建筑企业的质量成本核算体系初探

本文首先探讨了质量成本的概念及构成，随后在研究建筑企业自身特点的基础上，提出了适合建筑企业实际运作的质量成本核算的方法，并提出了一些合理的建议。

分布式远程无线巡回测温系统的研究

为提升对不同地点温度变化情况的监测水平 ,可采用多个温度传感器进行分布式布置 ,并采用无线巡回通信技术实现对多个测温点的遥测遥控。有鉴于此 ,本文构建了一种远程分布式无线巡回测温系统 ,并采用一台个人PC机充当系统主控中心 ,通过基站对多个从站进行分布式无线巡回测温及其控制 ,控制关系简单 ,测温效果良好。

自噬介导铁死亡在苯诱导大鼠血液毒性中的作用

目的探讨自噬介导铁死亡在苯诱导的大鼠血液毒性中的作用。方法将80只Wistar雄性大鼠随机分为4组,对照组、染苯组(BZ)、染苯+铁死亡抑制剂组(BZ+Fer-1)和染苯+自噬抑制剂组(BZ+3MA),每组20只。BZ组按照注射体积200μl/100 g于大鼠皮下注射苯油混合物,染毒浓度为800 mg/kg;对照组注射等量玉米油;抑制剂组按照400μl/100 g给药量进行大鼠腹腔注射,抑制剂浓度为10 mg/kg,每周注射3次,连续给药4周。分别于第7、14、21、28天观察大鼠体质量变化;眼内眦静脉取血检测各组大鼠血常规。以异氟烷麻醉大鼠脱臼处死后心脏取血并分离血清,检测大鼠血清中丙二醛(MDA)和亚铁离子(Fe^(2+))水平变化;分离一侧股骨,采用HE染色法观察各组大鼠股骨病理组织学变化,收集股骨骨髓单个核细胞(BMMNCs);蛋白免疫印迹(Western blot)法检测股骨骨髓细胞转铁蛋白受体(TFRC)、长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、铁蛋白重链(FTH1)和自噬相关蛋白(p62、LC3Ⅱ/Ⅰ)等相关蛋白的表达水平。结果与对照组相比,BZ组21 d后大鼠体质量显著下降(P<0.05);14 d后外周血WBC、21 d后RBC和Hb显著下降(P<0.05)。股骨病理检测结果显示,BZ组大鼠股骨骨髓造血细胞减少,脂肪细胞增多;血清MDA、Fe^(2+)水平及BMMNCs中TFRC、ACSL4、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达水平较对照组显著增高(P<0.05),GPX4、p62、FTH1蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与BZ组大鼠相比,BZ+Fer-1组和BZ+3MA组大鼠体质量和血WBC计数显著增加,外周血RBC和Hb水平明显增加,且显著高于对照组(P<0.05);MDA、Fe^(2+)含量以及TFRC、ACSL4、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达水平显著降低(P<0.05),GPX4、FTH1、p62蛋白表达水平显著增高(P<0.05)。结论苯可诱导大鼠造血机能障碍,自噬介导的铁死亡在苯诱导大鼠血液毒性发生中具有重要作用。

线粒体分裂对甲苯二异氰酸酯诱导人支气管上皮细胞NLRP3炎性小体活化的影响

目的探讨线粒体过度分裂对甲苯二异氰酸酯(TDI)诱导人支气管上皮细胞(HBECs)NLRP3炎性小体激活的影响。方法(1)制备TDI-人血清白蛋白(HSA)偶联物,分别采用Gutmann法和BCA蛋白定量法测定偶联物中TDI和HSA的水平。(2)以不同浓度TDI-HSA(0.00、40.00、80.00和120.00 mg/L)处理HBECs 12 h,采用荧光探针法检测细胞中活性氧(ROS)水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液中白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的水平,蛋白质印迹法(Western blot)检测NLRP3炎性小体相关蛋白(ASC、NLRP3、Caspase-1)的表达水平以及线粒体分裂蛋白DRP1、融合相关蛋白MFN2和OPA1的表达水平。(3)采用线粒体分裂抑制剂Mdivi-1(10μmol/L)预处理HBECs 2 h后,再用TDI-HSA(120.00 mg/L)处理12 h,检测细胞中ROS及IL-18、IL-1β的水平,测定NLRP3炎性小体相关蛋白ASC、NLRP3、Caspase-1,线粒体分裂蛋白DRP1及融合相关蛋白MFN2、OPA1的表达水平。结果(1)合成的TDI-HSA偶联物中TDI和HSA质量浓度分别为22.80、2120.00μg/L,摩尔比为4.19。(2)与对照组相比,随着TDI-HSA染毒剂量的增加,HBECs细胞中ROS和IL-18、IL-1β水平明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,TDI-HSA 80.00、120.00 mg/L剂量染毒组NLRP3炎性小体相关蛋白ASC、NLRP3、Cleaved Caspase-1的表达水平增加(P<0.05);线粒体分裂蛋白DRP1表达水平增加,融合相关蛋白MFN2、OPA1表达降低(P<0.05)。(3)与TDI-HSA 120.00 mg/L染毒组相比,TDI-HSA+Mdivi-1组HBECs细胞中ROS和IL-18、IL-1β水平明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);NLRP3炎性小体相关蛋白ASC、NLRP3、Cleaved Caspase-1的表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);线粒体分裂蛋白DRP1表达明显降低,融合相关蛋白MFN2、OPA1表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TDI可以剂量依赖性方式促进HBECs线粒体过度分裂及融合抑制,促进NLRP3炎性小体活化。采用线粒体分裂抑制剂Mdivi-1处理HBECs后,可显著抑制NLRP3炎性小体的活化,表明TDI诱导的线粒体过度分裂是NLRP3炎性小体活化的重要原因。

N⁃乙酰半胱氨酸对甲苯二异氰酸酯诱导人支气管上皮细胞自噬激活作用的影响

目的探讨N⁃乙酰半胱氨酸(NAC)对于甲苯二异氰酸酯(TDI)诱导人支气管上皮细胞(HBECs)自噬激活的影响。方法(1)制备TDI⁃人血清白蛋白(HSA)偶联物,分别采用Gutmann法和BCA蛋白定量法测定偶联物中TDI和HSA的水平。(2)以不同浓度TDI⁃HSA(0、40.00、80.00和120.00 mg/L)处理HBECs 12 h,采用活细胞成像技术检测细胞中活性氧(ROS)水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液中IL⁃4和IL⁃6的水平,蛋白质印迹法(Western blot)检测自噬相关蛋白腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化AMPK(p⁃AMPK)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化mTOR(p⁃mTOR)、酵母自噬相关基因6(Beclin1)、微管相关蛋白1A/1B⁃轻链3(LC3)和泛素结合蛋白p62的表达水平。(3)采用NAC(5 mmol/L)预处理HBECs 4 h后,再用TDI⁃HSA(120.00 mg/L)染毒12 h,检测细胞中ROS及IL⁃4、IL⁃6的水平,测定自噬相关蛋白AMPK、p⁃AMPK、mTOR、p⁃mTOR、Beclin1、LC3、p62的表达水平。结果(1)合成的TDI⁃HSA偶联物中TDI和HSA质量浓度分别为21.90 mg/L、1955.00 mg/L,摩尔比为4.41。(2)随着TDI⁃HSA染毒剂量的增加,HBECs细胞中ROS和IL⁃4、IL⁃6水平明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。TDI⁃HSA中(80.00 mg/L)、高(120.00 mg/L)剂量染毒组自噬相关蛋白p⁃AMPK/AMPK比值、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值和Beclin1表达明显增加,p⁃mTOR/mTOR比值和p62表达明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)与TDI⁃HSA高剂量染毒组相比,TDI⁃HSA+NAC组HBECs细胞中ROS和IL⁃4、IL⁃6水平明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);自噬相关蛋白p⁃AMPK/AMPK比值、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值和Beclin1表达明显降低,p⁃mTOR/mTOR比值和p62表达明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论通过抑制TDI⁃HSA诱导的HBECs中ROS水平,可显著抑制HBECs自噬激活,并降低细胞上清液中IL⁃4、IL⁃6的水平。

共济失调毛细血管扩张突变基因对氢醌诱导人外周血淋巴细胞DNA损伤及S期阻滞的影响

目的 探讨共济失调毛细血管扩张突变基因(ataxia telangiectasia-mutated gene, ATM)对氢醌(hydroquinone, HQ)诱导人外周血淋巴细胞(JHP)DNA损伤及细胞周期S期阻滞的影响。方法 以不同浓度的HQ(0、1、5、10μmol/L)处理JHP 12 h后,采用流式细胞术检测细胞周期分布情况,活细胞成像技术检测活性氧(reactive oxygen species, ROS)释放水平,Western blot法检测DNA损伤标志蛋白γ-H2AX、抗氧化相关蛋白Nrf2、HO-1、NQO1以及细胞周期相关蛋白CyclinA、CDK2、CyclinE的表达;利用ATM化学抑制剂KU-60019预处理JHP 1 h,以10μmol/L HQ处理12 h后观察上述指标的变化。结果(1)与0μmol/L HQ组相比,随着HQ浓度的增加,ROS释放水平逐渐升高,ATM、γ-H2AX及抗氧化相关蛋白Nrf2、HO-1、NQO1表达水平呈剂量依赖性增加,CDK2蛋白表达呈剂量依赖性降低(P<0.05);10μmol/L HQ组S期细胞比例显著增加,CyclinA表达水平显著降低,与0μmol/L HQ组相比差异有统计学意义(P<0.05)。(2)与HQ组相比,HQ+KU-60019组ROS的释放水平显著升高,S期阻滞减轻(P<0.05);HQ+KU-60019组γ-H2AX、Nrf2、HO-1、NQO1和CDK2蛋白的表达均显著升高(P<0.05)。结论 HQ可诱导JHP的ROS释放,促进ATM蛋白、DNA损伤标志蛋白γ-H2AX以及抗氧化相关蛋白表达升高,诱导细胞发生S期阻滞;ATM表达抑制后,ROS释放增多,γ-H2AX以及抗氧化相关蛋白表达进一步升高,S期阻滞减轻。