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金振口服液治疗支气管哮喘的药效作用和分子机制
1
作者
董佳裕
刘鑫
+10 位作者
苏真真
邢薇薇
徐欣玉
徐利
杨钰冰
李美瑶
张新庄
曹亮
王振中
武子寅
肖伟
《药物评价研究》
CAS
北大核心
2024年第7期1486-1501,共16页
目的建立小鼠支气管哮喘模型和人非小细胞肺癌细胞(A549)炎症模型,研究金振口服液(Jinzhen Oral Liquid,JZOL)对支气管哮喘的药效作用和分子机制。方法将66只雌性BALB/c小鼠随机分为对照组和模型组,模型组小鼠采用卵清蛋白(OVA)致敏法...
目的建立小鼠支气管哮喘模型和人非小细胞肺癌细胞(A549)炎症模型,研究金振口服液(Jinzhen Oral Liquid,JZOL)对支气管哮喘的药效作用和分子机制。方法将66只雌性BALB/c小鼠随机分为对照组和模型组,模型组小鼠采用卵清蛋白(OVA)致敏法建立哮喘模型后,将其分为模型组和JZOL高、中、低剂量(4.4、2.2、1.1 mg·kg^(-1))组和地塞米松组(Dex,2 mg·kg^(-1))。全身体积描记系统测定小鼠气道反应Penh值。HE染色观察小鼠肺组织病理学情况。瑞氏-姬姆萨染色检测肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞数量。ELISA检测BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和血清中免疫球蛋白E(IgE)和免疫球蛋白G1(IgG1)浓度。采用20 ng·mL^(-1)白细胞介素(IL)-1β诱导A549细胞24 h建立细胞炎症模型,随机分为对照组、模型组以及4个质量浓度JZOL(5.39、2.69、1.35、0.67 mg·mL^(-1))处理组。MTS法测定JZOL对A549细胞的药物毒性。采用RNA-seq技术对6个实验组进行转录组学分析,筛选差异基因,对其进行GSEA通路富集分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析和基因本体(GO)注释通路富集分析,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)实验对筛选出的关键基因进行实验验证。结果体内实验表明,JZOL能够改善小鼠肺组织炎性细胞浸润,降低小鼠气道高反应性Penh值,减少BALF中巨噬细胞、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞的数量,降低BALF中TNF-α和血清中IgE和IgG1的浓度。体外实验表明,JZOL对A549细胞的最大无毒浓度为5.39 mg·mL^(-1)。基因富集分析结果显示,与对照组相比,模型组共获得46条炎症模型相关通路,而JZOL不同浓度处理组对这些通路的逆转比例分别为34.8%(5.39 mg·mL^(-1))、50%(2.69 mg·mL^(-1))、32.6%(1.35 mg·mL^(-1))和26%(0.67 mg·mL^(-1))。差异表达基因(DEG)的KEGG富集分析显示,与对照组相比,模型组共富集到58条通路;与模型组相比,JZOL处理组共富集到32条通路,逆转了IL-17、TNF、核苷酸寡聚化结构域(NOD)样受体信号通路等。对IL-17信号通路中趋化因子配体1(CXCL1)、趋化因子配体2(CXCL2)、脂质运载蛋白2(LCN2)进行qRT-PCR验证,与转录组测序结果一致。结论JZOL对由OVA诱导的小鼠支气管哮喘模型具有显著的治疗功效,能有效缓解哮喘小鼠的气道高反应性并抑制肺部组织的炎症反应。其抗炎效果是通过调节CXCL1、CXCL2和LCN2这几个关键基因的表达,进而影响IL-17信号通路来实现的。
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关键词
金振口服液
支气管哮喘
气道炎症
气道高反应性
A549细胞
转录组测序
QRT-PCR
原文传递
题名
金振口服液治疗支气管哮喘的药效作用和分子机制
1
作者
董佳裕
刘鑫
苏真真
邢薇薇
徐欣玉
徐利
杨钰冰
李美瑶
张新庄
曹亮
王振中
武子寅
肖伟
机构
南京中医药大学中药制药过程控制与智能制造技术全国重点实验室
江苏康缘药业股份有限公司
出处
《药物评价研究》
CAS
北大核心
2024年第7期1486-1501,共16页
基金
国家中医药管理局-“岐黄学者”中医药领军人才项目
江苏省工业和信息产业转型升级专项-多组分中药关键技术研究。
文摘
目的建立小鼠支气管哮喘模型和人非小细胞肺癌细胞(A549)炎症模型,研究金振口服液(Jinzhen Oral Liquid,JZOL)对支气管哮喘的药效作用和分子机制。方法将66只雌性BALB/c小鼠随机分为对照组和模型组,模型组小鼠采用卵清蛋白(OVA)致敏法建立哮喘模型后,将其分为模型组和JZOL高、中、低剂量(4.4、2.2、1.1 mg·kg^(-1))组和地塞米松组(Dex,2 mg·kg^(-1))。全身体积描记系统测定小鼠气道反应Penh值。HE染色观察小鼠肺组织病理学情况。瑞氏-姬姆萨染色检测肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞数量。ELISA检测BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和血清中免疫球蛋白E(IgE)和免疫球蛋白G1(IgG1)浓度。采用20 ng·mL^(-1)白细胞介素(IL)-1β诱导A549细胞24 h建立细胞炎症模型,随机分为对照组、模型组以及4个质量浓度JZOL(5.39、2.69、1.35、0.67 mg·mL^(-1))处理组。MTS法测定JZOL对A549细胞的药物毒性。采用RNA-seq技术对6个实验组进行转录组学分析,筛选差异基因,对其进行GSEA通路富集分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析和基因本体(GO)注释通路富集分析,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)实验对筛选出的关键基因进行实验验证。结果体内实验表明,JZOL能够改善小鼠肺组织炎性细胞浸润,降低小鼠气道高反应性Penh值,减少BALF中巨噬细胞、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞的数量,降低BALF中TNF-α和血清中IgE和IgG1的浓度。体外实验表明,JZOL对A549细胞的最大无毒浓度为5.39 mg·mL^(-1)。基因富集分析结果显示,与对照组相比,模型组共获得46条炎症模型相关通路,而JZOL不同浓度处理组对这些通路的逆转比例分别为34.8%(5.39 mg·mL^(-1))、50%(2.69 mg·mL^(-1))、32.6%(1.35 mg·mL^(-1))和26%(0.67 mg·mL^(-1))。差异表达基因(DEG)的KEGG富集分析显示,与对照组相比,模型组共富集到58条通路;与模型组相比,JZOL处理组共富集到32条通路,逆转了IL-17、TNF、核苷酸寡聚化结构域(NOD)样受体信号通路等。对IL-17信号通路中趋化因子配体1(CXCL1)、趋化因子配体2(CXCL2)、脂质运载蛋白2(LCN2)进行qRT-PCR验证,与转录组测序结果一致。结论JZOL对由OVA诱导的小鼠支气管哮喘模型具有显著的治疗功效,能有效缓解哮喘小鼠的气道高反应性并抑制肺部组织的炎症反应。其抗炎效果是通过调节CXCL1、CXCL2和LCN2这几个关键基因的表达,进而影响IL-17信号通路来实现的。
关键词
金振口服液
支气管哮喘
气道炎症
气道高反应性
A549细胞
转录组测序
QRT-PCR
Keywords
Jinzhen Oral Liquid
bronchial asthma
airway inflammation
airway hyperresponsiveness
A549 cells
transcriptome sequencing
qRT-PCR
分类号
R965 [医药卫生—药理学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
金振口服液治疗支气管哮喘的药效作用和分子机制
董佳裕
刘鑫
苏真真
邢薇薇
徐欣玉
徐利
杨钰冰
李美瑶
张新庄
曹亮
王振中
武子寅
肖伟
《药物评价研究》
CAS
北大核心
2024
0
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