益肾调髓方对膝骨关节炎小鼠软骨下骨骨代谢及疼痛的影响

目的:探究益肾调髓方对膝骨关节炎(KOA)小鼠软骨下骨骨代谢及疼痛症状的干预作用及其可能机制,为临床通过调节骨代谢水平缓解KOA疼痛提供依据。方法:将18只雄性C57BL6/J小鼠随机分为假手术组、模型组及益肾调髓组,每组6只。采用内侧半月板失稳术造模,术后益肾调髓组予益肾调髓方灌胃(每天0.2 mL/10 g),假手术及模型组小鼠给予0.9%氯化钠溶液灌胃,术后4周检测小鼠步态变化、免疫组织荧光染色检测软骨下骨神经生长因子(NGF)表达情况及L4脊背神经节中降钙素基因相关肽(CGRP)表达情况评估小鼠疼痛程度,免疫组织化学染色检测软骨下骨碱性磷酸酶(ALP)表达评估骨形成情况,同时借助Micro-CT扫描、ABH/OG染色、TRAP染色等手段检测小鼠膝关节软骨退变及软骨下骨异常骨重塑情况。结果:步态分析、软骨下骨NGF及脊背神经节CGRP检测结果均表明益肾调髓方可减轻KOA小鼠疼痛症状;ABH/OG染色及OARSI评分提示益肾调髓方干预可延缓关节软骨退变;Micro-CT分析、TRAP染色及免疫组化结果证实,益肾调髓方可改善KOA小鼠软骨下骨异常骨重塑。结论:益肾调髓方可缓解KOA小鼠疼痛症状,同时延缓关节软骨退变及软骨下骨异常骨形成,其作用机制可能是通过调节软骨下骨骨代谢,减少致痛因子分泌来实现的。

肾髓同治方防治小鼠去卵巢绝经后骨质疏松症的机制

目的:研究肾髓同治方对小鼠去卵巢绝经后骨质疏松症的治疗作用及其潜在机制。方法:雌性C57BL/6J野生型小鼠18只,随机分为假手术组、模型组、肾髓同治组;间充质祖细胞β-catenin^(Gli1ER)敲除小鼠18只,随机分为阴性对照组、β-catenin^(Gli1ER)组和β-catenin^(Gli1ER)+肾髓同治组。双侧卵巢切除法造绝经后骨质疏松症模型。灌胃8周后,Micro-CT观察股骨微结构变化,ABH染色观察组织病理学变化,实时荧光定量PCR法检测β-catenin、PPAR-γ、Osterix mRNA表达水平。结果:C57BL/6J小鼠中,与模型组比较,肾髓同治组小鼠的骨密度、骨体积分数、骨小梁数量显著提高(P<0.05),骨小梁面积显著增大(P<0.05),脂滴面积和直径显著减小(P<0.05),骨小梁分离度显著降低(P<0.05);肾髓同治方干预后显著提高β-catenin、Osterix mRNA表达水平(P<0.05),降低PPAR-γmRNA表达水平(P<0.01)。β-catenin^(Gli1ER)敲除小鼠中,与阴性对照组比较,β-catenin^(Gli1ER)组的骨密度、骨体积分数、骨小梁数量显著降低(P<0.05),骨小梁面积显著减小(P<0.05),骨小梁分离度显著提高(P<0.01),脂滴面积和脂滴直径显著增大(P<0.05),β-catenin^(Gli1ER)组与β-catenin^(Gli1ER)+肾髓同治组的指标差异均无统计学意义。结论:肾髓同治方对小鼠去卵巢绝经后骨质疏松症有一定的防治作用,其主要机制与调控间充质祖细胞Wnt/β-catenin信号通路有关。