利用绿色荧光蛋白优化辣椒遗传转化体系

【目的】农杆菌介导的辣椒遗传转化较为困难,至今仍未建立高效转化体系。绿色荧光蛋白(GFP)基因是植物遗传转化中常用的报告基因,以GFP为报告基因,优化农杆菌介导的辣椒遗传转化体系。【方法】利用GFP表达系统,统计3个辣椒品种(‘HP’‘8214’和‘L55’)中3种不同外植体(子叶、下胚轴和Flamingo-bill外植体)的不定芽分化率、不定根分化率与荧光阳性率,探究农杆菌侵染浓度、侵染时间、预培养时间和共培养时间等因素对不定芽、不定根分化率及荧光阳性率的影响。【结果】3个辣椒品种的Flamingo-bill外植体不定芽分化率均显著高于下胚轴与子叶外植体,其中‘L55’Flamingo-bill外植体的不定芽分化率最高、达77.59%,故选用‘L55’Flamingo-bill外植体进行后续研究。4种农杆菌不同侵染浓度和时间组合下,‘L55’Flamingo-bill外植体均可产生不定芽、不定根及表达GFP的愈伤组织,当农杆菌侵染浓度为OD_(600)=0.05,侵染时间为30 min时,不定芽分化率和荧光阳性率最高,分别达48.39%、4.84%。在6种不同预培养与共培养时间组合处理下,Flamingo-bill外植体也均产生不定芽和不定根,预培养1 d、共培养1~2 d处理下的不定芽分化率和荧光阳性率最高,分别达48.44%、12.50%。最后对表达GFP荧光的不定根与愈伤组织进行PCR检测,结果显示GFP、Kan和Cas9基因在荧光阳性的组织中均被检测到,表明农杆菌介导的T-DNA插入成功且转化稳定。【结论】辣椒的外植体类型、农杆菌侵染浓度、侵染时间、预培养和共培养时间均对辣椒遗传转化效率有影响。以GFP为报告基因,筛选合适的转化条件可提高农杆菌介导的辣椒遗传转化效率。

芸苔素内酯对树番茄幼苗生长及养分吸收的影响

【目的】探究芸苔素内酯对树番茄幼苗生长及养分吸收的影响。【方法】以树番茄幼苗为材料,采用盆栽试验,研究了喷施不同浓度(0.0、0.5、1.0、1.5、2.0 mg/L)芸苔素内酯对树番茄幼苗生物量、光合色素含量、抗氧化酶活性及养分含量的影响。【结果】芸苔素内酯提高了树番茄幼苗各器官的生物量;随着芸苔素内酯浓度的升高,树番茄幼苗根系、茎杆和叶片生物量均出现先增加后降低的趋势,并在芸苔素内酯浓度为1.5 mg/L时达到最大值,分别较对照增加了112.92%、65.14%和55.57%。芸苔素内酯提高了树番茄幼苗光合色素(叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素)含量、过氧化氢酶活性和超氧化物歧化酶活性,同时降低了过氧化物酶活性。芸苔素内酯在一定程度上提高了树番茄幼苗各器官的氮、磷和钾含量,且随着芸苔素内酯浓度的升高,树番茄幼苗各器官的氮、磷和钾含量出现先升高后降低趋势,并在芸苔素内酯浓度为1.5 mg/L时达到最大值。【结论】芸苔素内酯能够促进树番茄幼苗的生长和养分吸收,且浓度为1.5 mg/L时效果最佳。

以队伍建设为重点提升小学班主任育德能力的实践探索

班主任是学校德育工作的主力军,加强班主任队伍建设是做好学校德育工作的关键。上海市静安区临汾路小学在构建全员、全程、全方位育人体系的基础上,着力加强班主任队伍建设,进行一系列实践探索:以“德育论坛”为栽体,探索有效育人方法;聚焦青年班主任队伍建设,以榜样引领为抓手,激活青年班主任自主成长的活力;以活动育人为路径,凸显班主任的建班育人特色和管理水平。