嗜热毁丝霉果胶酯酶MtCE12-1的克隆表达及其酶学性质和应用研究

【目的】挖潜新型果胶酯酶的酶资源,在嗜热毁丝霉(Myceliophthora thermophila)中高水平表达烟草生物质诱导显著上调的同源果胶酯酶,对其进行酶学性质研究,并探究该果胶酯酶在协同降解烟草生物质过程中的作用。【方法】利用RTqPCR的方法分析嗜热毁丝霉在烟草生物质中果胶酯酶MtCE12-1的表达水平,通过2A肽介导的表达筛选系统,在嗜热毁丝霉菌株ATCC 42462中高表达果胶酯酶基因Mtce12-1,对高活性的阳性转化子进行产酶培养和蛋白纯化,表征了果胶酯酶MtCE12-1的酶学性质;以两种烟草生物质烟草压棒和烟草梗丝为底物,通过检测纤维素的剩余含量,分析了与纤维素酶的协同作用效果。【结果】与葡萄糖培养条件相比较,烟草生物质条件下果胶酯酶基因Mtce12-1的转录水平显著上调109-110倍,SDS-PAGE电泳分析、拷贝数和Western检测显示,重组蛋白MtCE12-1成功进行了表达和分泌,表达水平达到464.08 U/mL。该酶在75℃、pH 8.0时表现出最佳酶活力,在50-85℃和pH 7.0-9.0的范围内表现出较好的酶活力,具有良好的热稳定性。将100-300μg的MtCE12-1添加至降解体系后,烟草生物质中纤维素降解效率分别提高了18.5%-30.7%和14.6%-30.5%。【结论】用2A肽介导的表达系统在嗜热毁丝霉中可以高效表达和纯化制备目标蛋白,碱性果胶酯酶MtCE12-1不仅具有良好的温度稳定性,在烟草生物质降解过程中也具有突出的作用效果,为烟草工业生产应用提供了潜在的优质酶资源。

跳大神、幻术与迎神赛会

去年年底热映的《妖猫传》为我们展示了一幅盛唐图景，大部分观众记住了电影中杨贵妃的美艳，但对于异人们展示出的“幻术”或许有着种种疑惑。历史记载中的幻术经常与神秘的巫师联系在一起，在宋代大量的官方与非官方记载中，巫师使用幻术和其他一些神秘仪式屡见不鲜。除了继承传统巫师的仪式外，新的巫仪也在宋代基层社会展现出蓬勃之势。那么，作为一名宋代的巫师，究竟拥有哪些能力？又要掌握哪些仪式呢？

如果旅行青蛙穿越到宋朝,会寄回怎样的明信片

近日，“蛙儿子”的旅行照和生活照成为了微信朋友圈中每天必出现的内容。这款名为“旅行青蛙”的养成类游戏以其特有的佛系风格，让许多青年男女们体验了一把“为人父母”的心情。作为一款日本游戏，蛙儿子们的旅行照让我们间接了解到许多日本的名胜古迹。假使有一天，旅行青蛙穿越到了宋代的中国，它们会经历怎样的体验，我们每天又会收到怎样的明信片呢？

宋代“职业化”巫师:男女分工,收入不菲,处境尴尬

在中国历史上，巫师并非只指代同一个群体，这个称渭包含了各种不同功能的非专业宗教人士，一般而言，这些人可以使用超自然的法术或仪式来治疗被鬼神凭依的病人，老自姓称他们为“巫”或“觋”。在有些情况下，那些被冠以“左道”或“妖僧”称谓的宗教异端人员所做之事也和“巫”高度接近。宋代时，这些巫师曾广泛存在于全国的乡村和边缘地带，带有十分强烈的荒蛮、原始印记，其中，南方地区的“职业化”巫师尤其神秘、复杂。

减少不平等要从根本入手

从人类诞生的那一刻起，不平等也就随之产生，奴隶主和奴隶，封建领主与农奴，皇帝与平民。不平等现象如同一个周期表一样不断地在人类历史上反复出现，如同一个挥之不去的阴影。我们也一直尝试着努力去减少它，甚至消除它，不知有多少农民起义、民族起义，它与不平等如同胞兄弟一样，哪里有不平等，哪里就有反抗。