花椰菜高频再生系统的研究

研究了ＢＡ、ＮＡＡ、ＡｇＮＯ３、子叶龄、培养密度以及Ｋｍ对花椰菜子叶柄再生系统的影响，建立了一个高频再生系统，使再生频率达１００％，其最佳各成分的配比是：ＭＳ＋ＢＡ４．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＡｇＮＯ３５．０～１０．０ｍｇ／Ｌ。

过氧乙酸对豌豆种子萌发和幼苗生长的影响

过氧乙酸对豌豆种子萌发和幼苗生长的影响董五辈唐桂芬兰尊海彭爱娟陈艳（郑州牧业工程高等专科学校·郑州）第一作者简介：董五辈，男，１９６５年２月出生，硕士，教师，主要从事植物生物技术的教学和研究。近几年来，在省级以上刊物发表论文２０余篇，其中数篇获奖。主...

油菜转Bt基因研究

从以下几方面对油菜转Ｂｔ基因植株进行了研究：Ｒ１、Ｒ２代的Ｋｍ抗性，Ｒ０、Ｒ１代的Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，Ｒ０代的抗虫试验以及Ｒ０代的酯酶活力测定。实验结果分别是：经Ｋｍ抗性试验，芥菜型油菜Ｒ１代在１２个无性系中有１０个无性系符合孟德尔单基因分离的遗传规律，Ｒ２代在７个无性系中有６个符合这一规律；分子杂交证明部分油菜植株的基因组中存在Ｂｔ基因的同源顺序，表明Ｂｔ基因已整合进植物基因组；抗虫试验的结果是芥菜型油菜叶片饲喂幼虫１０天后各处理组活虫体重与对照比，有５个无性系存在显著差异，其中最高虫试死亡率是７７．７％，甘蓝型油菜则有９个无性系存在显著性差异，最高死亡率是７０％；

转Bt基因油菜的抗虫试验

利用小菜蛾对转基因油菜的部分植株进行了抗虫试验。实验结果是芥菜型油菜的最高虫试死亡率是７７．７％，其次从高到低依次是５５．５％，５５．５％，４４．４％，４４．４％，３３．３％，１１．１％等。饲喂十天后各处理组活虫体重与对照比，经秩和检验，５个无性系有显著的差异。表明芥菜型转基因油菜有显著的杀虫、抑虫作用。甘兰型油菜的最高虫试死亡率是７０％，其次是４０％，４０％，２０％，２０％，另有４个无性系均是１０％。有９个无性系饲喂十天后活虫体重与对照比有显著的差异。表明甘兰型转化油菜同样也有显著的杀虫、抑虫作用。

过氧乙酸在无土栽培中的应用研究

以豌豆为材料进行了过氧乙酸（ＰＡＡ）在无土栽培中的应用研究。０．０３％ＰＡＡ（ｐＨ５．８）能提高萌发率，促进豌豆幼根、幼芽生长，且长势整齐一致。０．０５％ＰＡＡ（ＰＨ５．１）开始降低萌发率，抑制幼根、幼芽的生长，根部出现轻度受害症状。０．１０％ＰＡＡ以上浓度，对生长的抑制作用依次加强，根部出现严重受害症状。在无土栽培中，可用ＰＡＡ杀菌、调节培养液ｐＨ值、提供活性态氧， 进行无公害、绿色食品的生产。

紫外线对豌豆芽生长的影响

豌豆芽苗菜营养十分丰富,是我国人民历来喜食的一种蔬菜.传统的豌豆芽苗生产是在大田里进行的,这种方法费时费工,生产规模又受到限制.近年来,多采用温室内多层棚架、育苗盘立体栽培的工厂公生产,但这种生产方法存在有严重的杂菌污染,因污染而造成的盘报废率高达25%.为解决这一问题,我们研究了紫外线对豌豆芽生长以及品质的影响.1

nptⅡ基因在芥菜型油菜中的遗传规律

研究了转基因油菜Ｒ０、Ｒ１、Ｒ２代的Ｋｍ抗性。试验结果表明：芥菜型油菜Ｒ０的１，５，６，７，８，１０号无性系可抗Ｋｍ５０ｍｇ／Ｌ，其余的均抗Ｋｍ３５ｍｇ／Ｌ。Ｒ１种子在Ｋｍ２０ｍｇ／Ｌ的生根培养基上进行生根抗性试验，生根与不生根的比例经适合性检验（ｘ２检验）有１０个无性系符合孟德尔单基因分离的遗传规律，只有两个无性系不符合这一规律，出现了较高的抗性苗比例（３４：２；４０：６）。Ｒ２代共做了７个单株的种子抗性试验，其中６个单株的种子出现３：１的分离比，一个单株没有发生分离，种子全部可抗Ｋｍ。

无公害芽菜工厂化生产病害防治的研究

以豌豆为材料进行过氧乙酸(PAA)在无公害芽菜工厂化生产病害防治中的应用研究.0.03%PAA(pH5.8)能提高萌发率,促进豌豆幼根、幼芽生长,且长势整齐一致.0.05%PAA(pH5.1)开始降低萌发率,抑制幼根、幼芽的生长,根部出现轻度受害症状.0.10%PAA以上浓度,对生长的抑制作用依次加强,根部出现严重受害症状.在芽菜工厂化生产中,可用PAA杀菌、调节培养液pH值,提供活性态氧,进行无公害、绿色食品的生产.

转基因油菜的花药培养

本研究通过花药培养技术获得了6个抗Km 20mg/L的单倍体苗,其中花药愈伤组织的最高诱导率是21.6%,最佳激素配比是:Miller+2,4—D 2.0mg/L+KT1.5mg/L+IAA 2.0 mg/L,愈伤组织的苗最高分化率是18.8%,最佳激素配比是:MS+KT2.0mg/L+IAA 0.2mp/L.

花椰菜高频再生系统的研究

本文研究了BA、NAA、AgNO_3、子叶龄、培养密度以及Km对花椰菜子叶再生系统的影响,建立了一个高频再生系统,使再生频率达100%,其最佳各成分的配比是:MS+BA4.5mg/L+NAA0.1mg/L+AgNO_35.0～10.0mg/L.

大蒜简易实用脱毒技术

大蒜是我国传统的日常调味食品,也是出口创汇的好产品,我国年出口总量大约在50～60万吨,我省是大蒜的重要产区.由于大蒜连年使用鳞茎进行无性繁殖,品种退化相当严重,几乎全部感染病毒,表现为植株矮小、条纹花叶、小蒜瓣和独头蒜增多,产量逐年降低.解决这一问题的最好办法是利用组织培养等现代生物技术进行脱毒和新品种选育,如日本培养的巨型大蒜,株高60cm、叶长28cm、叶宽5cm,单株蒜苔重50g,单株蒜头重300～500g.

转基因油菜的遗传学分析

本文从以下几方面对油菜转Bt基因植株进行了研究:R_1、R_2代的Km抗性;R_0、R_1代的Southern杂交;R_0代抗虫试验以及R_0代的酯酶活力测定.实验结果分别是:经Km抗性试验,芥菜型油菜R_1代在12个无性系中有10个无性系符合孟德尔单基因分离的遗传规律,R_2代在7个无性系中有6个符合这一规律;分子杂交证明部分油菜植株的基因组中存在Bt基因的同源顺序,表明Bt基因已整合进植物基因组;抗虫试验的结果是芥菜型油菜叶片饲喂幼虫10d后各处理组活虫体重与对照比,有5个无性系存在显著差异,其中最高虫试死亡率是77.7%,甘蓝型油菜则有9个无性系存在显著性差异,最高死亡率是70%;酯酶活力测定的结果表明外源基因没有影响酯酶活力.

反相离子对色谱法测定油菜籽(饼)中的硫苷

用反相离子对色谱法直接测定油菜籽(饼)中原始硫苷成分,在样品预处理中加入抗氧化剂以防止吲哚类硫苷的氧化分解。研究了主要色谱参数对硫苷组分保留值和选择性的影响,采用烯丙基硫苷或苯甲酸作内标,对硫苷的6种组分进行了定性定量的测定。

Bt基因与植物基因工程

近10多年来,植物基因工程技术的研究在世界范围内迅速发展,在抗虫、抗病毒、抗除草剂、改进作物品质等方面取得了重要进展.植物基因工程技术就是克隆编码一些物有性状的基因,通过一定的转化方法,导入到受体植物细胞,并通过组织培养培育出转基因植物.目前,已获得报告基因或目的基因的转基因植物达60多种,其中包括水稻、玉米、小麦、大豆、棉花等重要作物.迄今已批准转基因植物进入田间试验的国家有美国、比利时、法国、英国、西班牙、加拿大、荷兰、意大利、芬兰、丹麦、德国等.以美国为例,进入田间试验的有47例,包括苏云金杆菌毒蛋白杀虫基因15例,抗除草剂基因15例,植物病毒外壳蛋白基因14例,番茄延熟基因3例.有关Bt和抗除草剂的各占32%.对于我国而言,除草剂使用并不广泛,而抗虫害问题尤为重要.在抗虫植物基因工程研究中应用最多的就是Bt基因.

鸡腿蘑对小鼠骨髓细胞的遗传毒性研究

应用小鼠骨髓细胞姐妹染色单体交换(SCE)及微核试验对鸡腿蘑进行遗传毒理检测。结果表明:用鸡腿蘑浸提液处理过的小鼠,其骨髓细胞微核率及SCE频率与阴性对照组比较差异不显著(P>0.05),而与阳性对照组相比,差异极显著(P<0.01)。这表明,鸡腿蘑无致畸变作用。

转基因植物可用于孟德尔分离定律的验证

本文研究了nptⅡ外源基因在油菜子一代、子二代中的遗传现象.实验结果是nptⅡ基因的遗传符合孟德尔分离定律,从而建立了转基因植物可用于孟德尔分离定律的验证这一新技术.这一新技术具有直观、操作简单等特点.

转基因植物去根筛选法

在做遗传转化时,往往把目的基因与标记基因紧密连锁在一起,共同导入受体植物,在对转基因植物鉴定、筛选时一般进行southern、Northern、Western杂交以及各种相应的酶活分析(如NPTⅡ、CAT等).这些方法均很复杂,随着转基因植物的推广应用,这些复杂的方法很难被普遍采用,而转基因植物的去根筛法尖则简单可行,能被广大用户接受,同时这种方法能检测大量的种子,且易分辨、假阳性少,值得科研、生产部门推广应用.转基因植物去根筛选操作方法(以导入nptⅡ基因的油菜为例):①取饱满种子,流水冲净,95%乙醇浸泡约30秒,0.025%HqCl_2溶液灭菌15min。

Ri质粒转化牛膝及其发状根的培养

用发根农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓ）的Ｒｉ质粒转化药用植物牛膝（ＡｃｈｙｒａｎｔｈｅｓｂｉｄｅｎｔａｔａＢＬ．），诱导出了抗卡那霉素的发状根。将诱导的发状根进行固体平板培养和液体悬浮培养。在附加Ｋｍ３０ｍｇ／Ｌ的ＭＳｏ和１２ＭＳｏ培养基上，发状根生长良好，而未经转化的对照组则死亡，表现出生长激素自主性。在附加外源激素ＩＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ时，能促进发状根的成活、侧根的形成以及提高增殖倍数。表明适量的外源激素能促进发状根的生长。

鸡腿蘑对小鼠骨髓细胞的遗传毒性研究

应用小鼠骨髓细胞姐妹染色单体交换（ＳＣＥ）及微核试验对鸡腿蘑进行遗传毒理检测。结果表明：用鸡腿蘑浸提液处理过的小鼠，其骨髓细胞微核率及ＳＣＥ频率与阴性对照组比较差异不显著（Ｐ＞０．０５），而与阳性对照组相比，差异极显著（Ｐ＜０．０１）。这表明。