miR-26a通过调节MTDH基因表达抑制CAOV3细胞系生长

目的检测miR-26a在卵巢癌组织的表达改变,明确miR-26a调控卵巢癌细胞生长的分子机制。方法运用qRT-PCR检测52例卵巢癌及相应癌旁组织中miR-26a的表达改变;将miR-26a mimics转染卵巢癌细胞CAOV3,以MTDH siRNA为阳性对照,采用Western blot检测其对MTDH蛋白表达水平的影响;然后采用MTT法检测高表达miR-26a对CAOV3细胞生长增殖的影响。结果 qRT-PCR检测结果显示,miR-26a在52例卵巢癌组织中表达下调;Western blot结果显示,过表达miR-26a或干扰MTDH可抑制MTDH蛋白的表达。MTT检测发现,过表达miR-26a或干扰MTDH可抑制人CAOV3细胞的生长(P<0.05)。结论 miR-26a通过调节MTDH基因的表达而抑制卵巢癌细胞的生长。

miR-26a通过调节TFAP2C表达而抑制卵巢癌细胞的增殖

目的 :探讨微小RNA(microRNA,miRNA,miR)-26a通过调节转录因子活化蛋白2C(transcription factor activator protein 2C,TFAP2C)的表达而抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖。方法 :将miR-26a模拟物(miR-26a mimic)片段和含野生型TFAP2C基因3’-非翻译区的荧光素酶报告载体(TFAP2C-wt)共转染至SKOV3细胞后,进行荧光素酶活性检测。将miR-26a mimic、靶向TFAP2C基因的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)重组载体shRNA-TFAP2C和TFAP2C过表达的重组载体pcDNA3.1-TFAP2C分别转染或不同组合共转染至SKOV3细胞后,蛋白质印迹法检测细胞中TFAP2C的表达水平,MTS法检测细胞的增殖情况。结果 :miR-26a mimic和TFAP2C-wt共转染后,SKOV3细胞的荧光素酶活性强度比对照组[miRNA无关序列阴性对照(miRNA negative control,miR-NC)和含突变型TFAP2C基因3’-非翻译区的荧光素酶报告载体(TFAP2C-mut)共转染]下降了约52%(P<0.05)。miR-26a mimic转染组和shRNA-TFAP2C转染组SKOV3细胞中TFAP2C蛋白的表达水平和细胞增殖率均低于相应的对照组(miR-NC和shRNA-NC转染SKOV3细胞),差异有统计学意义(P<0.05);而miR-26a mimic和shRNA-TFAP2C共转染组SKOV3细胞的增殖率低于miR-26a mimic和shRNA-TFAP2C单独转染组,差异有统计学意义(P<0.05)。pcDNA3.1-TFAP2C转染组SKOV3细胞中TFAP2C的表达水平和细胞增殖率高于相应的对照组(pcDNA3.1空载体转染SKOV3细胞),差异有统计学意义(P<0.05);而miR-26a mimic和pcDNA3.1-TFAP2C共转染组SKOV3细胞的增殖率低于pcDNA3.1-TFAP2C转染组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 :miR-26a通过调控TFAP2C的表达而抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖。