ADP脱敏对兔血小板ADP受体调节的影响

用ADP引起兔血小板脱敏,测定血小板上ADP受体的K_D及数目,并与正常血小板上的数据比较。正常血小板的K^D=0.0129nM,受体数=857.69;而脱敏血小扳的K′_D=0.0265nM,受体数=294.78。以上结果说明由于细胞表面受体的内化,使受体亲和力及受体数目减少。

甲胎蛋白对Hela细胞增殖的促进作用

目的 :采用由脐带血血清中提纯的胎蛋白 (Alpha-fetoprotein,AFP)作用于体外培养的Hela细胞。方法 :通过对MTT计数 ,3H -TdR掺入以及细胞周期时相改变等指标的检测。结果 :发现AFP(浓度大于10mg/L)对Hela细胞增殖有明显的促进作用。结论

小鼠阿片肽δ受体多肽片段的单克隆抗体细胞系的建立

本实验选用一段合成的小鼠阿片肽δ受体的多肽片段，通过与牛血清清蛋白连接，免疫小鼠，经细胞融合后，检测出抗该多肽片段抗体，从而建立了抗多肽片段单克隆抗体的细胞系。

甲硫氨酸脑啡肽和抗δ阿片受体抗体对小鼠骨髓瘤细胞信号传递系统的作用

为了探讨阿片肽与细胞表面受体结合后所产生的生物效应及其机制 ,用不同浓度甲硫氨酸脑啡肽 ( MENK)及抗 δ阿片受体单克隆抗体处理小鼠的骨髓瘤细胞 ( NS- 1 ) ,然后测定蛋白激酶A( PKA) ,蛋白激酶 C( PKC)活性及三磷酸肌醇 ( IP3 )含量 .研究结果表明 ,NENK可升高细胞胞浆及胞膜 PKA的活性 ,且这一作用可被抗δ阿片受体抗体所拮抗 .MENK对 PKC影响呈双向反应 ,0 .1 μmol/L MENK可以升高胞浆 PKC活性 ,但却明显降低胞膜 PKC活性 ;在 MENK浓度为 1 0μmol/L时则情况刚好相反 .1 μmol/L的 MENK可明显降低胞浆及胞膜 PKC活性 ,抗体可拮抗这种下调作用 .MENK可降低细胞内 IP3 的含量 ,且这一作用可被抗δ阿片受体抗体所拮抗 .由此可以推论 :MENK在与 δ阿片受体结合后 ,可以经过多种信号传导系统来调节细胞功能 ,从而产生不同的生物效应 .

甲硫氨酸脑啡肽对NIH3T3细胞和人肝癌Bel 7402细胞生长具有抑制作用

目的 :研究甲硫氨酸脑啡肽对体外培养的NIH3T3细胞、人肝癌Bel740 2细胞增殖的影响。方法 :MTT微培养染色法检测不同质量浓度的甲硫氨酸脑啡肽对NIH3T3细胞、人肝癌Bel740 2细胞的作用以及一定质量浓度的纳洛酮、阿片δ受体单克隆抗体、5 氟脲嘧啶对这种作用的影响。结果 :(1) 10mg·L-1至 80mg·L-1的甲硫氨酸脑啡肽对这 2种细胞均有不同的抑制效应 (NIH3T332 %～ 6 6 %与Bel740 2 36 %～ 6 4% ) ;(2 )纳洛酮能阻断甲硫氨酸脑啡肽对细胞抑制效应 ,阿片δ受体单克隆抗体没有这种阻断能力 ;(3) 5 氟脲嘧啶 (10mg·L-1)和甲硫氨酸脑啡肽 (5 0mg·L-1)有协同作用。结论 :甲硫氨酸脑啡肽能抑制细胞增殖。提示NIH3T3细胞和Bel 740 2细胞胞膜上可能存在阿片 ζ受体介导。

固真方对UMR106成骨样细胞蛋白激酶活性的影响

探讨中药固真方对细胞信号转导体系中蛋白激酶活性的影响。结果 :表明经固真方处理的大鼠UMR10 6成骨样细胞的蛋白激酶A、蛋白激酶C以及酪氨酸蛋白激酶活性均有增高 ,分别为对照组的137 5 %、362 4 %及 2 0 2 6% (P <0 0 1或P <0 0 5 )。提示 :固真方可活跃和增进细胞的信号转导 ,这可能是其促细胞增殖的一种机制。

高脂血症家兔血浆及红细胞膜脂类变化的研究

高胆固醇血症家兔血浆胆固醇达600mg/100ml以上后,血浆和红细胞膜胆固醇与磷脂的比值较对照组明显上升。通过~3H-胆固醇交换实验,证明红细胞膜胆固醇与磷脂比的增高是由于血浆胆固醇上升所致,推测高胆固醇血症时,红细胞膜胆固醇与磷脂比的改变会引起红细胞膜流动性等物理性质的改变,从而导致微循环不畅等机体损害。

混合单克隆抗体在固相ELISA双夹心法中的应用研究

在进行固相ELISA双夹心法时,要选择两种配对的单克隆抗体(McAb)殊非易事。本文用不同McAb的混合物与另一种McAb进行配对夹心,获得了较好的效果。实验表明,在心肌肌球蛋白轻链(CM—LC)的固相ELISA双夹心体系中,以抗CM-LCMcAb(1G6)铺底,(2B4及2F6)混合物为后续复盖抗体,最低检出量可低达10ng/mL,其检出率较单独2B4或单独2F6作为后续复盖抗体者高5—10倍。而若反之,以(2B4及2F6)混合物铺底,1G6作为后续复盖抗体,则其最低检出量竟高至200ng/mL,还不如以其中之一铺底为佳。在人绒毛膜促性腺激素(HCG)的检测体系中,用多克隆抗体与单克隆抗体配对的研究中,也获得了类似的实验结果。

腺苷及其衍生物对细胞跨膜信息传递的影响

腺苷可使ROS 17/2.8细胞膜腺苷酸环化酶(AC)活性及膜流动性降低。腺苷与甲状旁腺素(PTH)合用,可显著地降低PTH对AC活性的激活程度,并同时使PTH降低碱性磷酸酶(AKP)活性的程度有所减弱。而当腺苷衍生物木糖腺苷或木糖腺苷8-六氢吡啶与PTH合用时却使AC活性大为增加,表明木糖基团的引入,可使腺苷对ROS 17/2.8细胞跨膜信息传递具有截然相反的作用。

纳洛酮在细胞信号传递系统中对蛋脑啡肽的拮抗作用

目的 :探讨蛋脑啡肽 (MENK)在细胞信号传递系统的作用及其方式。方法 :用蛋脑啡肽及纳洛酮处理小鼠的骨髓瘤细胞 (NS-1 ) ,之后测定蛋白激酶 A(PKA)和蛋白激酶 C(PKC)活性。结果 :表明蛋脑啡肽可以升高 NS-1细胞胞浆 PKA活性 ,却降低胞浆 PKC活性 ,而且这 2种作用均能被不同浓度的纳洛酮所拮抗。结论 :蛋脑啡肽通过传统的阿片受体机理参与了 2条 (c AMP-PKA途径及 DG-PKC途径 )细胞外信号传递系统的信号传递。

用ELISA法测定抗人心肌肌球蛋白轻链(CMLC)单克隆抗体的K_D值

人心肌肌球蛋白由轻链（ｃａｒｄｉａｃｍｙｏｓｉｎｌｉｇｈｔｃｈａｉｎｓ，ＣＭＬＣ）和重链（ｃａｒｄｉａｃｍｙｏｓｉｎｈｅａｖｙｃｈａｉｎｓ，ＣＭＨＣ）组成．当心肌细胞遭到破坏时，ＣＭＬＣ释放入血，可致血中ＣＭＬＣ浓度增高．血中ＣＭＬＣ的测定是一种高度...

受体介导甲胎蛋白促肿瘤细胞增生分子机制

甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)的功能一直是个谜.由于其在胎儿体内含量很高,过去国内外学者多认为AFP的主要生理功能是参与血液的物质运输和免疫调节.但是近期研究发现AFP能抑制细胞凋亡、促进肿瘤细胞增生和具有调节新生细胞生长作用.高浓度AFP伴随胎儿的整个发育过程.人出生后AFP表达量非常低(＜20ng/L),但是当人发生肝癌及一些生殖系统肿瘤时,AFP表达量又大大升高.本项目以人肝癌Bel7402细胞、人子宫颈癌HeLa细胞等为研究对象,从以下几个方面系统地研究甲胎蛋白促肿瘤细胞增生的分子机制.

单克隆抗体与抗血清联合应用建立血清CMLC测定方法的研究

单克隆抗体(McAb)和抗血清各有特点。本文提纯人心肌肌球蛋白轻链(CMLC)并制备其单克隆抗体和抗CMLC兔血清(下称抗血清),试建立测定血清CMLC的酶联免疫(ELISA)方法。通过比较,McAb和抗血清联合应用可提高测定方法的灵敏度和特异性;并对各反应试剂的工作浓度进行确定,建立了McAb(1C_(11)-D_7株)为铺底抗体,抗血清为覆盖抗体,碱性磷酸酶标记的羊抗兔IgG为第三抗体的三抗体酶联免疫夹心测定血清CMLC的方法(MP-ELISA)。血清CMLC最小可测浓度为2.5ng/mL。

调节因子IGFⅡ、TNFα、VRF促细胞增殖与β微管蛋白表达的相关性

细胞增殖必伴有染色体的一分为二及细胞质的增生，β微管蛋白则参与细胞的增殖过程．正性和负性调节因子对β微管蛋白的表达及细胞增殖间的相关性研究显示，不同生理剂量的正性调节因子ＩＧＦⅡ、Ｔ３／Ｔ４处理ＵＭＲ１０６细胞１２ｈ，Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ实验发现它们在促进细胞ＤＮＡ合成的同时，可使β微管蛋白ｍＲＮＡ表达增加，呈剂量依赖关系．而负性调节因子ＴＮＦα则相反地在抑制细胞ＤＮＡ合成的同时，使β微管蛋白ｍＲＮＡ表达降低，也呈剂量依赖关系．Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ实验进一步表明，ＩＧＦⅡ可使β微管蛋白表达增加，而ＴＮＦα使β微管蛋白表达降低．由此可见，β微管蛋白的合成与细胞增殖间存在着一定的相互联系．

中药固真方对细胞跨膜信息传递及与增殖有关基因表达的影响

中药固真方(是还精煎的精选方,由首乌、苁蓉、生地等六味中药组成)是经大量临床和动物实验证明具有补肾益精延缓衰老的方剂。课题以祖国医学“肾主骨”“肾中精气与生长发育衰老有关”和现代生物学关于生长、增殖、衰老的理论为基础,在动物的整体和细胞水平上,在国内外首先从细胞跨膜信息传递及与增殖有关基因表达水平对固真方参与调节的环节进行研究。

STUDIES ON THE SYNTHESES AND BIOLOGICAL ACTIVITIES OF NUCLEOSIDE 3′,5′-CYCLIC PHOSPHOTRIESTERS AND PHOSPHORAMIDATES

Recently there has been considerable attention given to 3’, 5’-cyclic nucleotides for their important biological and biochemical activities. Some analogues of cyclic nucleotides have been used as targets for developing new drugs. A number of papers have appeared which reported the syntheses of analogues and derivatives of 3’, 5’-cyclic nu-