长波紫外线对人黑素瘤细胞中视蛋白3的表达及细胞增殖的影响

目的研究长波紫外线对人黑素瘤细胞中视蛋白3(OPN3)的表达及对细胞增殖的影响。方法利用不同剂量的UVA分别照射人黑素瘤细胞系(A375细胞和MV3细胞)后,通过5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)实验及细胞增殖与活性检测试剂(CCK-8)检测照射前后细胞的增殖情况,实时荧光定量(RT-qPCR)分别检测细胞中视蛋白(OPN)的mRNA表达水平;利用慢病毒技术分别沉默和过表达A375细胞和MV3细胞中的OPN3,采用EdU实验及CCK-8方法检测细胞的增殖水平;沉默A375细胞和MV3细胞中OPN3后进行UVA照射,通过EdU及CCK-8方法检测照射前后细胞增殖的变化;采用转录组测序技术检测过表达及沉默OPN3的MV3细胞中差异基因的表达,并进行KEGG富集相关信号通路分析,免疫印迹法(Western blot)验证Hippo信号通路相关蛋白的表达情况。结果与Control组相比,UVA照射组中的细胞增殖能力明显增强(P<0.05);RT-qPCR结果显示,OPN1、OPN2、OPN3、OPN4以及OPN5在A375和MV3细胞中均有表达,其中OPN3的转录表达水平水平均明显高于其他OPN(P<0.05);UVA照射组中A375和MV3细胞OPN3蛋白表达水平明显升高,沉默OPN3的表达后,A375和MV3细胞的增殖能力减弱,过表达OPN3后A375和MV3细胞的增殖能力增强(P<0.05);沉默人黑素瘤细胞(A375细胞和MV3细胞)OPN3后经UVA照射,细胞增殖能力较单纯照射UVA时降低(P<0.05);沉默及过表达MV3细胞中OPN3的表达后,RNA-seq测序结果筛选出141个差异基因,KEGG分析筛选差异基因富集信号通路9条,其中-Log10(FDR)值最高的为Hippo信号通路;沉默OPN3后,检测到LATS1表达水平增加,p-YAP、YAP、RhoA蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论UVA可促进人黑素瘤细胞系(A375细胞和MV3细胞)OPN3的表达,并通过Hippo信号通路调控细胞的增殖过程。

长病程高血压患者早期肾损害多指标检测的意义

目的探讨联合应用尿微量白蛋白(mALB)、血清胱抑素C(CysC)、尿视黄醇结合蛋白(RBP)及尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)对长病程原发性高血压患者早期肾损害的检出效果。方法分别对131例长病程原发性高血压患者及年龄相当的150例健康人群(对照组)测定血清CysC、尿mALB、尿RBP含量及尿NAG活性,计算单独及联合应用后的检出阳性率。结果原发性高血压患者血清CysC、尿mALB、尿RBP含量及尿NAG均比对照组有显著升高(P<0.01),对肾损害的检出率分别为26.0%、26.0%、20.6%及29.8%,多指标联用后的检出率分别为(mALB+NAG)35.1%、(CysC+NAG)37.4%、(mALB+NAG+RBP)41.2%、(NAG+RBP+CysC)40.5%,多指标联用较单指标检出阳性率有显著提高(P<0.05)。相关分析显示,尿mALB与血压呈显著正相关(r=0.431,P<0.05),血清CysC、尿mALB、RBP及NAG均与病程时间长短呈显著正相关(r分别为0.673、0.451、0.575、0.403,P均<0.05)。结论长病程原发性高血压患者应定期监测其肾功能损害程度,适当选择多指标联合检测可有效提高检出率。

两种方法检测3种药物血药浓度比较研究

目的比较高效液相色谱法(HPLC)和酶增强免疫法(EMIT)在检测患者体内抗癫痫药物苯巴比妥(PB)、苯妥英(PHT)及卡马西平(CBZ)血药浓度方面的相关性。方法将检测对象按测定项目、性别、年龄对同一患者的标本同时用HPLC和EMIT进行检测,以HPLC参考方法为准进行配对t检验和相关性分析。结果A(CBZ)组中A1组(所有检测对象)两种方法检测结果相差2.256,差异有统计学意义(P<0.05);A2组(女性)两种方法检测结果相差2.74,差异有统计学意义(P<0.05);A3组(男性)两种方法检测结果相差2.11,差异有统计学意义(P<0.05);A4组(年龄小于20岁)两种方法检测结果相差2.81,差异有统计学意义(P<0.05);A5组(年龄大于或等于20岁)两种方法检测结果相差2.09,差异有统计学意义(P<0.05)。B(PHT)组总标本两种方法检测结果相差12.05,差异有统计学意义(P<0.05)。C(PB)组总标本两种方法检测结果相差7.77,差异有统计学意义(P<0.05)。结论EMIT与HPLC参考方法差异有统计学意义,二者具有较好的相关性。

PDMS三维软件在火电厂中暖通专业通风系统中的应用

随着全球经济的繁荣,发电市场的发展,各大发电公司对工程投资成本核算越来越精准,这就要求设计院从工程设计源头开始,做出更加精确细致的设计成品;另外,设计院还要节省劳动支出,不断压缩设计成本,提高劳动效率,更好完成业主的要求。这就引入了PDMS三维设计软件,而三维设计相对于二维设计,最大的优势就在于设计人员能够直观的看到风道的走向,以及与其他各专业的相对位置,能够非常方便及时的检查错误,避免误工;另外,三维设计软件能将设备的尺寸、布置位置等信息都存放在数据库中,也能将风系统中各种零部件、设备保存在数据库里,在使用时直接调用即可,这样大大节省设计时间,给设计人更多时间用于系统的布置以及与其他专业配合。

外来民工子弟与本地儿童自我意识发展调查与差异分析

外来民工子弟的人格发展作为社会转型期出现的新的研究课题,已受到社会的普遍关注.采用Piers-Harris儿童自我意识量表对219名初一学生进行现场调查,其中外来民工子弟106名,本地学生113名.结果表明,外来民工子弟自我意识量表的各分量表与总分得分均低于本地儿童,且具有非常显著性差异;在温成员的母亲文化、职业,父亲文化、职业,这几个因素对外来民工子弟的自我意识发展有较显著影响.

腮腺区毛母质细胞瘤1例

毛母质细胞瘤为皮肤少见的良性肿瘤。本文结合我科一例毛母质细胞瘤的临床病例做总结分析,对毛母质细胞瘤的临床表现、诊断、鉴别诊断、治疗提出建议。

宽带砂光机的设计和发展

第一部分 宽带砂光机的设计 我们将从木材砂削工艺方面简单地概述宽带砂光机的构成及设计的基本思想。1 宽带砂光机设计的总体原则 （1）应考虑木材砂削工艺方面的多种因素,以适合于不同工件加工的工艺灵活性和对工件厚度公差的高度适应性,保证较高的加工精度和稳定的加工质量。 （2）操作方便舒适,易于维护、修理和调整。

误诊为皮炎的早期瘤型麻风1例

1病历摘要患者女,24岁。贵州省毕节市人。因"面部、双上肢皮疹,伴双前臂皮肤感觉轻度减退1年"于2018年3月5日就诊于我科门诊。患者1年前无明显诱因面部及双上肢出现散在分布的粟米大淡红色丘疹,伴双前臂皮肤感觉轻度减退,无疼痛和瘙痒等不适。

35424例患者术前梅毒筛查的方法比较

目的:分析医院现行梅毒术前筛查方法可能存在的假阳性及漏检。方法:应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和快速血浆反应素试验(RPR)对武汉协和医院35 424例术前筛查人群的血清进行检测。对结果无法确定的样本以梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)为确证实验。结果:3 5424例血清中有4例RPR假阳性,有2例ELISA检测梅毒螺旋体抗体(TPAb)漏检,但是这2例血清RPR都呈现阳性反应。结论:RPR和ELISA检测TPAb具有相辅的意义,同时做这两项实验会有效减少梅毒的漏检率。

视蛋白3调控人真皮成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白生成

目的研究视蛋白3在正常人真皮成纤维细胞中对Ⅰ型胶原蛋白生成的影响及其可能的机制。方法取小儿包皮真皮成纤维细胞分离、培养、传代,至3~5代,用荧光定量PCR、蛋白免疫印迹分别检测视蛋白1~5的表达,细胞免疫荧光检测视蛋白3及Ⅰ型胶原蛋白表达及定位。设计针对人视蛋白3的小干扰RNA,利用脂质体转染入正常人真皮成纤维细胞,分别用荧光定量PCR、蛋白免疫印迹检验视蛋白3抑制效率。成功下调视蛋白3后,用荧光定量PCR、免疫印迹法、酶联免疫吸附测定及细胞免疫荧光检测Ⅰ型胶原蛋白表达变化;通过CCK-8及EDU检测细胞增殖活力,流式细胞仪检测细胞周期,Transwell检测细胞迁移能力;通过蛋白免疫印迹法检测PI3K、AKT及磷酸化蛋白p-PI3K、p-AKT的表达情况。最后抑制通道蛋白AKT的磷酸化,通过蛋白免疫印迹法检测Ⅰ型胶原蛋白表达变化。结果视蛋白1~5均在正常人真皮成纤维细胞中表达,其中视蛋白3基因及蛋白表达水平较其他视蛋白表达高,差异有统计学意义(P<0.05)。下调正常人真皮成纤维细胞中视蛋白3后,细胞合成及分泌Ⅰ型胶原蛋白水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);细胞增殖、迁移能力减弱,差异有统计学意义(P<0.05);细胞周期中S期比例明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);磷酸化蛋白p-PI3K、p-AKT的蛋白表达水平被明显抑制;抑制通路蛋白AKT的活化后,细胞合成Ⅰ型胶原蛋白水平降低。结论视蛋白3参与调控正常人真皮成纤维细胞中Ⅰ型胶原蛋白的合成,可能是创伤愈合、纤维化相关疾病及医疗美容潜在的治疗靶点。

视蛋白3通过VEGFR-2调节人皮肤微血管内皮细胞的血管生成

目的探讨视蛋白在人皮肤微血管内皮细胞中的表达,及其对皮肤微血管内皮细胞的增殖、迁移及小管形成的影响。方法通过实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别验证视蛋白的基因表达水平和蛋白表达水平。然后使用小干扰RNA技术沉默视蛋白3,分别用实时荧光定量PCR和蛋白印迹法验证视蛋白3的沉默效率。小干扰RNA成功沉默视蛋白3后,通过CCK-8法检测细胞的增殖活力,Transwell检测细胞的迁移能力,小管形成实验评估血管形成能力的情况。最后通过蛋白印迹法检测信号通路相关蛋白的表达情况。结果视蛋白1~5均在血管内皮细胞中表达,其中视蛋白3基因表达水平较其他视蛋白表达高,差异有统计学意义(P<0.05);沉默人皮肤微血管内皮细胞中视蛋白3后,细胞的增殖、迁移、小管形成能力均减弱,差异有统计学意义(P<0.05),血管生成的关键蛋白血管内皮生长因子受体2、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B、细胞外调节蛋白激酶1/2、内皮型一氧化氮合酶的表达均降低。结论视蛋白3在人皮肤微血管内皮细胞中高表达,并调控血管形成,可能成为血管生成相关疾病的一个潜在治疗靶点。