镍致癌机制的研究进展

镍化合物作为一类常见致癌物质,与人们的日常生产和生活密切相关,近年来逐渐引起大家的关注,对其致癌机制的研究也有众多新的进展。该文就此内容进行综述。

围绕两轴进行复杂的旋转刺激后大鼠全脑内Fos的表达(英文)

为了探讨旋转刺激与运动病发生的关系,本研究利用一种复杂的围绕两轴旋转的加速度刺激器刺激大鼠后,观察大鼠全脑内Fos蛋白的表达情况。动物被随机地分成四组,即正常对照组、两轴旋转刺激组、双侧迷路毁损组以及双侧迷路毁损后接受旋转刺激组。采用免疫组织化学染色方法观察全脑不同核团内Fos蛋白的表达情况。结果显示:(1)正常对照组和双侧迷路毁损组大鼠的脑内均未检测到Fos样免疫阳性产物;(2)两轴旋转刺激组的大鼠在给予复杂的围绕两轴旋转的加速度刺激后,在大鼠脑和脑干的多个核团内均可检测到Fos样免疫阳性神经元,其阳性产物主要表达于细胞核。其中在脑干内的前庭复合体的不同亚核(包括前庭内侧核、前庭上核和前庭下核),孤束核、蓝斑核、臂旁内侧核、臂旁外侧核,间脑的室旁核以及边缘系统的杏仁核等内均可观察到密集分布的Fos样免疫阳性神经元;(3)双侧迷路毁损组大鼠在接受复杂的围绕两轴旋转刺激后,在上述相应核团内均难以检测到Fos蛋白的表达。以上研究结果提示两轴旋转刺激可以有效地激活前庭神经元,而大鼠在接受前庭刺激后,脑和脑干的许多核团内大量的神经元可能通过与前庭核复合体发生直接或间接的纤维联系也被激活,这些被激活的神经元可能与运动病发生的复杂机制有关。

刺激延髓背角诱发的小鼠脑干网状结构内向Vmo投射的GABA能神经元突触后反应的电生理学研究

本实验利用谷氨酸脱羧酶67-绿色荧光蛋白(GAD67-GFP)基因敲入小鼠制备离体脑片,结合TMR逆行束路追踪技术,在荧光镜和红外镜头下,利用膜片钳全细胞记录的方法对电刺激延髓背角(即三叉神经脊束核尾侧亚核,Vc)诱发的小鼠小细胞网状结构(PCRt)内GABA能和TMR逆标的运动前神经元的突触后反应及其反应类型、药理学特征进行系统的研究。结果显示:(1)高频刺激(20 Hz)Vc,在PCRt内GFP和TMR双标的运动前神经元上可记录到兴奋性的突触后电流(EP-SCs),波形显示为单突触反应;(2)电压钳记录模式下,α-氨基羟甲基恶唑丙酸受体(AMPA受体)拮抗剂氨基-2-硝基喹啉-2,3-二酮(CNQX)及N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDA受体)阻断剂D,L-2-氨基-5-磷酸基戊酸(AP-5)均可显著降低刺激Vc所诱发的小鼠PCRt内GFP和TMR双标神经元的EPCSs的幅值;(3)电流钳模式下,刺激Vc,在PCRt内GFP和TMR双标的神经元上记录到兴奋性突触后电位,其幅度与刺激强度在一定范围内呈正相关。以上结果提示,小鼠PCRt内向三叉神经运动核(Vmo)发出投射的GABA能运动前神经元可通过其细胞膜上AMPA受体或NMDA受体的介导,对口面部伤害性信息发挥整合和调控作用,以实现对口面部伤害性反射活动的精确调节。

GAD67-GFP基因敲入小鼠三叉上核内向三叉神经运动核投射的GFP阳性神经元表达c-fos的研究

本文综合应用逆行束路追踪(将四甲基罗达明-TMR注入一侧三叉神经运动核)和免疫荧光组织化学三重标记技术,在激光共聚焦显微镜下对谷氨酸脱羧酶67-绿色荧光蛋白(GAD67-GFP)基因敲入小鼠在口周部给予伤害性刺激时,三叉上核(Vsup)内向对侧三叉神经运动核(Vmo)投射的呈GFP阳性的GABA能神经元表达c-fos的情况进行了研究。结果显示:(1)Vsup内可观察到许多GFP阳性神经元,细胞较小;(2)也可观察到许多TMR或c-fos单标神经元较密集地分布于Vsup内,其中c-fos阳性产物只见于神经元的胞核,在胞浆内未见表达;(3)在激光共聚焦显微镜下可进一步观察到部分神经元同时呈GFP/TMR、TMR/c-fos、GFP/c-fos双重标记或GFP/TMR/c-fos三重标记。其中GFP/TMR双标神经元分别占GFP或TMR阳性神经元的17.8%和19.2%;TMR/c-fos双标神经元分别占TMR或c-fos阳性神经元的34.9%和31.3%;GFP/c-fos双标神经元分别占GFP或c-fos阳性神经元的21.2%和20.5%;而GFP/TMR/c-fos三标神经元分别占GFP、TMR或c-fos阳性神经元的11.1%、12%和10.8%。以上结果表明小鼠Vsup内部分GABA能神经元可接受来自同侧的口面部伤害性信息,并对这些信息进行整合后,直接发出投射纤维至Vmo;故Vsup内部分GABA能运动前神经元可能参与口面部伤害性反射局部环路的构成。

丘脑底核脑深部电刺激对帕金森病焦虑状况的影响

目的探讨双侧丘脑底核脑深部电刺激(STN-DBS)对帕金森病人焦虑状况的影响。方法设置双侧STN-DBS组及左旋多巴类药物治疗组,配对入组,每组有效病例各31例。采用汉密尔顿焦虑量表(HAMA)、焦虑状态-特质问卷(STAI)、帕金森病生活质量39问卷(PDQ-39)及统一帕金森病评定量表第Ⅲ部分(UPDRS-Ⅲ)对病人进行评估分析。结果与术前及药物治疗组相比,STN-DBS组术后状态焦虑(S-AI)评分明显降低(均P<0.05)。STN-DBS组UPDRS-Ⅲ评分与S-AI评分在术后4个月内相关(均P<0.05),电压、脉宽与特质焦虑(T-AI)和HAMA评分均相关(均P<0.05);术后电压和脉宽对T-AI和HAMA评分的标准回归方程成立,回归系数均显著(均P<0.05)。结论 STN-DBS在改善帕金森病人运动障碍的同时,在短期内可改善即时焦虑情绪。在治疗范围内,STN-DBS电压和脉宽越高,帕金森病人的特质焦虑情绪和焦虑症状越严重。

MRI立体定向活检术在颅内病变诊断中的应用

目的探讨MRI引导下立体定向活检术在颅内病变诊断中的作用价值。方法自2009年1月至2015年3月应用立体定向系统与手术计划软件对25例颅内病变诊断不明确的患者行MRI定位下立体定向活检术。结果除1例活检阴性外,病理诊断与最后诊断(结合临床和其他检查结果)一致20例,不一致4例;最后诊断与术前MRI诊断相符合8例,不符合9例,影像未诊断6例;切除术后病理与影像相符合1例,无明确关系1例。术后6例病变内少量出血,保守治疗;1例左额叶出血30 ml,行开颅血肿清除+去骨瓣减压术。结论 MRI立体定向活检术对颅内多发、深部病变的诊断具有重要价值,其安全性较高,但仍需进一步避免脑出血的风险。

酒精依赖患者立体定向伏隔核毁损术后1年健康状况及生存质量调查

目的探讨酒精依赖患者立体定向伏隔核毁损术后1年健康状况及生存质量变化。方法 2007年5月至2010年12月立体定向双侧伏隔核毁损术治疗酒精依赖患者33例。术后1年应用简明36项健康状况问卷(SF-36)和WHO生存质量测定量表简表(WHOQOL-BREF)评估患者健康状况及生存质量。结果术后1年患者戒断率为87.9%(29/33)、复饮率为12.1%(4/33);患者生存质量WHOQOL-BREF评分及健康状况SF-36评分较术前显著改善(P<0.05);术后患者主观感受的健康状况评分亦显著改善(P<0.05)。术后2例发生嗅觉障碍,均于6月内恢复;未发生明显的严重影响生活质量的并发症。结论立体定向伏隔核毁损术短期内对酒精依赖患者安全有效,可以作为严重酒精依赖患者在其他方法治疗均无效时的一种选择。

神经性厌食症大鼠伏隔核神经元局部场电位分析

目的观察神经性厌食症大鼠模型伏隔核神经元的电活动并分析其局部场电位。方法实验动物分为运动诱发的厌食症（activity—basedanorexia，ABA）大鼠模型组及对照组（各12只）。ABA模型的建立基础是模型大鼠不受限制的滚轮运动以及限制饮食（1h／d），通过这种限制饮食及过度活动，造成明显的体重下降，从而模拟AN的行为学特征。通过微阵列电极记录大鼠在神经性厌食症病理及正常生理状态下伏隔核神经元的局部场电位。结果电生理记录显示模型组大鼠Nac神经元平均放电频率为（6．89±2．67）Hz，对照组为（3．22±1．23）Hz。模型组大鼠伏隔核神经元放电的峰峰间期散点图在200ms以下有密集分布。模型组伏隔核神经元放电峰峰间期直方图呈逐渐衰减的正偏态分布，对照组伏隔核神经元放电峰峰间期直方图呈对称分布；回归映射分析结果显示病理状态下数据明显较生理状态下集中。功率谱密度分析显示模型组在10-20Hz范围内出现了能量高值成分。结论神经性厌食症模型大鼠伏隔核神经元较生理状态下放电频率明显增加，峰峰间期序列发生明显变化，局部场电位模式发生变化。

单靶点与多靶点联合毁损术治疗阿片类药物成瘾的长期疗效

目的比较伏隔核损毁术与伏隔核加其他靶点联合损毁术治疗阿片类药物成瘾的长期疗效。方法从我国7个医疗中心接受过双侧伏隔核毁损术(单靶点)与双侧伏隔核加其他靶点联合毁损术(多靶点)治疗阿片类药物成瘾的两组病人中分别随机抽取75名病人,术后第5年回顾性随访研究,比较两组的复吸率和副反应发生率。结果单靶点组和多靶点组各有62例和60例病人接受并按计划完成随访。两组间复吸率和非特异性副反应的病人比例差异均无统计学意义(P=0.678,P=0.780)。多靶点组特异性副反应的比例与严重程度均高于单靶点组,差异有统计学意义(P=0.011,P=0.008)。结论与立体定向伏隔核单靶点损毁术相比,伏隔核加其他靶点联合损毁术治疗阿片类药物成瘾的复吸率未降低,但特异性副反应发生率明显增高。

互动型教学在神经外科学教学中的应用体会

试从教师与学生是教学活动的双主体角度出发,阐述互动型教学模式在神经外科医学教学中的应用,并从互动教学的意义、方法、原则三个方面入手,探讨如何较好地实现神经外科学学习中的师生互动。

脑内血管紧张素肽酶活性不对称性与大鼠行为偏侧的相关性

目的探讨海马中血管紧张素肽酶活性与行为偏侧间的相关性。方法海马中的血管紧张素肽酶包括可溶性丙氨酰氨基肽酶/半胱氨酸氨基肽酶(soluble bound alanyl-aminopeptidase/cystinyl-aminopeptidase,SOL-AlaAP/CysAP)和膜性丙氨酰氨基肽酶/半胱氨酸氨基肽酶(membrane bound alanyl-aminopeptidase/cystinyl-aminopeptidase,MEM-AlaAP/CysAP)。根据用爪偏好实验(左爪、双爪、右爪)的结果,选择60只Wistar鼠并分成3组,检测双侧海马区SOL-AlaAP/CysAP和MEM-AlaAP/CysAP的活性。结果左侧海马的SOL-AlaAP/CysAP和MEM-AlaAP/CysAP比右侧海马活性更高(P<0.05)。在用爪偏好实验中,Wistar鼠的偏侧选择行为明显表现出依赖于海马内SOL-AlaAP/CysAP和MEM-AlaAP/CysAP的活性差异。3组大鼠的右利支配率[%R/T=右半球/(右脑半球+左脑半球)×100%]及SOL-AlaAP/CysAP和MEM-AlaAP/CysAP的活性显著不同,用双爪的大鼠R/T最高,用右爪的大鼠次之,用左爪的大鼠最低。个体%R/T与海马区内的SOL-AlaAP/CysAP和MEM-AlaAP/CysAP的活性与用爪偏好的分数成负相关(r=-0.500,P<0.05)。被动逃避行为测试证实了3组Wistar鼠长期记忆存在差异。结论大鼠海马区内的非对称血管紧张肽酶活性可能与行为偏侧的方向和强度都有关。

大鼠三叉神经脊束核内Ⅱ型囊泡膜谷氨酸转运体样阳性终末向外侧臂旁核的投射

新近发现的Ⅰ型(VGLUT1)和Ⅱ型(VGLUT2)囊泡膜谷氨酸转运体已被作为谷氨酸能神经终末的标识物,在中枢神经系统呈互补分布,显示二者可能存在功能差异。以往的研究也已经证实接受口面部浅感觉信息的三叉神经脊束核,特别是尾侧亚核(Vc)向外侧臂旁核(LPB)发出丰富的谷氨酸能投射纤维,但该投射纤维内究竟是哪一型的囊泡膜谷氨酸转运体承担谷氨酸的转运功能,到目前为止尚未见报道。本实验选用SD大鼠,综合运用顺行束路追踪[将霍乱毒素B亚单位-CTb分别注入一侧Vc、三叉神经脊束核极间亚核(Vi)、吻侧亚核(Vo)]和免疫荧光组织化学相结合的三重标记技术,在激光共聚焦显微镜下对Vc、Vi和Vo内向LPB投射纤维内所含的囊泡膜谷氨酸转运体(VGLUTs)的情况进行了研究。结果显示:(1)将CTb分别注入大鼠一侧Vc、Vi或Vo后,在同侧的LPB内可观察到许多CTb顺行标记纤维,其中以来自Vc的标记纤维最多,Vi次之,Vo最少;(2)在LPB内可见部分CTb顺标终末同时表达VGLUT2样免疫阳性,但未见与VGLUT1样阳性终末的共存;(3)可观察到部分CTb/VGLUT2双标终末散在分布于NeuN标记的神经元的胞体周围,并与之形成密切接触。以上结果提示:大鼠口面部浅感觉、特别是伤害性信息从三叉神经脊束核向LPB传递的过程中,谷氨酸发挥着重要作用,负责其内谷氨酸转运功能的主要是VGLUT2。

氟哌啶醇致僵直大鼠皮质高电压纺锤波节律及面部肌电特征

目的研究氟哌啶醇对成年大鼠在自由活动状态下大脑皮质高电压纺锤波(high-voltage spindles,HVSs)及相应面部肌电活动的影响。方法通过在体多通道电生理记录技术结合视频录像,对可自由活动的大鼠进行皮质脑电和面部肌电长程记录,观察氟哌啶醇致僵直大鼠皮质HVSs节律数量及相应面部活动及肌电的变化。结果在清醒静止状态下,正常大鼠自发出现HVSs节律,面部可见触须震颤,经腹腔注射氟哌啶醇1.0mg/kg和3.0mg/kg后,大鼠呈现僵直状态,HVSs节律数量增加,面部抽搐活动增多,波及范围扩大,强度增加,肌电显示节律性活动增多、持续时间延长。结论氟哌啶醇作为多巴胺D2受体拮抗剂可增强HVSs节律及面部抽搐,提示多巴胺D2受体参与HVSs节律的调节。

互动型教学在神经外科教学中的应用经验总结

本文从教学活动的教师与学生双主体角度出发,阐述了互动型教学模式在神经外科医学教学中的应用,并从互动教学的意义、方法、原则三个方面入手,探讨如何较好的实现神经外科学学习中的师生互动。HKZ临海市外国语学校--信爱勤勇。

脑深部电刺激治疗肌张力障碍的疗效分析

目的探讨脑深部电刺激（DBS）丘脑底核（STN）与苍白球内侧部（Gpi）治疗肌张力障碍的疗效。方法采用STN-DBS与Gpi-DBS治疗肌张力障碍患者34例,术后1、3、6、12和24个月采用Burke-Fahn-Marsden（BFM）肌张力障碍量表评估疗效。结果 34例患者均顺利完成DBS,其中4例未获得缓解和1例因术后感染行二次手术取出刺激装置。29例患者二期手术开机后随访1~2年,症状均得到不同程度的改善,其中21例原发性患者疗效较好,术后BFM运动评分及残疾评分均较术前有明显改善（P〈0.05）。继发性患者行DBS术后上述两项评分有所下降,但较术前比较改善不明显。结论 STN-DBS与Gpi-DBS对原发性肌张力障碍患者疗效明显,对继发性患者疗效差。两个靶点刺激均可使肌张力障碍得到不同程度改善,患者STN-DBS比GPi-DBS术后较早期获得改善。

在体大鼠脑部核团的微电极记录偶联行为学康复实验模型方法的建立

目的建立在体大鼠脑部核团的微电极记录及行为学偶联模型。方法将大鼠背部留置管连接固定装置改进后置于大鼠背部皮下,为大鼠的相关脑部核团埋置阵列微丝电极,将神经电生理采集系统与自身给药行为学系统进行信号对接,通过自身给药训练使大鼠成瘾,在大鼠成瘾的不同状态下进行相关脑部核团的电生理信号记录。结果与结论经过改进后的留置管连接固定装置有较好的性能,脱管漏管的现象大幅度降低,自身给药系统与电生理采集系统对接后信号传输稳定,实现了大鼠脑部相关核团在自身给药行为发生过程中的神经电生理信号的同步采集。

囊泡膜谷氨酸转运体与ASIC3或TRPV1在大鼠结状神经节内的共存研究(英文)

为了探讨囊泡膜谷氨酸转运体(VGluTS)与酸敏感离子通道亚基3(ASIC3)或瞬时感受器电位香草酸亚型1(TRPV1)样阳性产物在大鼠迷走神经结状神经节(nodoseganglia,NG)内的分布和共存,本研究采用免疫荧光组织化学双重标记技术,在激光共聚焦显微镜下观察了大鼠NG内VGluT1或VGluT2分别与ASIC3或TRPV1的共存情况。结果显示:(1)在NG内,VGluT2、ASIC3和TRPV1主要见于中、小型神经元的胞浆内,大型神经元少见,而VGluT1阳性神经元数量较少,主要见于大型或中型神经元;(2)部分VGluT2阳性神经元同时显示ASIC3或TRPVl免疫活性,其中VGluT2/ASIC3双标神经元分别占VGluT2阳性神经元的43.06%,占ASIC3阳性神经元的58.74%;而VGluT2/TRPVl双标神经元分别占VGluT2或TRPVl阳性神经元的5617%和51.12%;(3)VGluTI与ASIC3或TRPV1双标神经元的数量很少,不到1%。以上结果提示,VGluT2主要存在于NG内中、小型神经元,这些神经元通常被认为是内脏伤害性信息的初级感受神经元,因而VGluT2分别与ASIC3或TRPVl的共存表明它们可能与内脏伤害性信息的产生和传递密切相关。

科研培训对临床实践能力培养的影响与作用——临床医学专业硕士研究生培养模式探索

目的科研能力与临床实践能力的训练是临床医学专业学位研究生培养过程中同等重要的内容,本研究目的在于研究临床医学专业硕士研究生培养过程中科研培训对其临床实践能力培养的影响与作用。方法收集我院近三届毕业的临床医学专业硕士研究生的学位论文题目与科研成果产出情况,分析不同科研选题类型及科研产出水平对研究生临床实践能力结业考核成绩的影响。结果选题为临床实践总结型研究的研究生,其结业考核成绩高于选题为临床应用型研究的学生,但差异无统计学意义;科研产出水平位于额外产出档的研究生,结业考核成绩显著优于基本产出档和高产出档的学生,高产出档研究生在结业考核操作部分成绩显著低于其他两个档的学生。结论选择与临床实践关系更加密切的科研题目,以及投入适中的时间与精力进行科研训练,有助于促进临床医学专业硕士研究生临床实践能力的培养。

大鼠VGLUT2基因shRNA慢病毒载体的构建和鉴定

目的:构建可以表达针对2型囊泡膜谷氨酸转运体(VGLUT2)shRNA的慢病毒载体,特异性下调中枢神经系统内VGLUT2的表达,从而为研究VGLUT1和VGLUT2的功能差异提供有力的工具。方法:首先在体外合成四对互补并靶向作用于编码大鼠VGLUT2序列四个位点的特异性短发卡RNA(short hairpin RNA)序列和一个阴性对照的寡核苷酸,克隆到pGCSIL-GFP质粒(经Age I和EcoRI双酶切)载体内,经酶切及测序鉴定正确后,将该质粒与辅助质粒pHelper1.0以及pHelper2.0共转染T293细胞,包装得到病毒颗粒。各组病毒载体转染原代培养的大鼠皮层神经元后,运用免疫荧光和Western Blot检测各组蛋白的表达水平。结果:pGCSIL-GFP质粒克隆得到的VGLUT2 shRNA序列正确,包装得到的病毒可以有效转染原代培养的皮层神经元,Western Blot检测结果显示:VGLUT2 shRNA-1与VGLUT2 shRNA-2病毒组的VGLUT2表达水平与空白组相比有显著性差异(P<0.05),分别为空白组的63.9±5.82%,73.8±3.18%;VGLUT2 shRNA-3与VGLUT2 shRNA-4病毒组的VGLUT2表达水平与空白组相比同样有显著性差异(P<0.05),分别为空白组的39.1±1.99%,35.1±1.72%;VGLUT2shRNA-1与VGLUT2 shRNA-2病毒组相比无显著性差异(P>0.05);但VGLUT2 shRNA-3与VGLUT2 shRNA-4病毒组与VGLUT2 shRNA-1和VGLUT2 shRNA-2病毒组相比有显著性差异(P<0.05)。表明VGLUT2 shRNA-3与VGLUT2 shRNA-4组病毒能较为高效的下调培养的皮层神经元VGLUT2的表达,下调效率超过60%。结论:本研究成功构建出表达针对大鼠VGLUT2基因shRNA的慢病毒载体,并可有效下调VGLUT2的表达,为进一步研究VGLUT2的功能及其与VGLUT1之间的功能差异提供了有力的工具。

中型颅脑创伤预后的危险因素分析

目的研究中型颅脑创伤患者不良预后的危险因素。方法收集入住唐都医院神经外科且被确诊为中型颅脑创伤的连续病例448例,回顾性分析患者入院时的临床表现、化验结果及影像检查结果等资料,二分类logistic回归模型对患者资料进行单因素分析和多因素分析,探寻中型颅脑创伤预后相关的危险因素。结果448例病例中预后良好256例(57.14%),预后不良192例(42.86%)。预后不良组病例中高血压病史(23.44%)和阿司匹林服药史(6.25%)的比例更高(P<0.05)。单因素分析结果提示患者年龄、高血压病史、阿司匹林服药史、入院时格拉斯哥昏迷评分、蛛网膜下腔出血(SAH)、颅骨骨折、硬膜外血肿、硬膜外血肿量、硬膜下血肿、硬膜下血肿部位、硬膜下血肿厚度、脑挫裂伤及其部位和体积、双额挫裂伤、Marshall CT分级、简明损伤评分(AIS)、SAH Fisher分级、纤维蛋白降解产物、纤维蛋白原、D二聚体、肌酐、尿素氮的差异在两组间有统计学意义(P<0.05)。多因素分析结果提示既往高血压病史(P=0.031,OR=2.705)、入院时合并SAH(P=0.000,OR=6.914)、额颞叶挫裂伤体积(P=0.010,OR=1.068)、硬膜外血肿量(P=0.039,OR=1.174)、硬膜下血肿厚度(P=0.010,OR=1.269)、Marshall CT分级(P=0.000,OR=3.165)、AIS(P=0.000,OR=1.227)和D二聚体(P=0.027,OR=1.057)是中型颅脑创伤的独立危险因素。结论既往有高血压病史、入院时CT提示合并SAH、额颞叶挫裂伤、硬膜外血肿、硬膜下血肿、Marshall CT分级高、AIS高和D二聚体值高的中型颅脑创伤患者预后不良、病情恶化的可能性大,应及早发现并及时干预。