泛素特异性蛋白酶42调节人脂肪干细胞成骨向分化

目的:探索泛素特异性蛋白酶42(ubiquitin-specific protease 42,USP42)在人脂肪干细胞(human adipose-derived stem cells,hASCs)体内外成骨向分化中的作用。方法:用慢病毒转染hASCs,构建敲低和过表达USP42的稳定转染细胞系,通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色及活性定量、茜素红S矿化结节染色及定量,检测实验组(敲低组和过表达组)及对照组在成骨诱导下hASCs成骨向分化能力的差异,通过定量逆转录聚合酶链反应(quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测实验组及对照组成骨相关基因的表达水平,通过蛋白免疫印迹实验检测实验组及对照组成骨相关蛋白的表达水平,通过裸鼠异位成骨实验评价USP42在hASCs体内成骨向分化中的作用。结果:敲低组USP42的mRNA和蛋白表达显著低于对照组,过表达组显著高于对照组。成骨诱导7 d后,敲低组的ALP活性显著高于对照组,过表达组显著低于对照组;成骨诱导14 d后,敲低组茜素红S染色显著深于对照组,过表达组显著浅于对照组。qRT-PCR结果显示,成骨诱导14 d时,敲低组ALP、成骨细胞特异性转录因子(osterix,OSX)和Ⅰ型胶原(collagen typeⅠ,COLⅠ)的mRNA表达水平显著高于对照组,过表达组显著低于对照组。蛋白免疫印迹实验结果显示,成骨诱导14 d时敲低组runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)、OSX和COLⅠ蛋白表达水平显著高于对照组,过表达组显著低于对照组。裸鼠皮下移植物苏木精-伊红染色结果显示,敲低组类骨组织百分比较对照组显著增高。结论:敲低USP42显著促进hASCs的体内外成骨向分化,过表达USP42显著抑制hASCs的体内成骨向分化,USP42可作为骨组织工程学潜在治疗靶点。

Nd:YAG激光辅助根管治疗疗效的Meta分析

目的探讨使用Nd:YAG激光辅助根管治疗的临床疗效。方法计算机检索Pub Med、Embase、Cochrane Library、中国期刊全文数据库、维普数据库、万方数据库、中文生物医学文献数据库等,筛选国内外使用Nd:YAG激光辅助根管治疗的随机对照临床研究,检索范围为1997—2015年。在严格筛选资料和质量评价的基础上,采用Rev Man5.3软件对纳入的研究结果进行Meta分析,系统评价Nd:YAG激光在根管治疗中的作用。结果共纳入8篇临床对照试验研究。对Nd:YAG激光辅助根管治疗术后24~48 h、1周和6~12个月的疗效数据采用固定模型分析。Nd:YAG激光辅助根管治疗组术后24~48 h和1周,发生根管治疗期间急症(endodontic interappointment emergencies,EIAE)的百分比较常规根管治疗组减少,差异有统计学意义(24~48 h:OR_(合并)=0.27,95%CI=0.15~0.48;1周:OR_(合并)=0.26,95%CI=0.13~0.54)。术后6~12个月,Nd:YAG激光辅助根管治疗组的失败率低于常规根管治疗组,差异有统计学意义(OR_(合并)=0.24,95%CI=0.06~1.00)。结论使用Nd:YAG激光辅助根管治疗减少了术后的疼痛反应,降低了根管治疗6~12个月失败率。

构建一种可评价脂肪间充质干细胞成骨向分化的荧光素酶报告系统

目的:构建一种可用于评价人脂肪间充质干细胞(human adipose-derived stem cells,h ASCs)成骨向分化的荧光素酶报告系统,以期能够快捷、特异且定量的检测出细胞在体外的成骨向分化情况,并且使将来活体监测小型实验动物外源移植细胞的成骨分化成为可能。方法:将骨钙素(osteocalsin,OC)基因的启动子克隆到荧光素酶luciferase报告基因的上游,构建p LVX-OC_(pro)-Luc-Puro载体,进行慢病毒包装后感染人脂肪间充质干细胞,嘌呤霉素(puromycin)筛选阳性克隆,获得稳定整合OC_(pro)-Luc-Puro的细胞株,将该细胞在成骨诱导培养基中培养的第7和14天,观察其在成骨诱导环境下分化的情况。在成骨诱导培养的第7和14天检测荧光素酶的活性,同时进行茜素红(Alizarin red S)染色定量及成骨相关基因表达水平的检测,通过比较验证该荧光素酶报告系统用于成骨评价的可行性。结果:成功构建p LVX-OC_(pro)-Luc-Puro载体获得稳定整合报告基因的h ASCs细胞株。在OC_(pro)-Luc-Puroh ASCs成骨诱导的第7和14天,茜素红钙化结节染色结果均为阳性,且第14天的染色及定量结果明显强于第7天。OC、Runx2及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)基因的mRNA水平在成骨分化刺激下,其表达水平逐渐上升,同时,荧光素酶被激活,且荧光素酶的活性在第14天明显强于第7天,即荧光素酶表达的趋势与茜素红染色定量及成骨相关基因表达水平一致。结论:成功构建了一种可用于评价成骨向分化的荧光素酶报告系统,并通过与传统的检测成骨向分化方法(茜素红染色定量、成骨相关基因表达)对比,验证了该系统的有效性。

前牙外伤综合诊疗1例

患者,男性,26岁,因＂上前牙及颏部外伤1小时＂于北京大学口腔医学院急诊就诊。上前牙松动移位,牙齿折断,遇冷风敏感。颏部撕裂,少量出血。无头晕恶心呕吐。患者体健,否认既往史及家族史。面部未见明显肿胀,面型对称。下颏部挫裂伤,长约2cm,深约0.5cm,无活动性出血。开口度正常,开口型↓,双侧关节区无压痛,颞下颌关节无弹响及杂音。

人脂肪基质细胞在骨组织工程学中的应用

口腔颌面部及全身骨组织缺损是临床医生经常要面对的困境。造成骨缺损的原因有很多,包括先天发育异常、炎症、肿瘤、外伤等,然而治疗骨缺损的方法却十分有限,以往主要应用自体骨移植或人工骨替代材料,但是,自体骨移植取材受限并且会增加手术创伤,人工材料生物相容性差并且成骨能力有限,

原代人脂肪基质细胞体内成骨能力的检测

目的:检测原代人脂肪基质细胞(human adipose-derived stromal sells,hASCs)的体内成骨能力,为应用其构建组织工程化骨奠定基础。方法:酶消化法分离原代hASCs,细胞经成骨向和成脂肪向诱导后,碱性磷酸酶(al-kaline phosphatase,ALP)染色和茜素红矿化染色检测其成骨向分化的能力,油红O染色检测其成脂肪向分化的能力。体内实验使用12只裸鼠,于其背部一侧皮下植入原代hASCs+支架材料作为实验组,同一裸鼠的另一侧植入单纯支架材料作为对照组。植入4周和8周后取材,制成组织切片,进行HE染色和免疫组织化学染色观察。结果:300 mL脂肪组织中可以获得约6×107个原代hASCs。体外实验证实原代hASCs具有成骨向和成脂肪向分化的潜能。HE染色可见,植入4周和8周后植入物中有类骨组织形成,免疫组织化学染色显示骨钙素、ALP和抗人核抗体呈阳性表达。结论:原代人脂肪基质细胞与支架材料构建的复合物可以在裸鼠体内成骨。

低聚合收缩树脂修复楔状缺损的临床疗效观察

目的 :评估采用低聚合收缩树脂Filtek^(TM) P90修复楔状缺损的临床疗效。方法 :选择52例患者、共180颗楔状缺损患牙,采用自身对照设计,随机选择每例患者的一侧患牙为实验组,采用Filtek^(TM) P90树脂充填;对侧同名牙为对照组,直接采用Filtek^(TM) Z350 XT树脂充填。对所有楔状缺损修复体于修复后半年、1年进行对比观察。采用改良美国公共卫生署直接临床评价系统(USPHS)比较2组修复体的质量,采用SPSS19.0软件包对数据进行χ2检验,评价FiltekTMP90树脂充填楔状缺损的临床效果。结果 :治疗后半年复查,实验组成功率为96.55%,对照组为95.40%。治疗后1年复查,实验组成功率为94.05%,对照组为90.48%。半年及1年复查结果显示,在成功率、固位、边缘着色、边缘密合性、表面形态、色泽协调性、继发龋、牙髓反应等方面,实验组与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:FiltekTMP90树脂充填楔状缺损能够取得良好的临床效果,值得推广应用。

1例桥基牙根尖手术后的固定桥修复

目的:通过个性化的综合诊疗,实现右上中切牙慢性根尖周炎疾病控制、美观调整与功能恢复。诊治经过:主诉患牙为旧固定桥的基牙,拆除旧固定桥后,对进行了显微根管治疗。8个月后,仍存在根尖病变,通过显微根尖手术纠正根充超填、囊肿样变化及可能存在的根外感染。期间进行了定期的牙周基础治疗,其他楔状缺损患牙的复合树脂直接粘接修复。通过功能适合性美学诊断蜡型进行美学调整和功能适应。针对修复环节,患者综合考虑疗程、费用、美观、功能及预后,选择了固定桥修复。结果:控制了的根尖周炎症,良好地恢复了牙体缺损及牙列缺损的功能与美观。结论:通过一站式的个性化综合诊疗,可降低患者转换不同专业的沟通成本和转诊次数。

抑制视网膜母细胞瘤结合蛋白2基因表达促进人脂肪基质细胞成骨向分化的研究

目的 探讨视网膜母细胞瘤结合蛋白2（retinoblastoma binding protein 2,RBP-2）在人脂肪基质细胞（human adipose-derived stromal cell,hASC）成骨向分化中的作用.方法 设计靶向RBP-2小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）序列4对,将相应寡核苷酸构建到慢病毒载体pLL 3.7中,于293T细胞进行病毒包装用于RBP-2基因敲低.采用RBP-2敲低效果好的两个siRNA序列进行病毒包装,并以非沉默siRNA的pLL 3.7质粒包装的慢病毒为对照组,感染hASC,培养第14天定量检测碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活性并行ALP染色及茜素红矿化结节染色,检测hASC成骨向分化的差异.结果 成功构建RBP-2基因RNA干扰慢病毒载体并获得相应慢病毒.慢病毒感染hASC后,RBP-2 mRNA及蛋白表达均被明显抑制.RBP-2 siRNA-1组和RBP-2 siRNA-4组的敲低效果较好,以此两组感染hASC.成骨诱导培养第14天RBP-2 siRNA-1组和RBP-2 siRNA-4组ALP活性[（299.2±22.7）、（224.3±17.7）U/g]高于对照组[（129.9±12.9）U/g,P＜0.05],RBP-2 siRNA-1组和RBP-2 siRNA-4组茜素红及ALP染色强于对照组.结论 成功构建的RBP-2 RNA干扰慢病毒能显著抑制RBP-2表达,并促进hASC向成骨细胞分化,即RBP-2可以抑制hASC的成骨向分化.

口腔全科住院医师规范化培训考核体系的建立与效果评价

目的:建立口腔全科住院医师规范化培训考核体系并对其进行评价,促进我国口腔住院医师规范化培训的规范和完善。方法:2018年8月至2020年8月总结多年的教学实践,北京大学口腔医院建立了口腔全科住院医师规范化培训考核体系,通过对参与考核的24名口腔全科住院医师进行问卷调查以评价该考核体系。结果:考核体系主要包括综合临床操作能力考核、综合病历书写考核、综合病例报告考核和综合病例分析考核4大模块,每个模块满分均为100分。100.0%(24/24)的被调查口腔全科住院医师认为考核体系的内容较为全面、合理,能够反映口腔全科医师的能力,对考核体系整体满意;83.3%(20/24)的被调查口腔全科住院医师认为该考核体系难易程度合适。结论:本研究所建立的口腔全科住院医师规范化培训考核体系各部分考核重点明确、难易适中,有助于促进口腔全科住院医师能力的培养。

影响VariolinkII双重固化树脂粘接剂粘接效果的原因分析及对策

目的总结应用VariolinkII双重固化树脂粘接剂进行患牙瓷贴面修复的经验，分析影响修复效果的原因，提出相应的护理对策。方法选择北京大学口腔医院使用VariolinkII双重固化树脂粘接剂行瓷贴面修复的患者463例，对其中粘接效果欠佳的11例进行回顾性分析。结果瓷贴面脱落4例，瓷贴面传递过程中掉落2例，粘接完成后患牙敏感、软组织不适3例，酸蚀不当影响瓷贴面美观度1例，多个瓷贴面粘接时混淆牙位1例。结论应用双重固化树脂粘接剂VariolinkII粘接瓷贴面，需严格遵守粘接材料所规定的条件以及操作规范，严谨细致，才能避免医护粘接操作因素导致的瓷贴面修复失败。

香蕉皮缝合模型在口腔医学专业实习学生缝合教学中的应用

目的评价香蕉皮缝合模型在口腔医学专业实习学生缝合教学中的应用效果。方法 2021年1月至3月, 以北京大学2017级口腔医学专业82名实习学生为研究对象, 使用香蕉皮作为缝合模型进行缝合练习。记录课堂讲解前缝合评分(基线水平), 对课堂讲解后(训练1)和课下练习后(训练2)缝合结果进行评分。使用配对t检验比较每次训练评分, 使用Pearson相关分析检验评分的相关因素。结果训练1评分[(20.88±3.68)分]高于基线水平[(15.15±5.24)分], 训练2评分[(24.80±3.83)分]高于训练1评分, 其差异均具有统计学意义(均P<0.05)。训练1评分与全学程成绩相关(r=0.29);训练2评分与性别(r=0.39)、课下练习累计时长(r=0.44)、全学程成绩相关(r=0.29), 其差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论在课堂教学和课下练习中应用香蕉皮缝合模型, 可以有效提高口腔医学专业实习学生学生的缝合水平。