醒脾胶囊调控血管活性肠肽干预功能性腹泻脾虚证大鼠机制研究

目的探讨醒脾胶囊通过血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)修复肠道屏障且调节RhoA/ROCK2信号通路抑制肠道运动亢进,缓解功能性腹泻(functional diarrhea,FDr)脾虚证的作用机制。方法将50只SPF级大鼠按照随机数字表均分成正常组,模型组,洛哌丁胺组和醒脾胶囊高、低剂量组。采用高浓度番泻叶水煎剂连续灌胃14 d制备脾虚型FDr膜型。依据临床脾虚泄泻诊断标准,动态采集并量化排便情况、体质量、饮食量、疲劳程度、皮毛情况等大鼠宏观体征;28 d测定小肠推进率并取结肠组织和腹主动脉血;采用酶联免疫吸附试验测定血清和结肠组织中VIP含量,通过检测苏木精-伊红(HE)染色法和蛋白质印迹法评价结肠屏障完整性、肠道运动及相关通路蛋白的表达情况。结果与正常组相比,14 d后,模型组大鼠便多稀溏,体质量增长减缓,喜眯眼蜷卧,毛枯少泽,食少乏力,量化后各项指标评分及总分显著升高(P<0.01),小肠推进率明显上升(P<0.01),血清和结肠组织中VIP含量升高(P<0.01)。HE染色提示模型组结肠黏膜层不完整,可见明显充血、水肿,结肠紧密连接蛋白Occludin和Claudin-5表达下调(P<0.01),结肠收缩蛋白RhoA和ROCK2表达均上调(P<0.01,P<0.05)。与模型组相比,各治疗组大鼠腹泻及其伴随症状和结肠组织切片的病理表现有不同程度缓解;其中,高剂量的醒脾胶囊可有效缓解腹泻并促进结肠黏膜结构恢复整齐致密同时有效减轻充血水肿,显著上调Occludin和Claudin-5表达(P<0.01),降低血清和结肠组织中VIP含量(P<0.01),显著减缓小肠推进率(P<0.01),明显下调结肠组织收缩蛋白RhoA和ROCK2表达(P<0.01)。结论醒脾胶囊可有效缓解大鼠脾虚症状并改善腹泻,调控VIP从上调肠屏障紧密连接与抑制肠道过亢运动两个方面达到缓解脾虚型FDr的功效。

男性勃起功能障碍机制及中医药防治进展

勃起功能障碍(erectile dysfunction,ED)是男性常见病,属于中医学“阳痿”范畴,临床以肾阳虚证多见,由内外各种病理因素导致。雄激素睾酮(testosterone,T)水平低下是ED最重要的病因之一,其生成主要受睾丸间质细胞(leydig cell,LC)内氧化应激反应与内皮素-1(endothelin-1,ET-1)水平的调控;而涉及阴茎海绵体平滑肌(penis cavernosum smooth muscle,PCSM)舒张和收缩的信号通路是诱发ED的核心机制。中医常用具有温补肾阳作用的中药治疗ED,部分中药能通过雄激素合成及PCSM舒张与收缩信号通路进行调控,从分子生物学机制的多个环节发挥作用。本文对男性ED机制及中医药防治进展进行综述,为治疗ED提供思路与方法。

保元汤调控AT1/P38 MAPK/TGF-β途径改善心肌纤维化防治心力衰竭的机制研究

目的:探讨保元汤对心肌梗死(MI)后心力衰竭(HF)大鼠心肌纤维化(MF)的影响及其机制。方法:体内实验通过利用左冠状动脉前降支结扎术制备MI后HF动物模型,利用超声、血生化、病理切片染色和WesternBlot等技术进行相应指标的检测。在机制研究中,体外实验采用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激构建H9C2大鼠心肌细胞损伤模型,给予400、600、800μg/mL保元汤提取物冻干粉以及AngⅡ1型受体(AT1)抑制剂RNH6270进行干预,利用Western Blot技术检测相关蛋白的表达情况。结果:与模型组比较,保元汤可以显著提高HF大鼠的左室短轴缩短率(FS)、射血分数(EF)(P<0.05),同时抑制左心室内径(LVID)的扩张;此外,可以有效降低循环中ANP、BNP以及AngⅡ的含量(P<0.01);病理结果显示,保元汤可以能够有效抑制MF程度以及心肌组织中AngⅡ的生成(P<0.05);Western Blot结果显示保元汤可以下调缺血心肌组织中血管紧张素转化酶(ACE)1以及AT1的表达;同时下调AT1受体下游的磷酸化-P38丝裂原活化蛋白激酶(P38 MAPK)、转化生长因子β(TGF-β)、Smad3的表达以及上调ACE2的表达;细胞实验结果显示保元汤可以抑制AngⅡ诱导的心肌细胞中AT1以及其下游P38 MAPK的激活,同时下调TGF-β以及Smad3蛋白的表达。结论:保元汤能有效抑制MI后大鼠缺血区域的纤维化程度,减缓HF进程,其机制与保元汤调控AT1/P38 MAPK/TGF-β途径相关。