4对猴空泡病毒40核酸检测引物的生物信息学分析

目的从引物设计的合理性、扩增片段的保守性、检出目的片段的敏感性等方面比较4对猴空泡病毒40(SV40)核酸检测引物之间的差异,为寻找保守性好、稳定高效的SV40核酸序列检测法提供理论基础。方法以目前已知的23个不同SV40毒株完全基因组为基础数据,用DNAMAN6.0.40软件对4对引物及其扩增片段的保守性进行分析;用clust-alX1.83软件对23个SV40基因组序列进行多重序列对齐分析;用TreeView1.6.6软件构建系统进化树;用Oligo6.71软件对4对引物的特性进行分析。结果对于接受号为DQ218418病毒株而言,4对引物的序列均不保守;对于接受号为J02400、NC_001669、AF316139和AF316141的4个病毒株而言,引物对GCVp1和GCT的序列是保守的;对于除了DQ218418之外的病毒株而言,引物对VP1的序列是保守的;对于除了DQ218418、AF180737之外的病毒株而言,引物对T的序列是保守的。结论目前通用的SV40核酸检测引物针对的SV40病毒株只有4个,本室合成的检测引物针对的病毒株有21个;本室设计的SV40检测引物和通用引物相比具有保守性好、适用性广、参数理想等优点;对于某些高度变异的毒株,应单独进行引物设计。

恒河猴树突状细胞生物学特性的初步研究

树突状细胞(dendritic cell,DC)在HIV初次感染和潜伏感染中发挥着关键作用。恒河猴的生物学性质与人类非常接近,所以恒河猴是研究HIV感染的常用动物模型。以恒河猴为实验动物进行DC的研究首先需要对恒河猴DC的生物学性质有初步的了解。本研究从健康恒河猴外周血中分离单个核细胞,用rhGM-CSF、rhIL-4和rhTNF-α等细胞因子组合体外扩增诱导恒河猴DC,成功诱导出具有典型形态特征的DC,所获DC高表达MHCII类分子和CD86共刺激分子,在混合淋巴细胞反应中能有效刺激T细胞增殖,培养至第9天表达CD1a的细胞比例为60.5%±2.0%,表达CD83的比例为43.8%±1.5%,辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)内吞实验说明诱导的猴DC在第6天吞噬能力最强。本研究为以恒河猴为实验动物进行DC的研究打下了基础。

检察业务绩效考核体系的构建与完善

产生于企业管理中的绩效考核是企业绩效管理的一个有效组成部分。模仿企业管理的检察机关现行的绩效考核办法,在实际应用中存在诸多问题,有的考核指标甚至与法律相冲突。本文认为,在研究企业管理与检察管理不同基础的前提下,创立一套科学的、符合检察机关工作实际的绩效考核办法,就案件管理而言,应当建立动态考核办法。

神经生长因子治疗脑损伤并发症的疗效观察

目的探讨神经生长因子（ＮＧＦ）对脑损伤并发症的治疗作用。方法ＮＧＦ２ｍｌ／支，每日肌注一次４ｍｌ，每１５天一疗程，用药１～２个疗程。对照组以维生素Ｂ１２、Ｂ１，脑活素和高压氧综合治疗。用药期间患者均做肝、肾功能检查。结果治疗组２５例，有效力例（９２％）；对照组２５例，有效１０例（４０％）。经统计学处理有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。结论ＮＧＦ治疗脑损伤并发症确有加快神经功能恢复的作用。

SV40对猴树突状细胞发育分化的影响

为探讨猴空泡病毒40对猴树突状细胞发育分化的影响,分别以灭活的SV40和感染性SV40作为刺激抗原致敏外周血来源的猴树突状细胞,培养第5 d加入刺激抗原,在培养第7 d和第9 d分别收集处理的猴树突状细胞并测定细胞表面分子CD1a、HLA-DR、CD86、CD83的表达情况。结果显示,与灭活的SV40抗原相比,经感染性SV40刺激的猴DC中前述四种表面分子的表达显著偏低(P<0.05)。前述四种表面分子均是DC发育分化过程的特征性分子,其表达降低说明感染性SV40对猴DC的分化成熟具有抑制作用。

猴空泡病毒40核酸序列检测法的优化研究

目的对通常使用的猴空泡病毒40（Simian vacuolating virus40，SV40）核酸序列检测法进行优化，寻找敏感性高、特异性强、适用面广的SV40核酸序列检测引物。方法以21个SV40毒株完全基因组为基础数据，用Primer Premier5．00软件重新设计两对SV40 DNA检测引物，用Oligo 6．71软件和DNAMAN 6．0．40软件对引物参数进行分析，将分析结果与通常使用的检测引物进行比较。用不同稀释度SV40核酸序列作模板，比较4对引物检测的敏感性。分别用无菌水、Vero细胞DNA、SV40DNA作模板检测4对引物的特异性。结果对于21个SV40病毒株，优化引物对VP1和T的序列是保守的；对于接受号为J02400、NC_001669、AF316139和AF316141的4个病毒株，通常使用的引物对GCVP1和GCT的序列是保守的；用同一稀释度的SV40DNA作模板，引物对VP1和T的扩增效率明显高于引物对GCVP1和GCT；在特异性检测比较中，引物对VP1和T没有出现非特异性扩增条带，引物对GCVP1和GCT在100bp处出现非特异性扩增条带。结论优化的SV40核酸序列检测法具有敏感性高、特异性强、检测面广、引物及其PCR产物序列保守等特点。

重组抗菌肽基因克隆及其Pichia pastoris表达工程菌的构建

根据毕赤酵母对遗传密码的偏爱性,在不改动氨基酸序列的前提下,用化学法合成抗菌肽麻蝇素A的基因片段,合成片段拼接后,与α因子重组,重组基因再构建到表达载体pPIC9K上,得到受乙醇氧化酶1基因(AOX1)的启动子与转录终止区控制的酵母表达质粒,经鉴定分析,阳性重组子转化pastoris GS115宿主菌,经过表型筛选,成功获得了高效分泌表达麻蝇素A的重组毕赤酵母工程菌.

乙型肝炎病毒免疫逃避机制研究进展

乙型病毒性肝炎是一种危害严重的常见传染病,乙型肝炎病毒成功实现免疫逃逸与多种因素有关,其中树突状细胞的功能状态、主要组织相容性复合体的类型及病毒基因型的类别是主要影响因素.从这几个方面对乙型肝炎病毒的免疫逃避机制进行综述.

邮政物流:中国邮政的生力军

为了适应我国经济的快速发展,进一步发挥邮政遍布城乡的网络优势,中国邮政集团公司于2003年1月全资建立了中邮物流有限责任公司,依托中国邮政网络、品牌和"

《中法新约》“新”在何处——兼谈《中法新约》的形成过程

《中法新约》，原名《中法会订越南条约十款》，又叫《中法会订安南条约》或《李巴条约》。它是１８８５年中法战争结束后，战胜的清政府同战败的法国签订的一个卖国条约。战败的法国通过条约达到了它想通过战争获胜方能达到的目的，从而造成了所谓中国不败而败，法国不胜...