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银杏内酯对OA诱导拟AD大鼠行为学和海马bcl-2表达的影响
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作者 董宇华 李清春 +2 位作者 潘娅 蒋乃昌 蒋天盛 《贵州医药》 CAS 2006年第12期1063-1065,共3页
目的研究银杏内酯对冈田酸(OA)诱导拟AD大鼠行为学和海马CA1区bcl-2表达的影响。方法大鼠海马CA1区多次微量注射OA,建立拟AD动物模型。部分模型动物同时用银杏内酯灌胃。Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力,免疫组化方法观察大鼠海马... 目的研究银杏内酯对冈田酸(OA)诱导拟AD大鼠行为学和海马CA1区bcl-2表达的影响。方法大鼠海马CA1区多次微量注射OA,建立拟AD动物模型。部分模型动物同时用银杏内酯灌胃。Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力,免疫组化方法观察大鼠海马CA1区bcl-2表达。结果与拟AD模型组相比,银杏内酯组水迷宫定向航行试验平均潜伏期明显缩短(P<0.05或P<0.01);空间探索试验原站点象限活动时间明显延长(P<0.05),站台穿越次数明显增多(P<0.05)。大鼠海马CA1区bcl-2阳性表达明显增多(P<0.05)。结论促进海马CA1区bcl-2表达上调,从而减少神经细胞的凋亡是银杏内酯改善拟AD大鼠学习记忆的可能机制之一。 展开更多
关键词 银杏内酯 拟AD大鼠 学习记忆 bcl-2
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冈田酸对大鼠学习记忆功能及脑内ChAT和GFAP表达的影响 被引量:15
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作者 吕心瑞 潘娅 +2 位作者 李清春 董宇华 蒋乃昌 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期399-403,共5页
为了研究冈田酸(OA)对大鼠认知能力的影响及其可能的机制,采用冈田酸进行海马CA1区微量多次注射,通过Morris水迷宫观察大鼠行为学变化,免疫组化法观察海马及皮层中ChAT和GFAP的表达。结果发现:OA注射后,大鼠平均逃避潜伏期明显延长(P<... 为了研究冈田酸(OA)对大鼠认知能力的影响及其可能的机制,采用冈田酸进行海马CA1区微量多次注射,通过Morris水迷宫观察大鼠行为学变化,免疫组化法观察海马及皮层中ChAT和GFAP的表达。结果发现:OA注射后,大鼠平均逃避潜伏期明显延长(P<0.01),原站台象限活动时间明显缩短(P<0.01),穿越原站台次数明显减少(P<0.01)。海马及皮层中ChAT表达减少(P<0.01),而GFAP阳性反应物表达明显增多(P<0.01)。以上结果提示:OA的神经毒性可以诱导大鼠学习记忆能力的降低,其可能机制是OA导致胆碱能神经元损伤,功能低下,以及反应性星形胶质细胞的增生肥大。 展开更多
关键词 冈田酸 学习记忆 胆碱乙酰基转移酶 胶质纤维酸性蛋白
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青藤碱及针刺治疗对海洛因戒断大鼠杏仁核的影响 被引量:4
3
作者 徐国强 刘晓红 +2 位作者 董宇华 李淑芳 陈腾祥 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期505-508,共4页
目的观察和评价针刺及青藤碱(sinomenine)治疗对海洛因成瘾大鼠戒断症状及其杏仁核(amygdala)自发放电及突触素(synaptophysin)表达的影响。方法75只SD大鼠随机均分5组:对照组、成瘾组、针刺组、青藤碱组和联合治疗组。皮下注射海洛因... 目的观察和评价针刺及青藤碱(sinomenine)治疗对海洛因成瘾大鼠戒断症状及其杏仁核(amygdala)自发放电及突触素(synaptophysin)表达的影响。方法75只SD大鼠随机均分5组:对照组、成瘾组、针刺组、青藤碱组和联合治疗组。皮下注射海洛因建立成瘾模型大鼠。3个治疗组分别给予针刺穴位(内关、百会、足三里)、青藤碱肌注及两者联合治疗。评估各组大鼠诱导戒断症状,用电生理技术观察5组大鼠杏仁核自发放电,免疫组织化学技术检测杏仁核突触素表达。结果给予纳洛酮后,大鼠出现典型诱导戒断症状(P<0.01),造模成功;给予针刺及青藤碱治疗后,其戒断症状明显减轻(P<0.01)。杏仁核自发放电结果显示:相对于对照组,海洛因成瘾大鼠自发放电低频放电和单个不匀放电比例增多,束簇状和混合型放电比例明显减少(P<0.05),而给予青藤碱或联合治疗的成瘾大鼠放电形式得以逆转(P<0.05),接近对照组水平。免疫组化结果显示,相对于对照组,成瘾组大鼠杏仁核突触素表达增多(P<0.01),给予针刺、青藤碱及联合治疗的大鼠杏仁核突触素的表达明显减少(P<0.01)。结论针刺及青藤碱治疗可以减轻海洛因成瘾大鼠的戒断症状,一定程度地纠正成瘾大鼠杏仁核自发放电频率和形式的异常,降低海洛因成瘾大鼠杏仁核突触素的表达,且二者联合应用效果更好。 展开更多
关键词 青藤碱 针刺 海洛因成瘾 戒断症状 杏仁核 突触素 自发放电
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银杏内酯和胰岛素对拟AD模型大鼠学习记忆的影响 被引量:12
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作者 曾昭毅 李清春 +2 位作者 董宇华 于燕妮 蒋乃昌 《贵阳医学院学报》 CAS 2005年第6期483-487,共5页
目的:建立拟AD大鼠模型,研究银杏内酯和胰岛素对拟AD模型大鼠学习记忆的影响。方法:采用冈田酸(OA)海马CA1区微量注射建立拟AD大鼠模型,分为银杏内酯组,胰岛素组。银杏内酯组腹腔注射银杏内酯,胰岛素组侧脑室微量注射速效基因合成人胰岛... 目的:建立拟AD大鼠模型,研究银杏内酯和胰岛素对拟AD模型大鼠学习记忆的影响。方法:采用冈田酸(OA)海马CA1区微量注射建立拟AD大鼠模型,分为银杏内酯组,胰岛素组。银杏内酯组腹腔注射银杏内酯,胰岛素组侧脑室微量注射速效基因合成人胰岛素,分别设对照组。冈田酸末次注射2周后水迷宫行为学试验检测其学习记忆,B ielschowsky染色观察海马CA1区老年斑(SP)和神经原纤维缠结(NFT)。结果:拟AD模型组定向航行试验于第2天开始平均逃避潜伏期与对照组比较明显延长(P<0.05或P<0.01),空间探索试验原站台象限活动时间明显缩短(P<0.01);与拟AD模型组比较,银杏内酯组及胰岛素组平均逃避潜伏期明显缩短(P<0.05或P<0.01),原站台象限活动时间明显延长(P<0.01)。B ielschowsky染色观察对照组大鼠海马CA1区未见明显改变,拟AD模型组大鼠海马CA1区形成NFT,细胞外有SP;银杏内酯组和胰岛素组大鼠海马CA1区少见或未见SP或NFT。结论:银杏内酯腹腔注射或胰岛素微量侧脑室注射均可减少拟AD模型大鼠海马CA1区SP和NFT的形成,减轻OA对大鼠海马的病理损害,显著改善拟AD模型大鼠学习记忆功能。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 胰岛素 记忆 二裂银杏 大鼠
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神经生长因子对拟AD模型大鼠脑内神经原纤维缠结的影响 被引量:8
5
作者 吕心瑞 潘娅 +2 位作者 李清春 董宇华 蒋乃昌 《贵阳医学院学报》 CAS 2006年第3期211-215,共5页
目的:研究神经生长因子对拟阿尔茨海默病(A lzhe im er's D isease,AD)模型大鼠海马及皮层中神经原纤维缠结(NFT)的影响。方法:采用冈田酸(Okadaic Ac id,OA)海马CA1区微量多次注射建立拟AD大鼠模型,侧脑室注射神经生长因子(nerve g... 目的:研究神经生长因子对拟阿尔茨海默病(A lzhe im er's D isease,AD)模型大鼠海马及皮层中神经原纤维缠结(NFT)的影响。方法:采用冈田酸(Okadaic Ac id,OA)海马CA1区微量多次注射建立拟AD大鼠模型,侧脑室注射神经生长因子(nerve growth factor,NGF)进行预处理,观察大鼠行为学变化,B ielschowsky染色观察海马及皮层神经原纤维缠结(neurobrillary tangles,NFT)。结果:OA注射后,大鼠出现认知能力、学习记忆能力减退,海马及皮层出现较多NFT;注射NGF预处理后,上述症状改善,海马及皮层NFT数量减少。结论:NGF可显著改善拟AD大鼠模型学习记忆能力,表明NGF可抑制NFT的形成,改善AD病的症状。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 神经生长因子 神经原纤维缠结 大鼠
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神经生长因子预处理对拟AD模型大鼠海马CA1区神经元自发放电和NFT的影响
6
作者 陈粲 吕心瑞 +2 位作者 李清春 董宇华 蒋乃昌 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期627-629,共3页
目的探讨NGF预处理对拟AD模型大鼠海马CA1区神经元自发放电和NFT的影响。方法海马CA1区微量多次注射OA建立拟AD大鼠模型,侧脑室注射NGF进行预处理,通过细胞外玻璃微电极记录的方法和Bielschowsky染色,观察NGF预处理组海马CA1区神经元的... 目的探讨NGF预处理对拟AD模型大鼠海马CA1区神经元自发放电和NFT的影响。方法海马CA1区微量多次注射OA建立拟AD大鼠模型,侧脑室注射NGF进行预处理,通过细胞外玻璃微电极记录的方法和Bielschowsky染色,观察NGF预处理组海马CA1区神经元的变化。结果NGF预处理组海马CA1区神经元放电频率明显增加(P<0.01),海马CA1区NFT数量减少(P<0.01)。结论NGF可提高海马神经元的自发放电活动,其机制可能是NGF可抑制NFT的形成,提高受损神经元的功能。 展开更多
关键词 海马 神经生长因子 自发放电 神经原纤维缠结 阿尔茨海默病
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人钙激活中性蛋白酶-1及-2催化亚基的生物信息学分析
7
作者 徐国强 胡晓霞 +8 位作者 潘娅 董宇华 张金娟 张敏 张祥令 臧贵勇 熊英 王旭东 陈腾祥 《贵阳医学院学报》 CAS 2011年第4期335-339,343,共6页
目的:对人钙激活中性蛋白酶(calpain)的2个亚家族成员calpain-1和calpain-2进行功能的比较分析。方法:以美国生物技术国家中心(NCBI)的蛋白质数据库获取人calpain-1和calpain-2的参考序列号(Ref-Seq)和氨基酸序列,通过UniProt数据库检索... 目的:对人钙激活中性蛋白酶(calpain)的2个亚家族成员calpain-1和calpain-2进行功能的比较分析。方法:以美国生物技术国家中心(NCBI)的蛋白质数据库获取人calpain-1和calpain-2的参考序列号(Ref-Seq)和氨基酸序列,通过UniProt数据库检索2个蛋白的一般蛋白质功能注释,获取相关结构域信息;利用DNA-MAN软件对结构域进行序列比对,用蛋白质结构数据(PBD)和蛋白修饰数据库(PhosphoSit Plus)进行修饰位点空间分布的分析及用String9.0软件进行蛋白质-蛋白质相互作用分析。结果:结构域比对分析显示,人calpain-1和calpain-2的钙蛋白酶催化结构域保守性程度高,而EF-hand结构域的差异比较大;翻译修饰分析发现,2个蛋白的修饰有明显的不同,人calpain-1的修饰比较单一,仅发现在赖氨酸(K84)有乙酰化修饰,而calpain-2的修饰形式和位点相对多样,分布在分子表面、间隙内及分子内部。相互作用分析发现,与人calpain-1和calpain-2相互作用的蛋白质有少部分是相同的,而多数是不同的,分别与不同细胞活动有关。结论:人calpain-1和cal-pain-2的钙蛋白酶催化结构域是高度保守的,二者功能上差异主要是由于调控位点(EH-hand和翻译后修饰位点)的差异引起。 展开更多
关键词 钙激活中性蛋白酶 催化亚基 生物信息学 结构域 翻译后修饰
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组织执行力提升方法——执行逻辑框架的构建
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作者 仵凤清 董宇华 洪波 《河北经贸大学学报(综合版)》 2014年第2期80-83,共4页
执行力研究是组织管理研究的一个重要组成部分,执行力影响组织战略决策的实施,是组织提升竞争力的基石。执行逻辑是从全局的角度看待问题,全面提升组织执行力的过程。执行逻辑涉及执行的起因、战略决策的制定、执行过程中的制度、机制... 执行力研究是组织管理研究的一个重要组成部分,执行力影响组织战略决策的实施,是组织提升竞争力的基石。执行逻辑是从全局的角度看待问题,全面提升组织执行力的过程。执行逻辑涉及执行的起因、战略决策的制定、执行过程中的制度、机制、文化等,以执行逻辑的方式提升执行力,组织就必须面对和改善自身存在的各方面的执行力问题。 展开更多
关键词 执行力 执行逻辑框架 执行力提升 组织管理 战略决策 执行效度 标准流程
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火焰原子吸收光谱法测定球墨铸铁中镁
9
作者 董宇华 马晓卉 +1 位作者 张硕 孙健 《中国化工贸易》 2013年第2期152-152,193,共2页
考察了用火焰原子吸收光谱法测定球墨铸铁中镁的分析条件,并建立了测定方法。样品经硝酸、盐酸溶解后,加入氯化锶定容,选择合适的仪器工作参数进行测定,由于镁元素具有很高的灵敏度,在285.2共振线用空气/乙炔火焰测量,具有理想... 考察了用火焰原子吸收光谱法测定球墨铸铁中镁的分析条件,并建立了测定方法。样品经硝酸、盐酸溶解后,加入氯化锶定容,选择合适的仪器工作参数进行测定,由于镁元素具有很高的灵敏度,在285.2共振线用空气/乙炔火焰测量,具有理想的信噪比,通过对溶样方法和影响因素的讨论,得出最优的分析条件。 展开更多
关键词 火焰原子吸收光谱法 氯化锶 灵敏度 信噪比
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职业生涯成功的影响因素研究
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作者 仵凤清 董宇华 《中国集体经济》 2014年第31期106-107,共2页
职业生涯成功研究是职业生涯研究中的一个重要组成部分。职业生涯成功不仅能够反映职业个体职业生涯管理状态,对组织成功也有一定的预测作用。文章主要探讨了沉默行为对职业生涯成功的影响机制,以及授权行为在二者之间的中介作用。文章... 职业生涯成功研究是职业生涯研究中的一个重要组成部分。职业生涯成功不仅能够反映职业个体职业生涯管理状态,对组织成功也有一定的预测作用。文章主要探讨了沉默行为对职业生涯成功的影响机制,以及授权行为在二者之间的中介作用。文章以北京、天津、河北等地区的企事业员工为研究对象,对问卷调查所获得的数据进行回归分析。 展开更多
关键词 员工沉默 授权行为 职业生涯 成功
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细胞培养密度对MCF7乳腺癌细胞integrin β4水解的影响 被引量:2
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作者 严莉莎 霍建云 +6 位作者 董宇华 潘娅 王晋星一 陈妮 臧贵勇 胡晓霞 陈腾祥 《贵阳医学院学报》 CAS 2015年第1期6-9,共4页
目的:研究细胞培养密度对MCF7乳腺癌细胞integrinβ4水解机制。方法:常规培养高密度和低密度MCF7乳腺癌细胞,分别给予钙离子螯合剂和肝素处理,用Western blot检测不同培养密度MCF7细胞integrinβ4的水解情况;用Fluo-3 AM作为钙离子荧光... 目的:研究细胞培养密度对MCF7乳腺癌细胞integrinβ4水解机制。方法:常规培养高密度和低密度MCF7乳腺癌细胞,分别给予钙离子螯合剂和肝素处理,用Western blot检测不同培养密度MCF7细胞integrinβ4的水解情况;用Fluo-3 AM作为钙离子荧光探针,激光共聚焦扫描显微镜检测细胞内钙离子的分布。结果:Western blot检测结果显示,在低密度和高密度培养的MCF7细胞中,integrinβ4的水解模式不同;在高浓度培养的细胞中,200 k D integrinβ4片段产生增多;激光共聚焦扫描显微镜观察发现,低密度培养MCF7细胞中,钙离子的绿色荧光主要成团或颗粒状分布,而且与红色荧光有较多的重合,部分钙离子分布于细胞核内;在高密度培养的细胞中,钙离子在细胞质膜和细胞核中的定位较少;钙离子螯合剂BAPTA-AM处理可使200 k D integrinβ4明显减少;10-6mol/L的肝素能够减少MCF7细胞200 k D水解片段的增多,随着肝素浓度的增高,抑制效果有所增强;相对于BAPTA-AM,10-4mol/L肝素的抑制效应减弱。结论:高密度培养的MCF7细胞中,钙离子从钙库中释放,细胞外内流增多,激活calpain 2,导致200 k D integrinβ4水解片段增多。 展开更多
关键词 钙离子 培养密度 整合素β4 钙激活中性蛋白酶2 肝素
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电感耦合等离子体原子发射光谱法测定球墨铸铁中各组分 被引量:2
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作者 马晓卉 董宇华 孙健 《中国化工贸易》 2013年第1期159-159,共1页
考察了用电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP—AES)测定球墨铸铁中硅、锰、镍、铜、钒、钛、镁的分析条件并建立了测定方法。样品经酸溶解和氢氧化还原后,干过滤,用ICP—AES法测定滤液中上述组分含量,其测定值与湿法的测定值相符... 考察了用电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP—AES)测定球墨铸铁中硅、锰、镍、铜、钒、钛、镁的分析条件并建立了测定方法。样品经酸溶解和氢氧化还原后,干过滤,用ICP—AES法测定滤液中上述组分含量,其测定值与湿法的测定值相符,测定结果相对标准偏差≤3.0%。 展开更多
关键词 球墨铸铁 电感耦合等离子体原子发射光谱法
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合金钢X射线荧光光谱通用工作曲线制作——P法虚拟合成标样应用
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作者 马晓卉 董宇华 李娆 《中国科技期刊数据库 工业A》 2019年第3期121-124,共4页
本文针对合金钢的化学成分,选择适宜于合金钢中各元素分析的激发电压和电流、测量角度及脉冲范围等仪器条件,选择两套合金钢标准样品,采用FP法虚拟合成了一个标样,建立适合合金钢成分分析的单标灵敏度曲线。该方法可用于分析合金钢中的1... 本文针对合金钢的化学成分,选择适宜于合金钢中各元素分析的激发电压和电流、测量角度及脉冲范围等仪器条件,选择两套合金钢标准样品,采用FP法虚拟合成了一个标样,建立适合合金钢成分分析的单标灵敏度曲线。该方法可用于分析合金钢中的18个元素,基本涵盖了低合金钢、中合金钢、结构钢及工具钢,甚至可以拓展至不锈钢中可能存在元素的准确分析,检测结果可靠,分析范围广。 展开更多
关键词 合金钢 X射线荧光光谱法 谱线重叠校正 虚拟合成标样
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新常态下如何思考国有企业发展战略 被引量:2
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作者 董宇华 《经济师》 2015年第7期250-250,共1页
文章认为正确地思考企业发展战略是企业发展的源动力、生命线和潜力所在,是管理好企业的关键。文章依据经济新常态背景,从规范研究的视角,探索了思考企业发展战略的本质功效、框架思维、创造性落实等方面的应该更为重视的战略要点,促进... 文章认为正确地思考企业发展战略是企业发展的源动力、生命线和潜力所在,是管理好企业的关键。文章依据经济新常态背景,从规范研究的视角,探索了思考企业发展战略的本质功效、框架思维、创造性落实等方面的应该更为重视的战略要点,促进新常态下思考企业发展战略的理论拓展及实践实施。 展开更多
关键词 经济新常态 企业发展战略 策略
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浅议在科研单位内控管理中引入PDCA管理模式 被引量:2
15
作者 董宇华 《经济师》 2015年第11期65-65,共1页
文章采取规范研究视角,对在科研单位内控管理中引入PDCA管理模式必要性及具体措施进行了分析论证,旨在构筑适宜科研单位发展的规范化、动态化内控管理体系。
关键词 科研单位 内控管理 PDCA管理模式
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Regorafenib联合TAS102新策略治疗肝细胞癌的研究 被引量:2
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作者 章俊 董宇华 +2 位作者 杨叶 张梦琪 何常 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期294-301,共8页
背景与目的:瑞格菲尼(regorafenib,REG)和TAS102是治疗消化道肿瘤的新型药物。嘧啶类药物5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)联合REG可抑制多药耐药转移性结肠癌的进展。肿瘤干细胞(cancer stem cell,CSC)决定肿瘤的自我更新,异质性及治... 背景与目的:瑞格菲尼(regorafenib,REG)和TAS102是治疗消化道肿瘤的新型药物。嘧啶类药物5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)联合REG可抑制多药耐药转移性结肠癌的进展。肿瘤干细胞(cancer stem cell,CSC)决定肿瘤的自我更新,异质性及治疗耐受等,靶向CSC为治愈肿瘤提供了可能途径。探讨REG联合TAS102治疗肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的联合效应及潜在机制。方法:以人HepG2、Huh7和SK-Hep1肝癌细胞系为实验对象。REG和TAS102单药或联合处理肝癌细胞及荷瘤动物。采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测肝癌细胞活力;流式细胞术分析肝癌细胞中CD133阳性细胞亚群比例;采用蛋白质印迹法(Western blot)分析不同药物处理后肝癌细胞中蛋白表达差异;含不同药物的干细胞培养基培养肝癌干细胞球(HCC sphere);荷瘤动物实验评估药物联合治疗效果。结果:REG及TAS102单药显著抑制肝癌细胞活力。TAS102联合使用减低REG单药时诱导增加的CD133阳性细胞亚群比例及干细胞标志分子SRY相关的高迁移率族盒蛋白-2(SRY-related high mobility group box protein-2,SOX2)和乙醛脱氢酶1A(aldehyde dehydrogenase 1A,ALDH1A)的蛋白水平。同时REG的联合使用下调TAS102单药处理时诱导活化的抗凋亡蛋白髓细胞白血病-1蛋白(myeloid cell leukemia-1,MCL1)信号。REG联合TAS102显著抑制了HCC sphere的形成。动物实验证实REG联合TAS102显著抑制肝癌瘤体的生长。结论:REG联合TAS102通过调控肝癌细胞的干细胞性及抗凋亡信号,发挥联合用药增强抗HCC的活性,为临床治疗难治性HCC提供了一种新的治疗策略。 展开更多
关键词 瑞格菲尼 TAS102 肿瘤干细胞 联合治疗 肝细胞癌
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浅议加强国企科研单位的创新管理
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作者 董宇华 《经济师》 2016年第8期284-284,共1页
国企科研单位是国企自身创新的主要力量,在促进产业发展,构建国际竞争力等方面发挥重要作用。文章从优化资源配置、夯实创新主体力量,完善运营管理、释放内在创新活力,严格监督管理、提升科研项目质量等方面,对加强国企科研单位的创新... 国企科研单位是国企自身创新的主要力量,在促进产业发展,构建国际竞争力等方面发挥重要作用。文章从优化资源配置、夯实创新主体力量,完善运营管理、释放内在创新活力,严格监督管理、提升科研项目质量等方面,对加强国企科研单位的创新管理展开探讨。 展开更多
关键词 国企 科研单位 创新
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贵州关岭余甘子内生真菌多样性及其抗菌抗氧化活性 被引量:4
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作者 兰咏哲 李启瑞 +6 位作者 黄劲 赵亮 董宇华 阚雨 王迪 廖万清 康颖倩 《贵州医科大学学报》 CAS 2020年第9期1009-1014,共6页
目的:了解贵州关岭余甘子内生真菌的多样性,探究余甘子果汁抗氧化及抑菌功能的相关性。方法:取贵州省关岭县10月份野生健康成熟新鲜的余甘子果实,采用研磨法获得余甘子果汁;采用组织分离法对果实进行内生真菌分离,按照菌丝尖端切割法接... 目的:了解贵州关岭余甘子内生真菌的多样性,探究余甘子果汁抗氧化及抑菌功能的相关性。方法:取贵州省关岭县10月份野生健康成熟新鲜的余甘子果实,采用研磨法获得余甘子果汁;采用组织分离法对果实进行内生真菌分离,按照菌丝尖端切割法接种至马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基纯化3次并保存;取本校真菌室提供的标准菌株,采用Ezup柱式真菌基因组DNA抽提试剂盒提取分离获得的真菌菌株DNA、并通过聚合酶链式反应(PCR)扩增其内转录间隔区(ITS)基因序列后测序,采用分子系统学方法对分离获得的真菌菌株进行鉴定、归类及多样性评估,采用邻接法(N-J)基于ITS序列构建系统发育树;摇床培养提取内生菌发酵液,采用纸片扩散法对发酵液和余甘子果汁进行抑菌活性测试,并绘制维生素C(Vc)标准曲线测定菌株的总抗氧化能力。结果:余甘子果实中分离出内生真菌43株,其中青霉属19株、横梗霉属9株、间座壳属11株、叶点霉属1株、葡萄座腔菌属3株,青霉属为优势属,其中Penicillium chrysogenum分离出15株,数量最多,为优势菌种;ITS序列比对结果显示,分离株43株、标准株5株,构建N-J系统发育树;43株内生真菌对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及白念珠菌均无抑制效果,余甘子果汁对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌有较明显效果,但对白念珠菌无抑制效果;Vc标准曲线回归方程为y^=0.8095 x-0.0828,R^2=0.9937,经样品测试,43株菌的发酵液总抗氧化能力明显高于空白培养基,相对于Vc的抗氧化能力范围104.76~156.64 mg/L。结论:分离出的余甘子内生真菌中,青霉属为优势菌属,P.chrysogenum为优势菌种;2株内生真菌具有较强的抗氧化作用,分离出的43株内生真菌对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及白色念珠菌均无明显抑制效果。 展开更多
关键词 余甘子 内生真菌 贵州 多样性 抗氧化 抑菌活性
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钙蛋白酶抑制剂对雌激素诱导人乳腺癌细胞上皮-间质转化的影响 被引量:2
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作者 金爱 王宏键 +1 位作者 董宇华 王旭东 《贵州医科大学学报》 CAS 2020年第12期1376-1381,共6页
目的:探讨钙蛋白酶(Calpain)对17β-雌二醇(E2)诱导人乳腺癌细胞上皮-间质转化(EMT)的影响。方法:以雌激素受体(ER)阳性乳腺癌细胞MCF-7和ER阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞为研究模型,分别用二甲基亚砜(DMSO,对照组)、50 nmol/L E2(E2组)... 目的:探讨钙蛋白酶(Calpain)对17β-雌二醇(E2)诱导人乳腺癌细胞上皮-间质转化(EMT)的影响。方法:以雌激素受体(ER)阳性乳腺癌细胞MCF-7和ER阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞为研究模型,分别用二甲基亚砜(DMSO,对照组)、50 nmol/L E2(E2组)及50 nmol/L E2联合10μmol/L Calpeptin(E2+Calpeptin组)处理;采用划痕实验观察各组MCF-7和MDA-MB-231细胞的迁移能力,采用蛋白印迹法检测各组细胞纤连蛋白(FN)和E-钙黏素(E-cadherin)蛋白表达。结果:与对照组比较,E2组MCF-7和MDA-MB-231细胞在24和48 h的迁移率均增加(P<0.01),细胞中的FN蛋白在24、48和72 h表达均明显上调、E-cadherin蛋白表达明显下调(P<0.01);与E2组比较,E2+Calpeptin组MCF-7和MDA-MB-231细胞划痕迁移率明显降低,FN表达明显减少、E-cadherin表达明显增加(P<0.01)。结论:E2可通过Calpain诱导MCF-7和MDA-MB-231乳腺癌细胞的EMT及细胞迁移。 展开更多
关键词 细胞运动 17β-雌二醇 钙蛋白酶 乳腺癌细胞 上皮-间质转化
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姜黄药渣真菌分离方法的改良及真菌多样性分析 被引量:1
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作者 兰咏哲 李启瑞 +6 位作者 黄劲 赵亮 董宇华 阚雨 王迪 廖万清 康颖倩 《贵州医科大学学报》 CAS 2020年第9期1004-1008,共5页
目的:改良姜黄药渣真菌分离方法,探究姜黄药渣真菌的多样性。方法:采用五点法采集姜黄药渣样本,分别采用常规真菌分离方法和改良方法分离样本中的真菌,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增其ITS基因序列后测序;序列结果在美国国立生物技术信息... 目的:改良姜黄药渣真菌分离方法,探究姜黄药渣真菌的多样性。方法:采用五点法采集姜黄药渣样本,分别采用常规真菌分离方法和改良方法分离样本中的真菌,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增其ITS基因序列后测序;序列结果在美国国立生物技术信息中心(NCBI)数据库进行下载与比对,确定菌株种属并计算分离率。结果:采用常规真菌分离方法和改良方法分别从姜黄药渣样本中分离获得菌株13株和222株,前者分离菌株均数低于后者,差异有统计学意义(P<0.05);采用常规真菌分离方法和改良方法分离获得菌株分别属于2个门5个属的6个菌种和3个门12个属的20个菌种,且青霉属均为优势菌属(分离率分别为61.53%、46.84%),Aspergillus minisclerotigenes分离出的菌株数均最多、为优势菌种。结论:姜黄药渣中真菌多样性丰富,且改良方法相较于常规真菌分离方法分离的菌株数量增加,且不会改变姜黄药渣中真菌菌株的优势菌属及菌种。 展开更多
关键词 真菌 姜黄药渣 多样性 分离方法 技术改良 木质纤维素
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