈合效果良好、较少引起色素沉着,1年后部分患者随访证实远期愈合效果好,较少引起瘢痕增生。结论辐照猪皮和rhEGF治疗Ⅱ度烧伤效果确切、预后良好,临床上值得广泛使用。

猪精液超低温冷冻保存研究进展

猪人工授精(AI)技术已经广泛应用于畜牧业生产,但精液来源基本是17℃保存的新鲜猪精液,不利于精液长期保存和猪种资源保存。超低温冷冻保存技术是猪精液长期保存最有效的方法,冷冻精液可以实现不同地区、不同国家优良种猪精液间的交流,从而大大提高猪种资源的利用率,但冷冻解冻后的精液质量较差,受胎率、窝产仔数远低于鲜精,极大地限制了猪精液冷冻保存技术的广泛应用。本文综述了猪精液冷冻保存研究概况、猪精液冷冻损伤机理和猪精液冷冻保存影响因素,以期为猪精液超低温冷冻保存研究提供新的思路和方法。

胶原蛋白对香肠品质的影响研究

胶原蛋白独特的三螺旋结构,使得其在许多领域具有较重要的应用前景。在食品添加剂方面,胶原蛋白可以作为肉制品改良剂,改善肉制品的嫩度。本实验将胶原蛋白粉添加到香肠中,分析添加胶原蛋白粉后对香肠理化性质的影响。试验表明,添加胶原蛋白粉,可以使香肠的改善香肠的理化性质,使得香肠的水分含量和产率分别提高了19.90%和8.33%,同时还能改善香肠嫩度。

壳聚糖涂膜保藏技术在卤鹅加工中的应用

采用壳聚糖涂膜保藏技术,结合天然生物防腐剂、真空包装及低温二次杀菌技术,对卤鹅综合保鲜技术进行了研究。结果表明:利用复配的壳聚糖涂膜液(含1%壳聚糖、1%Nisin和0.2%醋酸)对卤鹅表面作涂膜,然后真空包装,低温二次杀菌(80℃～85℃,5 min)处理,卤鹅在常温下(30℃～35℃)的货架期可达到4周。

肠道菌群对动物免疫系统早期发育的影响

肠道是动物机体最大的免疫器官,肠道菌群是定植在肠道内的微生物群落。最早定植在动物体内的细菌源于动物在环境中随机接触的第一类细菌,并结合其他环境因素影响后续微生物种类的进入。微生物与免疫的互作在免疫系统的早期发育中起着重要作用,一旦中断将导致潜在、持久的免疫异常,所以微生物的早期定植有助于提高机体的免疫力。本文主要综述了肠道菌群对畜禽免疫系统早期发育的影响,探讨在养殖业中如何促进畜禽健康、提高生产成绩。

一种新型血红蛋白色素制品稳定性的研究

实验以猪血为原料,加入烟酰胺、D-异抗坏血酸钠和壳聚糖制成一种新的不含亚硝基的血红蛋白制品,同时以亚硝基血红蛋白为对照,系统研究温度、光照、金属离子及pH对其稳定性的影响。结果表明:烟酰胺、D-异抗坏血酸钠和壳聚糖复合处理的血红蛋白对温度、光照、金属离子的稳定性均优于亚硝基血红蛋白,但光照以及Cu2+、Fe2+、Zn2+对糖基化酰基血红蛋白及亚硝基血红蛋白的稳定性均有较大影响,而在pH5～8范围内,两者均无明显影响。

无菌猪的制备与微生物质量控制

菌群与宿主相互关系等热点研究促进了对无菌动物需求的迅猛发展。无菌猪作为一种特殊的模式动物,其在科学研究中不仅排除了背景微生物因素的影响,而且与常用的无菌小鼠相比,其在解剖、生理、代谢等方面与人更为相似,因此在生命科学研究领域具有重要的应用价值。本文结合现有国外无菌猪研究进展和本实验室在无菌猪研究积累,就无菌猪的制备与微生物质量控制进行简要探讨。

2种腺相关病毒介导的增强型绿色荧光蛋白对人成纤维细胞转染效率的研究

目的比较2种不同腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)介导的增强型绿色荧光蛋白对人皮肤成纤维细胞(human fibroblast,HFB)的转染效率。方法原代分离培养人皮肤成纤维细胞并鉴定,按照感染复数(multiple of in-fection,MOI)为104、105、106转染传2代的人成纤维细胞,流式细胞检测AAV2-EGFP和AAV2/1-EGFP对HFB的转染效率,倒置荧光显微镜观察转染后的荧光强度。MTT法检测AAV2-EGFP和AAV2/1-EGFP对HFB的毒性。结果腺相关病毒AAV2-EGFP对HFB的转染效率随着MOI增加而增高,MOI为104时转染效率为(7.68±1.18)%,当MOI达到105后,转染效率稳定在(22.16±5.59)%,随着MOI增加,最高至MOI 106转染效率无显著提高。而病毒AAV2/1对于HFB的转染效率在MOI为106转染效率仅为(3.47±0.93)%。2种病毒在转染过程中,细胞生长正常,MTT显示各转染组与未转染组的吸光度值无统计学差异。结论AAV2载体对体外培养的HFB转染效率高于AAV2/1,但2种病毒载体对人皮肤成纤维细胞转染效率均不高,AAV2/1-EGFP对HFB几乎无感染能力。

无菌猪生长、血液以及脏器相关指标的测定

目的建立无菌太湖猪多项生理数据背景资料。方法对4头25 d无菌猪和4头同窝普通级群体,雌雄比3∶1,测定并比较血液常规、生化、免疫球蛋白和主要脏器发育指标。运用异速生长建模,对主要脏器重量相对体重的异速生长进行了分析。结果 (1)无菌猪与普通级猪的12项血常规和8项血生化指标差异有显著性(P<0.05);(2)无菌猪与普通级猪的平均体重、血清中Ig M表达量差异达到显著性水平(P<0.05),且无菌猪缺少肠系膜淋巴结;(3)无菌猪的心脏、脾和胃与体重呈负异速生长(异速生长指数b<1),肠道与体重的异速生长指数为1.78,为正异速生长;而普通级猪的心脏、胃和肠道与体重呈负异速生长(b<1),肾与体重的异速生长指数最大,为1.20,呈正异速生长。结论微生物学等级差异影响了猪体重、血液及脏器、免疫系统的发育。

胎猪皮肤前体组织异种移植模型的研究

目的探讨胎猪皮肤前体组织异种移植模型及移植后发育过程。方法取精确胎龄为56d的胎猪皮肤前体组织,分组进行移植,①背部创面模型组:制备成微粒皮后移植到BALB/c裸鼠背部创面,以人尸体皮覆盖;背部皮下模型组:制备成小张邮票皮,植入裸鼠背部皮下;耳廓皮下模型组:制备成微粒皮植入裸鼠耳廓皮下。各组于移植后观察其生长发育特性,并于移植后6周和12周取材行HE染色观察其组织结构形态。新生组织块大小采用双样本t检验。结果各模型的胎猪皮肤前体组织移植后均能存活并继续生长,背部创面模型组生长能力显著大于耳廓皮下模型组,新生皮肤组织均具有真皮和表皮,耳廓皮下模型的真皮附属器仅见毛囊(毛发),偶见皮脂腺,未见汗腺,但是背部创面模型组及背部皮下模型组不仅能发育成毛囊(毛发)、还见大量皮脂腺和汗腺。结论背部创面移植模型最适合于胎猪皮肤前体组织异种移植及移植后发育的研究。

猪精子质量的流式细胞检测分析

本试验将流式细胞术应用于猪精子分析,同时检测精子功能的多个特性,以保证精子具备多种特性且功能完整,顺利完成授精过程。分别采用SYBR-14/PI(Propidium Iodide)、YO-PRO-1/PI、PNA/PI及Mito Tracker/YO-PRO-1 4种染色方法对荣昌猪精子的质膜完整性、细胞凋亡、顶体完整性及线粒体功能进行了检测和分析;以SYBR-14^+/PI^-表示质膜完整的活精子,YO-PRO-1-/PI-表示活精子,PNA-/PI-表示未发生顶体反应的活精子,Mito Tracker^+/YO-PRO-1-表示线粒体活性高的活精子,以上述检测指标的综合结果判定精子功能的完整性。本试验通过流式细胞术对荣昌猪精子进行质量检测和分析,结果表明,该方法可为临床诊断种猪不孕症提供理论依据,对有效治疗不孕症有重要意义。

无菌猪的研究进展

无菌猪是采用现有微生物检测技术,检测不出活的微生物(包括细菌、真菌、寄生虫和病毒等)的一种悉生物,在现代畜牧生产和医学生物学研究中具有重要的科学价值。无菌猪最早用于畜牧生产的疫病净化,研究肠道菌群、动物疫病之间的关系。无菌猪和人在解剖、生理及遗传上具相似性、无微生物背景干扰,目前在医学生物学研究肠道菌群与生长发育与疾病发生发展等方面发挥着重要作用,也作为以肠道菌群为靶点的预防、诊断及治疗新技术研究的特殊动物模型。本文主要综述无菌猪的特性、研究进展及未来的发展方向。