乳化异氟醚后处理对糖尿病大鼠心肌缺血-再灌注损伤的影响

目的 观察乳化异氟醚后处理对糖尿病大鼠心肌缺血-再灌注(IR)损伤的影响,并探讨可能的分子机制。方法 选择SPF级雄性SD大鼠45只,2月龄,体重240~260 g。采用随机数字表法分成五组:假手术组(S组,n=5)、心肌IR损伤组(IR组,n=10)、糖尿病+心肌IR损伤组(DM组,n=10)、糖尿病+心肌IR损伤+乳化异氟醚后处理组(EI组,n=10)和糖尿病+心肌IR损伤+钙/钙调蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)抑制剂(KN93)组(KN93组,n=10)。S组仅开胸穿线但不结扎左冠状动脉前降支(LAD);IR组穿线稳定后30 min阻断LAD,缺血45 min,再灌注2 h建立IR损伤模型;DM组接受腹腔注射2%链脲佐菌素溶液建立糖尿病模型,4周后建立心肌IR损伤模型;EI组建立糖尿病心肌IR损伤模型时,于再灌注前3 min微量输液泵给药8%乳化异氟醚2 mg/kg,持续8 min;KN93组建立糖尿病心肌IR损伤模型时,于缺血前30 min左心室心内局部注射KN93 5μg并平衡30 min。于再灌注2 h后,采用TTC染色法测定心肌梗死面积百分比,ELISA法测定血清CK-MB浓度,比色法测定血清LDH、MDA和SOD浓度,Western bolt法检测CaMKⅡ、p-CaMKⅡ、信号转导和转录催化因子-3(STAT3)及p-STAT3蛋白含量,并计算p-CaMKⅡ/CaMKⅡ及p-STAT3/STAT3。结果 与S组比较,IR组、DM组、EI组和KN93组血清CK-MB、MDA浓度明显升高(P<0.05),IR组和DM组血清SOD浓度明显降低(P<0.05),IR组、DM组和EI组血清LDH浓度和p-CaMKⅡ/CaMKⅡ明显升高(P<0.05),IR组、EI组和KN93组p-STAT3/STAT3明显升高(P<0.05)。与IR组比较,DM组心肌梗死面积百分比、血清CK-MB、LDH、MDA浓度和p-CaMKⅡ/CaMKⅡ明显升高(P<0.05),血清SOD浓度和p-STAT3/STAT3明显降低(P<0.05);EI组和KN93组心肌梗死面积百分比和血清CK-MB、LDH、MDA浓度明显降低(P<0.05),p-STAT3/STAT3明显升高(P<0.05);KN93组血清SOD浓度明显升高(P<0.05),p-CaMKⅡ/CaMKⅡ明显降低(P<0.05)。与DM组比较,EI组和KN93组心肌梗死面积百分比、血清CK-MB、LDH、MDA浓度和p-CaMKⅡ/CaMKⅡ明显降低(P<0.05),SOD浓度和p-STAT3/STAT3明显升高(P<0.05)。结论 乳化异氟醚后处理可减轻糖尿病大鼠心肌缺血-再灌注损伤,其机制与抑制CaMKⅡ蛋白的磷酸化有关。