阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者血液流变学观察

目的观察阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者的血液流变学情况。方法选择OSAHS患者65例(OSAHS组)和健康查体者50例(对照组),行睡眠监测测定睡眠呼吸暂停低通气指数(AHI)、夜间最低SaO2,采用血流变仪检测血液流变学指标。结果与OSAHS组轻中度患者和对照组比较,OSAHS组重度(病程≥3a)患者全血黏度、血浆黏度、全血还原黏度、红细胞压积均升高,夜间最低SaO2降低,P均<0.05;而OSAHS组轻中度患者和对照组比较,P均>0.05。AHI与血流变水平呈正相关(r s=0.384,P<0.05),夜间最低SaO2与血流变水平呈负相关(r s=-0.282,P<0.05)。结论 AHI、夜间最低SaO2和病程对OSAHS患者血液流变学指标均有明显影响,观察血液流变学指标对OSAHS患者的病情发展和疗效观察具有一定价值。

OSAHS患者正压通气治疗后促红细胞生成素及血液流变学的变化

目的观察中重度阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者经无创正压通气(NPPV)治疗后血清促红细胞生成素(EPO)及血液流变学水平变化。方法选择40例诊断为中重度OSAHS患者(OSAHS组)和40例健康查体者(对照组),OSAHS组行NPPV治疗3个月,分别检测治疗前及治疗后1、3个月时血清EPO血常规、血液流变学指标,监测睡眠呼吸暂停低通气指数(AHI)、夜间平均最低血氧饱和度(LSaO2),对照组于相同时间点也进行上述指标检测。结果 OSAHS组与对照组各时间点血清EPO、血常规、血液流变学各指标、AHI、LSaO2经重复测量设计的方差分析组间、时间之间及组间与时间交互作用均有统计学意义;OSAHS组各指标均随治疗时间延长逐渐改善,对照组各指标均在正常范围。结论 OSAHS患者经NPPV治疗可以明显改善缺氧程度,降低血清EPO水平及血液黏度对于防治OSAHS及其并发症有重要临床意义。

无创正压通气对中重度OSAHS患者血清促红细胞生成素水平的影响

目的观察中重度阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者应用无创正压通气(NPPV)治疗后血清促红细胞生成素(EPO)水平变化。方法选择38例中重度OSAHS患者(OSAHS组)及50例健康查体者(对照组),OSAHS组行NPPV治疗1个月;检测对照组及OSAHS组治疗前后血清EPO、血常规,监测睡眠呼吸暂停低通气指数(AHI)、夜间平均最低血氧饱和度(LSaO2)。结果 OSAHS组治疗后血清EPO及红细胞计数(RBC)、血红蛋白(Hb)、红细胞比积(HCT)、平均红细胞蛋白含量(MCH)、平均红细胞体积(MCV)、AHI较治疗前降低(P均<0.05),而LSaO2升高(P<0.05);治疗后AHI、LSaO2与对照组比较,P均<0.05;其余指标与对照组比较,P均>0.05。OSAHS组血清EPO与Hb、RBC呈正相关(r s=0.971、0.628,P均<0.01),AHI与血清EPO呈正相关(r s=0.835,P<0.01),夜间LSaO2与血清EPO呈负相关(r s=-0.629,P<0.01)。结论 NPPV治疗可明显降低中重度OSAHS患者血清EPO水平,从而改善AHI、LSaO2、血液黏稠度。

干扰LOX基因对喉鳞癌Hep-2细胞增殖、侵袭及放疗敏感性的影响

目的探讨抑制赖氨酰氧化酶(LOX)基因表达对喉鳞癌Hep-2细胞增殖、侵袭及放疗敏感性的影响。方法将Hep-2细胞分为空白对照组(正常培养对照)、阴性对照组(转染试剂对照)、转染组(转染LOX siRNA),用Real-time PCR法、Western blot法分别检测各组细胞LOX、增殖细胞核抗原(Ki-67、PCNA)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9 mRNA和蛋白表达水平;MTT法检测不同剂量X射线(0、3、6、9、12、15、18 Gy)照射对Hep-2细胞生存率的影响,流式细胞术(FCM)检测Hep-2细胞凋亡情况。结果转染LOX siRNA后转染组Hep-2细胞中的LOX、Ki-67、PCNA、MMP-2、MMP-9 mRNA及蛋白表达明显低于阴性对照组和空白对照组。用剂量为12、15、18 Gy X射线照射Hep-2细胞后24 h,可明显抑制细胞生存率(P<0.05),并呈剂量依赖性。转染组联合放疗组的细胞凋亡指数明显高于空白对照组、阴性对照组及放疗组(%:79.11±1.26 vs 5.01±1.02、4.95±1.12、43.21±2.12,P<0.05)。结论转染LOXsiRNA可下调Hep-2细胞LOX表达,抑制细胞增殖,并且可增强放疗敏感性,作用机制可能与Hep-2细胞中Ki-67、PCNA、MMP-2、MMP-9表达下调有关。

HIF-1α与LOX、PINCH蛋白在人喉鳞状细胞癌中的表达

目的检测缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible transcription factor-1α,HIF-1α)、赖氨酰氧化酶(lysyloxidase,LOX)和PINCH(particularyinteresting new cysteine-histidine rich protein)蛋白在人喉鳞状细胞癌(简称鳞癌)中的表达,探讨三者在喉鳞癌发生发展、转移及预后的意义。方法采用免疫组织化学方法检测38例喉鳞癌组织中HIF-1α、LOX及PINCH的表达情况,并分析其表达的相关性。结果①HIF-1α、LOX和PINCH在喉鳞癌组织中表达显著高于癌旁黏膜组织;②HIF-1α和PINCH在淋巴结转移组与无转移组表达阳性率分别为100.0%、100.0%和67.7%、70.8%,统计学差异具有显著性意义;LOX在淋巴结转移组与无转移组表达,无显著性差异;③HIF-1α、LOX、PINCH的表达与患者的年龄、性别、原发部位、T分级及临床分期等临床病理因素无关;④HIF-1α在喉鳞癌中的表达与PINCH、LOX的表达存在相关性。结论 LOX、PINCH在人喉鳞癌中的表达存在相关性,可作为喉癌治疗的一个新靶点。HIF-1α的高表达可能是造成LOX、PINCH表达变化的重要影响因素之一。

LOX与VEGF蛋白在人喉鳞癌中的表达及其相关性研究

目的检测赖氨酰氧化酶(LOX)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白在人喉鳞癌中的表达,探讨其对喉鳞癌转移及预后的影响及意义。方法采用免疫组织化学方法检测14例有淋巴结转移的喉鳞癌及24例未见淋巴结转移的原位癌组织中LOX及VEGF的表达情况,并分析其表达的相关性。结果①LOX、VEGF在喉鳞癌组织中表达显著高于癌旁正常组织(P均<0.05)。②VEGF在淋巴结转移组与无转移组表达阳性率分别为100%和71%,具有显著性差异(P<0.05);LOX在淋巴结转移组与无转移组表达无显著性差异(P>0.05)。③LOX、VEGF的表达与患者的年龄、性别、临床分型及临床分期等临床病理因素无关。④LOX与VEGF在人喉鳞癌组织中表达呈正相关。结论 LOX与VEGF存在正相关性,可作为喉癌治疗的一个新靶点。VEGF的高表达可能是造成LOX表达变化的重要影响因素之一。

低氧对人喉鳞癌Hep-2细胞凋亡的影响及其机制探讨

目的观察低氧对人喉鳞癌Hep-2细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法将体外培养的人喉鳞癌细胞分为常氧组、低氧组。流式细胞仪检测细胞凋亡率,RT-PCR及Western blot法分别检测各组细胞低氧诱导因子α(HIF-1α)、赖氨酰氧化酶(LOX)mRNA及蛋白。结果常氧组细胞凋亡率13.86%±0.12%、低氧组5.13%±0.67%,P<0.05。与常氧组比较,低氧组细胞中HIF-1α、LOX蛋白及其mRNA表达增加(P均<0.05),且二者表达呈正相关(r均为0.862,P均<0.05)。结论低氧可抑制Hep-2细胞凋亡,该作用可能与其上调细胞中HIF-1α、LOX表达有关。

良性阵发性位置性眩晕患者血清VDBP、25(OH)D水平变化及意义

目的 探讨良性阵发性位置性眩晕(BPPV)患者血清维生素D结合蛋白(VDBP)、25羟维生素D[25(OH) D]水平变化及意义。方法 选取241例BPPV患者为BPPV组,根据眩晕障碍量表(DHI)分为轻微障碍组(n=109)、中等障碍组(n=76)、重度障碍组(n=56),另选取74例健康体检者为对照组。采用ELISA法检测血清VDBP、25(OH) D水平,Pearson/Spearman相关系数分析BPPV患者VDBP、25(OH) D水平和DHI评分的相关性,多元Logistic回归分析BPPV患者复发影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清VDBP、25(OH) D水平对BPPV患者复发的预测价值。结果 与对照组比较,BPPV组VDBP、25(OH) D水平降低(P <0.05)。轻微、中等、重度障碍组血清VDBP、25(OH) D水平依次降低(P均<0.05)。BPPV患者VDBP与25(OH) D水平呈正相关(r=0.728,P <0.001),二者与DHI评分呈负相关(rs分别为-0.811、-0.806,P均<0.001)。高血压(OR=2. 810)、糖尿病(OR=1. 044)、DHI评分(OR=3. 093)为BPPV患者复发独立危险因素,VDBP(OR=0.989 3)、25(OH) D(OR=0.832)为独立保护因素(P均<0.05)。VDBP、25(OH) D、VDBP+25(OH) D预测BPPV患者复发的曲线下面积为0.789、0.779、0.886,灵敏度为81. 03%、82. 76%、77. 59%,特异度为64. 48%、64. 48%、81. 42%。VDBP+25(OH) D预测BPPV患者复发的曲线下面积大于VDBP、25(OH) D单独预测(P均<0.05)。结论 BPPV患者血清VDBP、25(OH) D水平降低,与头晕或平衡障碍严重程度密切相关,为BPPV复发独立保护因素;检测血清VDBP、25(OH) D水平有助于BPPV复发预测。

沉默赖氨酰氧化酶基因对喉癌Hep-2细胞凋亡及化疗敏感性的影响

目的探讨沉默赖氨酰氧化酶(LOX)基因表达对喉鳞癌Hep-2细胞凋亡及化疗敏感性的影响。方法将LOX siRNA转染至Hep-2细胞,免疫细胞化学及免疫印迹(Western blot)检测喉鳞癌Hep-2细胞中LOX蛋白表达情况,实时聚合酶反应(RT-PCR)检测LOX mRNA;MTT法检测不同浓度顺铂对Hep-2细胞生长抑制率的影响;流式细胞术(FCM)检测Hep-2细胞凋亡。结果转染LOX siRNA后Hep-2细胞中LOX蛋白和mRNA表达水平下调(P<0.05);用浓度为2、3、4 mg/L顺铂作用Hep-2细胞后,可明显抑制细胞生长(P<0.05)。转染组细胞联合顺铂作用后细胞凋亡指数及生长抑制率显著高于阴性对照组、空白对照组、顺铂组及转染组(均P<0.05)。结论特异性抑制LOX表达可诱导Hep-2细胞凋亡,并增强喉鳞癌Hep-2细胞对顺铂的敏感性。

鼻咽部渗液苯胺蓝染色技术对鼻咽癌筛查和诊断价值的临床评价

目的了解鼻咽部渗液《苯胺蓝染色技术》检测肿瘤细胞原血红素a/b/c的有效性,以对其在筛查和诊断鼻咽癌中的价值进行评价。方法该研究选取2014年5月—2016年5月就诊于河北医科大学第一医院的342例患者,根据患者情况分为对照组和实验组,对照组有异常非癌症患者270例,观察组经病理学诊断为鼻咽癌患者72例。对病理学诊断为鼻咽癌和检查鼻咽部正常或虽有异常但非癌性病变病例,以病理学诊断为金标准,进行对照研究。结果鼻咽部渗液《苯胺蓝染色技术》检测肿瘤细胞原血红素a/b/c诊断界值合理,具有很高的灵敏度和特异度。阳性诊断符合率为94.4%。结论鼻咽部渗液《苯胺蓝染色技术》检测肿瘤细胞原血红素a/b/c在筛查和诊断鼻咽癌方面有极高的实用价值。

HIF-1α与LOX在人喉鳞癌中表达的相关性研究

目的检测缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)在人喉鳞癌中的表达,探讨其对喉鳞癌转移及预后的影响及意义。方法采用免疫组织化学方法检测喉鳞癌患者鳞癌组织及癌旁正常组织中HIF-1α及LOX的表达情况,并分析其表达的相关性。结果 (1)HIF-1α、LOX在人喉鳞癌组织中表达阳性率分别为78.9%、84.2%,在癌旁正常组织中表达阳性率分别为10.0%、10.0%,差异显著(P<0.01);(2)HIF-1α在淋巴结转移组与无转移组表达阳性率为100.0%、66.7%,差异显著(P<0.05);LOX在有无淋巴结转移的表达,无显著差异(P>0.05);(3)HIF-1α表达随病理分级逐渐增强(P<0.05),LOX表达随病理分级逐渐减弱(P<0.05);(4)HIF-1α、LOX的表达与患者的年龄、性别、临床分型及临床分期等临床病理因素无关;(5)HIF-1α与LOX在人喉鳞癌组织中表达呈正相关。结论在人喉鳞癌中HIF-1α与LOX的表达正相关。HIF-1α的高表达可能是造成LOX表达变化的重要影响因素之一。

不同类型位置性眩晕的诊断及耳石复位治疗

目的探讨不同类型位置性眩晕(benign paroxysmal positional vertigo,BPPV)的诊断方法和半规管耳石复位法对BPPV的治疗效果及存在的问题。方法从2005年1月～2007年12月对疑似BPPV患者行变位性眼震试验,并对确诊为BPPV的96例患者行耳石复位治疗。结果所有BPPV患者经1～2次耳石复位治疗,症状完全消失者84例(87.5%);眩晕消失但遗有与体位变换无关的头昏、头重脚轻感者12例(12.5%),其中10例头部症状于1周内消失,2例于2周内消失。结论不同类型BPPV在诊断方式上存在差异,耳石复位治疗BPPV安全有效,应作为首选。

RNA干扰TRAP1表达抑制CD133^+CD44^+喉癌干细胞生长并促进凋亡

背景:肿瘤坏死因子受体相关蛋白1(TRAP1)是线粒体特异性热休克蛋白90家族的同源基因。大量研究表明其过量表达与多种癌症的发生密切相关。但其在喉鳞癌发生中的作用及作用机制目前还不清楚。目的:探讨RNA干扰能否靶向抑制TRAP1过表达以及对人喉癌干细胞增殖和凋亡的作用效果。方法:采用免疫磁珠技术从人喉癌Hep-2细胞系中分选出CD133^+CD44^+喉癌干细胞。设计及合成TRAP1的sh RNA序列,Lipofectamine^(TM) 2000转染CD133^+CD44^+喉癌干细胞。CCK-8增殖实验、集落形成实验、流式细胞术检测干扰TRAP1基因表达对CD133^+CD44^+喉癌干细胞增殖和凋亡的影响,采用分光光度法检测细胞内caspase-3,caspase-8,caspase-9活性。结果与结论:(1)TRAP1 sh RNA转染的CD133^+CD44^+喉癌干细胞内TRAP1基因和蛋白表达明显下调(P<0.01);(2)与空白对照组和转染空质粒阴性对照组比较,TRAP1表达下调抑制了CD133^+CD44^+喉癌干细胞增殖和集落形成能力(P<0.05);(3)与空白对照组和转染空质粒阴性对照组比较,TRAP1表达下调增加CD133^+CD44^+喉癌干细胞凋亡率(P<0.05);(4)TRAP1 sh RNA介导细胞凋亡与caspase-3,caspase-8和caspase-9激活有关;(5)结果提示RNA干扰TRAP1表达可抑制CD133^+CD44^+喉癌干细胞生长并促进细胞凋亡。TRAP1可能为喉鳞癌治疗的基因靶点。

痰热清注射液对阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征大鼠外周血T淋巴细胞亚群的影响

目的:探讨痰热清注射液对阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)大鼠外周血T淋巴细胞亚群功能的影响,并阐明其作用机制。方法:50只雄性SD大鼠随机分为对照组,模型组,低、中和高剂量痰热清注射液组,每组10只。模型组和低、中及高剂量痰热清注射液组大鼠循环给予氮气和氧气(舱内最低氧浓度达6%~8%,维持40 s,然后恢复至21%,维持80 s,每天8 h),采用间歇性低氧方法建立OSAHS大鼠模型。低、中和高剂量痰热清注射液组大鼠分别静脉注射给予0.9、1.8和3.6 mL·kg^-1痰热清注射液,对照组和模型组大鼠灌胃给予等体积生理盐水。连续给药14 d后,测定各组大鼠脾脏指数和胸腺指数,MTT法检测各组大鼠脾脏T淋巴细胞增殖活性,流式细胞术检测各组大鼠外周血中不同T淋巴细胞亚群百分率,ELASA法检测各组大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平。结果:与对照组比较,模型组大鼠脾脏指数、胸腺指数、脾脏T淋巴细胞增殖活性及外周血中CD4^+T淋巴细胞百分率和CD4^+/CD8^+T淋巴细胞比值明显降低(P<0.05),外周血中CD8^+T淋巴细胞百分率及血清中TNF-α和IL-6水平明显升高(P<0.05)。与模型组比较,低、中和高剂量痰热清注射液组大鼠脾脏指数、胸腺指数、脾脏T淋巴细胞增殖活性、脾脏CD4^+T淋巴细胞百分率和CD4^+/CD8^+T淋巴细胞比值明显升高(P<0.05),外周血中CD8^+T淋巴细胞百分率及血清中TNF-α和IL-6水平明显降低(P<0.05)。与低剂量痰热清注射液组比较,高剂量痰热清注射液组大鼠T淋巴细胞增殖活性明显升高(P<0.05),中和高剂量痰热清注射液组大鼠血清中TNF-α和IL-6水平明显降低(P<0.05)。结论:痰热清注射液可通过调节T淋巴细胞亚群平衡,降低机体炎症反应,对OSAHS大鼠起保护作用。

低氧条件下人参皂苷Rg3对人喉鳞癌细胞分泌性VEGF的影响

目的探讨低氧条件下人参皂苷Rg3对人喉鳞癌Hep-2细胞分泌性血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法实验于2017年1月1—31日于河北医科大学第一医院耳鼻喉实验室进行。体外低氧培养人喉鳞癌Hep-2细胞及人血管内皮细胞,将Hep-2细胞分为Ⅰ组(对照组)、Ⅱ组(Rg3组)、Ⅲ组(顺铂组);人血管内皮细胞分为Ia组(Rg3组)、Ib组(顺铂组)、Ⅱ组(Rg3上清组)、Ⅲ组(顺铂上清组);相应条件下培养上述细胞48 h后用于实验。取Ⅱ、Ⅲ组Hep-2细胞上清液分别作用于相应组人血管内皮细胞。免疫组织化学检测Hep-2细胞内低氧诱导因子1α(HIF)、VEGF蛋白的表达,ELISA检测Hep-2细胞上清中HIF、VEGF的表达量。Mtt法检测各组人血管内皮细胞的生长抑制率。结果VEGF表达可见于细胞浆及细胞核,其中Ⅰ组VEGF(+++)的表达量高于Ⅱ组(++)及Ⅲ组(++)(χ~2=4.275,P=0.039)。Ⅰ组Hep-2细胞上清液中VEGF的量明显高于Ⅱ、Ⅲ组(F=15.627,P=0.023);3组间HIF-1α比较差异无统计学意义(F=3.258,P=0.361);Ⅱ组内皮细胞抑制率(13.24±0.73)明显高于Ⅲ组(8.56±0.25)(t=11.843,P=0.001),Ia组(18.67±1.27)和Ib组(19.12±0.35)比较差异无统计学意义(t=0.745,P=0.229)。结论低氧条件下人参皂苷Rg3抑制人喉鳞癌新生血管生成的作用强于传统化疗药物顺铂,其作用至少是通过以下两方面实现的:(1)抑制Hep-2细胞内VEGF蛋白的表达;(2)降低分泌性VEGF促内皮细胞增殖作用。

鼻内镜下腺样体肥大吸切术与刮除术疗效比较

腺样体肥大是儿童阻塞性呼吸暂停综合征的主要原因,常并发渗出性中耳炎、慢性鼻-鼻窦炎和扁桃体炎。对儿童的生长发育有明显的影响[1]。手术切除是治疗腺样体肥大的主要方法。近年来,腺样体吸切术在逐渐的推广。如何更好的发挥吸切术的优势,合理的使用鼻内镜,提高手术治疗的效果,防止和减少手术并发症一直是关注的重点。

模拟内镜技术在诊断儿童阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的价值

目的针对儿童阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）诊断中存在的问题,对模拟内镜技术在检查和诊断中的作用和价值进行观察和评估。方法选择2006年7月至2010年12月OSAHS患儿38例,其中男性20例,女性18例;年龄6~7岁,平均年龄6.44岁。采用模拟内镜技术对患儿行鼻咽部检查,合并分泌性中耳炎的为Ⅰ组（n=18）,无合并中耳炎的为Ⅱ组（n=20）。观察腺样体的最突出部位的厚度、鼻咽腔前后径、腺样体厚度/鼻咽腔前后径（A/N）比值及腺样体外侧沟的深度。结果Ⅰ组和Ⅱ组儿童腺样体厚度分别为（16.21±1.74）mm、（15.75±1.44）mm;鼻咽腔前后径分别为（19.52±1.37）mm和（19.36±1.27）mm;A/N比值分别为0.85±0.06和0.83±0.05;差异均无统计学意义（P〉0.01）。腺样体外侧沟的深度分别是（1.69±0.52）mm、（2.90±0.68）mm,Ⅰ组腺样体外侧沟的深度明显浅于Ⅱ组（P〈0.01）。结论腺样体肥大合并分泌性中耳炎与腺样体的形态有关;模拟内镜技术不但可以测量腺样体厚度,还可以测量和评估腺样体的形态。对诊断儿童OSAHS有重要的价值,是值得临床推广的方法。

人参皂苷Rg3对原代人喉鳞癌细胞SIX1、TGF-β、VEGF-C表达的影响

目的:探讨人参皂苷Rg3对原代培养人喉鳞癌细胞中SIX1、TGF-β、VEGF-C表达的影响。方法:培养原代人喉鳞癌细胞,待细胞稳定传代后将其分为3组:A组(正常对照组)、B组(顺铂对照组)、C组(Rg3处理组)。Westernblot及细胞爬片免疫荧光检测各组细胞SIX1、TGF-β及VEGF-C蛋白的表达。RT-PCR检测各组细胞SIX1、TGF-β及VEGF-C mRNA的表达。结果:正常对照组细胞SIX1、TGF-β及VEGF-C蛋白及其mRNA表达均呈现强阳性。同正常对照组相比,顺铂对照组及Rg3处理组细胞TGF-β表达无明显变化,SIX1及VEGF-C蛋白及其mRNA表达下调,差异有统计学意义;同顺铂对照组相比,Rg3处理组细胞TGF-β表达无明显变化,SIX1及VEGF-C蛋白及mRNA表达出现了明显下调,差异有统计学意义。结论:Rg3能够通过降低人喉鳞癌细胞SIX1表达下调VEGF-C蛋白表达,进一步抑制喉鳞癌淋巴转移。同时提示,Rg3有比顺铂更强的抑制喉鳞癌淋巴转移的作用。

SIX1和TGF-β对原代人喉鳞癌细胞上皮—间质转化的影响

目的探讨原代培养的人喉鳞癌细胞中SIX1和转化生长因子-β(TGF-β)共同作用对上皮—间质转化(EMT)的影响及相关机制。方法收集2016年1月—2018年1月于河北医科大学第一医院耳鼻咽喉科行喉鳞癌手术患者21例,均留存切除组织,并对其进行人喉鳞癌原代细胞培养,制备SIX1、TGF-β及SIX1+TGF-β靶向siRNA,并转染至原代人喉鳞癌细胞,成功转染后分5组,即未转染组、空转组、SIX1转染组、TGF-β转染组及SIX1+TGF-β转染组。应用免疫组化荧光法及蛋白印记Western-blot法检测细胞中SIX1、TGF-β及上皮标志物E-cadherin的蛋白表达。PCR方法检测各组细胞中SIX1、TGF-β及E-cadherin mRNA表达。结果与未转染组比较,空转组细胞中SIX1、TGF-β、E-cadherin mRNA及蛋白表达比较差异均无统计学意义(P>0.05),SIX1转染组、TGF-β转染组及SIX1+TGF-β转染组E-cadherin蛋白及mRNA表达均上调,差异均有统计学意义(F/P=6.846/0.006、13.396/0.000、9.673/0.000)。SIX1转染组、TGF-β转染组及SIX1+TGF-β转染组3组比较,E-cadherin mRNA及其蛋白表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论人喉鳞癌细胞上皮—间质转化呈SIX1及TGF-β依赖性。SIX1和TGF-β共同作用可能是人喉鳞癌细胞上皮—间质转化的关键;SIX1和TGF-β是人喉鳞癌细胞转移潜能的重要标志。