流式细胞磁珠微阵列法检测血清中细胞因子水平在稳定期和急性加重期哮喘中的意义

目的探讨流式细胞磁珠微阵列法（cytometric beads array,CBA）检测血清中细胞因子水平在稳定期和急性加重期哮喘中的意义。方法纳入慢性持续期哮喘40例,急性发作期哮喘22例,健康人18例。抽取外周血2 mL,采用CAB法检测外周血清中细胞因子水平,并分析各细胞因子特征及与临床数据的相关性。全自动血细胞及生化仪检测血常规,C反应蛋白和降钙素原。结果定制含7种细胞因子微球（分别为IL-5,IL-6,IL-10,IL-13,IL-17,TNF-α,IFN-γ）的CBA试剂盒。与健康人相比,7种细胞因子在慢性持续期哮喘无明显改变。急性发作期哮喘细胞因子升高分为5种亚群,分别为IL-6升高型（22.8%）、IL-6/TNF-α双高型（13.6%）、IL-5升高型（31.8%）、IL-17升高型（占13.6%）及细胞因子正常型（占18.2%）。其中,IL-6、TNF-α明显升高,较健康人分别升高了6.28-12倍和17.3倍。IL-6升高型、IL-6/TNF-α升高型与白细胞及C反应蛋白呈正相关（R2=0.63,R2=0.67;P〈0.05）。结论 CBA法可快速检测哮喘血清标本的多种细胞因子水平,细胞因子在慢性持续期无明显升高,但IL-6、TNF-α、WBC和CRP的综合指标有助于判断由细菌感染诱发的急性加重,并快速指导抗生素的使用。

GPC3-WNT-JNK通路介导脂多糖诱导肺局部细胞炎症

目的:探讨GPC3在脂多糖(LPS)诱导的气道上皮细胞局部炎症微环境中的重要作用,并以GPC3-WNT通路介导的调控机制为核心进一步研究LPS诱导的肺局部炎症分子机制。方法:LPS经气道滴入小鼠后模拟肺损伤模型,检测肺泡灌洗液及肺组织中GPC3表达情况以及其表达位置。培养人肺16HBE细胞,LPS刺激16HBE细胞建立急性炎症细胞,予以RT-PCR检测其细胞中GPC3、TNF-α和TGF-β的mRNA表达情况,予以WesternBlot检测GPC3、TGF-β和TNF-α蛋白表达情况。加入外源性GPC3刺激16HBE细胞,建立GPC3高表达细胞模型,检测炎症因子TNF-α和TGF-β mRNA的表达情况。不同浓度GPC3-WNT通路抑制剂处理细胞,观察上述指标变化。结果:LPS诱导ALI小鼠模型显示GPC3表达水平显著提高。此外,LPS在体外也产生了GPC3表达升高的现象。同时,外源性GPC3蛋白刺激支气管上皮细胞产生多种炎症因子,可能提示GPC3具有促炎作用。此外,GPC3诱导支气管上皮细胞系炎性细胞因子的产生被WNT-JNK通路的抑制剂阻断,提示ALI/ARDS过程中GPC3参与肺局部的潜在信号通路。结论:LPS刺激支气管上皮细胞的过程中存在一条线性信号通路即GPC3-WNT-JNK。这一发现可能为ALI/ARDS的治疗和生物标志物的开发提供一个新的分子靶点和分子机制。

β-雌二醇经ERβ-ERK1/2雌激素胞膜信号传导途径促进肺癌A549细胞迁移和侵袭

目的:研究β-雌二醇(β-estradiol)促进肺癌A549细胞迁移和侵袭的调控机制。方法:体外培养乳腺癌MCF-7细胞和肺癌A549细胞,以MCF-7细胞作为阳性对照明确雌激素受体(ER)在A549细胞中的表达情况; real-time PCR检测ERβ亚型ERβ1、ERβ2和ERβ5在A549细胞中的表达情况,免疫荧光定位ERβ在细胞内的胞膜和胞核分布情况;予β-estradiol刺激A549细胞,Western blot检测胞内ERK1/2磷酸化水平改变,Transwell小室侵袭实验和细胞实时监测培养系统检测细胞迁移和侵袭能力的变化;利用ERK1/2抑制剂PD98059预先处理,Transwell小室侵袭实验和细胞实时监测培养系统检测β-estradiol刺激后细胞迁移和侵袭能力的变化。结果:ER在A549细胞中以表达ERβ为主,且表达的ERβ以ERβ2和ERβ5为主,免疫荧光显示细胞内ERβ以胞质分布为主。β-estradiol可以引起A549细胞ERK1/2磷酸化水平的增加,并促进细胞的迁移和侵袭,抑制ERK1/2信号传导可以逆转β-estradiol促进的细胞迁移和侵袭。结论:β-estradiol经ERβ活化ERK1/2雌激素胞膜信号传导,从而促进A549细胞的侵袭和转移。ERK1/2是ERβ雌激素胞膜信号传导中与肺癌侵袭和转移相关的重要信号节点。

CCN1在脂多糖诱导急性肺损伤中的表达调控和在炎症反应中的作用

目的:体内观察富半胱氨酸蛋白61(CYR61/CCN1)在正常肺组织中的表达定位和在脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肺损伤中的表达变化,体外研究LPS调控CCN1表达的分子机制和CCN1在LPS诱导炎症介质表达中的作用。方法:分别通过免疫组化(IHC)染色及免疫荧光法观察CCN1在小鼠肺组织和气道上皮细胞16HBE中的表达定位;气道滴注LPS建立小鼠急性肺损伤模型,IHC观察CCN1在肺组织中的表达变化;体外研究中,分别予气道上皮16HBE细胞以ERK1/2、JNK、P38和PI3K信号通路特异性抑制剂预处理2 h后加入LPS刺激,通过RT-qPCR和Western blot检测CCN1的mRNA和蛋白表达变化;分别通过CCN1-siRNA和重组CCN1蛋白刺激16HBE细胞,qPCR检测炎症介质白细胞介素6(IL-6)、IL-8、转化生长因子β(TGF-β)和血管内皮生长因子(VEGF)的mRNA水平。结果:CCN1在正常肺组织中以气道上皮表达为主,在LPS诱导的急性肺损伤小鼠气道上皮细胞中CCN1表达升高;LPS可刺激16HBE细胞中CCN1的表达水平升高,其中ERK1/2、JNK、P38和PI3K信号通路特异性抑制剂可以不同程度逆转LPS诱导的CCN1表达升高。重组CCN1蛋白可以诱导16HBE细胞中IL-6、IL-8、TGF-β和VEGF的mRNA合成,干扰CCN1可以部分逆转LPS刺激后IL-6、IL-8、TGF-β和VEGF的mRNA合成。结论:气道上皮来源的CCN1在急性肺损伤中表达升高,其表达调控涉及ERK1/2、JNK、P38和PI3K信号通路;CCN1在介导LPS诱导的炎症介质表达过程中发挥了重要作用。本研究为未来急性肺损伤诊治的潜在靶点提供了一定的理论基础。

NOX-4调控PI3K信号通路参与TGF-β1诱导肺癌细胞表达Ⅰ型胶原蛋白

目的:研究NADPH氧化酶4(NOX-4)调控PI3K信号通路在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肺癌细胞表达Ⅰ型胶原蛋白(collagen Ⅰ)的作用及分子机制。方法:体外培养人肺癌A549细胞,予TGF-β1刺激后,观察NOX家族和collagen家族的mRNA和蛋白表达的变化,以及PI3K class I催化亚基的表达和PI3K信号通路活化的变化;NOX-4抑制剂二亚苯基碘鎓(DPI)预先处理肺癌细胞,观察TGF-β1刺激后collagen Ⅰ的mRNA和蛋白表达的变化以及PI3K class I催化亚基表达和PI3K信号通路活化。结果:TGF-β1可以诱导肺癌细胞中NOX-4和collagen Ⅰ的mRNA和蛋白表达升高,并诱导PI3K class I催化亚基中PIK3CD表达升高和PI3K信号通路的活化。NOX-4抑制剂DPI可以抑制TGF-β1诱导的collagen Ⅰ表达升高;抑制NOX-4并不影响TGF-β1诱导的PI3K催化亚基PIK3CD表达,但可以降低TGF-β1诱导PI3K信号通路的活化程度。结论:NOX-4经调控PI3K信号通路的活化参与了TGF-β1诱导肺癌细胞表达collagen Ⅰ的分子机制。TGF-β1/NOX-4/PI3K信号通路轴在肺癌细胞collagen Ⅰ的表达中发挥了调控作用。

自噬流在细颗粒物诱导的气道炎症中的变化及成纤维细胞生长因子10调控自噬流的抗炎效应

目的:探讨自噬流在细颗粒物(PM)诱导气道炎症中的变化及成纤维细胞生长因子10(FGF10)是否通过调控自噬流发挥抗炎效应。方法:选取雄性C57BL/6小鼠进行随机分组,预先1 h给予5 mg/kg FGF10气道滴注,然后予以4 mg/kg PM气道滴注,连续气道滴注2 d,构建动物模型,具体分组:空白对照(vehicle)组、FGF10组、PM组和PM+FGF10组。获取肺组织进行病理分级评分,获取支气管肺泡灌洗液(BALF)以ELISA检测炎症介质白细胞介素6(IL-6)、IL-8、前列腺素E2(PGE2)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的分泌,获取肺组织蛋白以Western blot检测自噬相关蛋白LC3和p62的表达。预先给予4 mmol/L 3-甲基腺嘌呤(3-MA)或10μg/L FGF10干预1 h,200 mg/L的PM刺激人正常气道上皮BEAS-2B细胞1 h,Western blot检测NF-κB通路p65和IκBα磷酸化水平。预先给予4mmol/L 3-MA或10μg/L FGF10干预1 h,200 mg/L的PM刺激BEAS-2B细胞24 h,ELISA检测炎症介质IL-6、IL-8、PGE2和TNF-α的分泌,Western blot检测自噬相关蛋白LC3和p62的表达。结果:动物模型中PM短时暴露可以诱导C57BL/6小鼠气道炎症的改变,伴随BALF中炎症介质IL-6、IL-8、PGE2和TNF-α升高,肺组织发生自噬流异常;FGF10干预可以逆转PM诱导的气道炎症和炎症介质分泌,伴随着自噬流的改变。细胞模型中PM可以诱导BEAS-2B细胞炎症介质IL-6、IL-8、PGE2和TNF-α分泌,3-MA干预或FGF10干预可以逆转炎症介质的分泌,3-MA干预可以逆转NF-κB通路的改变,FGF10干预可以逆转自噬流的改变。结论:FGF10在PM诱导的气道炎症中发挥抗炎效应,其中分子机制涉及自噬和NF-κB信号通路。

基质蛋白CCN1与肺部疾病的研究进展

富半胱氨酸蛋白61（cysteine-richangiogenicinducer61，Cyr61/CCN1）是即刻早期基因（earlygrowthresponsegene,Egr)编码的富含半胱氨酸的分泌型基质蛋白，属于CCN家族成员之一。CCN家族包括CCN1、结缔组织生长因子、肾母细胞瘤过度表达基因、Wnt诱导分泌蛋白(Wnt-inducedsecretedprotein,WISP)-1、WISP-2和WISP-36个成员。其中CCN1广泛表达于肺脏不同类型细胞和胞外基质，参与细胞生长、分化、凋亡、黏附和迁移等多种生理功能的调控［1］。Pais等［2］利用转录组分析C57BL/6J鼠和胰岛素样生长因子1(insulinlikegrowthfactor1,IGF1)基因敲除鼠,发现CCN1基因与肺发育成熟中的气道膈改造和远端上皮成熟相关，是IGF1/IGF1R轴在参与胚胎肺成熟发育中的调控基因。在正常生理情况下，CCN1参与肺泡的成熟和胞外基质的生成；在不同肺部疾病中，肺脏不同类型细胞CCN1发生异常表达和差异调控。本文检索了近年来基质蛋白CCN1与肺部疾病中的肺损伤、慢性阻塞性肺病（chronicobstructivepulmonarydisease,COPD)和肺癌相关性的文献报道，就CCN1在不同肺部疾病中的研究进展作一综述，以期望为肺部疾病的预防治疗寻找潜在的分子标记物和治疗靶点。

大气颗粒物急性暴露对C57BL/6小鼠肺脏病理改变和气道上皮细胞IL-6和IL-8表达的影响

目的:探讨大气颗粒物(PM)急性暴露下C57BL/6小鼠肺脏的病理改变和气道上皮细胞炎症介质白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素8(IL-8)分泌的分子机制。方法:选取雄性C57BL/6小鼠随机分为空白对照组和PM实验组,每组10只:PM实验组连续2 d经气管滴注PM悬浮液,建立PM短期暴露的小鼠模型;空白对照组连续2 d经气管滴注PBS。获取肺组织进行HE染色和PAS染色以评估组织病理变化;获取支气管肺泡灌洗液(BALF),检测IL-6和IL-8的表达。建立PM刺激人气道上皮细胞的体外细胞模型:200 mg/L的PM刺激BEAS-2B细胞,于3、6、12和24 h时点检测IL-6和IL-8的mRNA表达;25、50、100、200和400 mg/L的PM刺激BEAS-2B细胞24 h,检测IL-6和IL-8蛋白的分泌;200 mg/L的PM刺激BESA-2B细胞5、10和15 min,检测PI3K信号通路相关蛋白的变化;预先给予5μmol/L PI3K抑制剂LY294002干预0.5 h,再用200 mg/L的PM刺激BESA-2B细胞15 min,检测PI3K信号通路相关蛋白的变化。结果:在体内动物模型中,与空白对照组相比,PM组小鼠气道周围可见炎症细胞浸润,气道上皮细胞变厚,BALF中IL-6和IL-8显著升高(P<0.01)。在体外细胞模型中,与空白对照组相比,PM刺激可引起BEAS-2B细胞中IL-6和IL-8的mRNA表达和蛋白分泌(P<0.01),同时能显著提高PI3K信号通路的磷酸化水平(P<0.01),PI3K抑制剂LY294002能部分逆转PM诱导的PI3K信号通路的磷酸化(P<0.05),同时显著逆转PM诱导的IL-6和IL-8蛋白分泌(P<0.01)。结论:本研究的动物实验揭示了PM急性暴露下C57BL/6小鼠肺脏以气道炎症为主的病理改变,体外细胞实验揭示PI3K信号通路介导了PM诱导的气道上皮细胞IL-6和IL-8分泌。

TGF-β1调控肺泡上皮细胞PI3K亚基构成变化的研究

目的探讨肺泡上皮细胞(AECs)中PI3K亚基的表达情况和TGF-β1是否可以调控PI3K亚基的构成变化。方法采用实时定量PCR法检测AECs中PI3K亚基mRNA的表达情况,予5ng/ml TGF-β1刺激A549细胞0、3、6、12、24和48h不同时间点,实时定量PCR法检测PI3K亚基mRNA的表达变化,Western blot法检测PIK3CD蛋白表达水平。结果 AECs中Ⅰ型PI3K催化亚基以表达PIK3CA、PIK3CB和PIK3CD为主,Ⅰ型PI3K调节亚基以表达PIK3R1、PIK3R2和PIK3R3为主,Ⅱ型PI3K亚基和Ⅲ型PI3K亚基以表达PIK3R4、PIK3C3、PIK3C2A和PIK3C2B为主。TGF-β1刺激可以调控Ⅰ型PI3K催化亚基中的PIK3CD mRNA和蛋白的表达呈时间依赖性升高。结论 AECs中Ⅰ型PI3K亚基、Ⅱ型PI3K亚基和Ⅲ型PI3K亚基均有不同程度表达,TGF-β1经调控PIK3CD的表达导致Ⅰ型PI3K催化亚基的构成变化。

FGF10干预PM诱导支气管上皮细胞COX2/PGE_(2)表达的分子机制

目的探讨成纤维生长因子10(FGF10)对细颗粒物(PM)诱导支气管上皮细胞表达环氧合酶2/前列腺素E_(2)(COX2/PGE_(2))的作用及其分子机制。方法雄性C57BL/6小鼠给予0.5 mg/kg FGF10腹腔注射和4.0 mg/kg PM气道滴注,构建动物模型,设置空白组、FGF10组、PM组和PM+FGF10组。获取各组肺组织并进行病理分级评分,采用Western blot法检测各组肺组织中COX2的相对表达量,采用免疫荧光法检测支气管上皮中COX2的相对表达量,采用ELISA法检测肺泡灌洗液中PGE_(2)的分泌水平。先给予5 mmol/L ERK1/2抑制剂(U0126)/PI3K抑制剂(LY294002)干预,然后10μg/L FGF10干预,最后200 mg/L PM刺激支气管上皮细胞BEAS-2B,构建细胞模型,设置空白组、PM组、PM+FGF10组、PM+FGF10+LY294002组和PM+FGF10+U0126组。采用ELISA法检测各组细胞PGE_(2)分泌水平,采用Western blot法检测各组细胞COX2的表达水平。同时进行细胞计数、线粒体功能和乳酸脱氢酶分泌分析等细胞功能检测。结果动物模型中,气道滴注PM诱导C57BL/6小鼠支气管病理形态学的改变,伴随肺泡灌洗液中PGE_(2)分泌增多(P<0.05),肺组织COX2表达升高(P<0.05),支气管上皮COX2荧光强度升高(P>0.05)。FGF10干预下,PM诱导支气管炎症和COX2/PGE_(2)表达被逆转(P<0.05)。细胞模型中,PM诱导支气管上皮细胞COX2/PGE_(2)表达水平升高(P<0.05),FGF10干预下,COX2/PGE_(2)的表达均降低(P<0.05),BEAS-2B细胞计数、线粒体功能和乳酸脱氢酶分泌等细胞功能改变(P<0.05)。就分子机制而言,LY294002和U0126逆转了FGF10对PM诱导COX2/PGE_(2)表达的调控作用(P<0.05)。结论FGF10可以调控PM对支气管上皮细胞COX2/PGE_(2)的诱导表达,其分子机制涉及MAPK/ERK和PI3K/Akt信号通路。

慢性阻塞性肺疾病激素不敏感与糖皮质激素受体核内转移的相关性

目的 研究慢性阻塞性肺疾病 （chronic obstructive pulmonary disease,COPD）对糖皮质激素不敏感是否与糖皮质激素受体 （glucocorticoids receptor,GRα）的核内转移有关。方法 将来自12例健康人、15例轻中度哮喘患者和15例COPD患者的人外周血单个核细胞 （peripheral blood molecule cells,PBMC）进行体外培养。ELISA方法检测其IL-8蛋白质水平,并计算地塞米松 （Dex）半抑制浓度。PBMC在Dex中培养0.5-6 h,通过Western blot检测GRα蛋白质水平,GRα的核内转移则通过免疫荧光和共聚焦显微镜来观测和分析评估。结果 COPD患者PBMC较轻中度哮喘患者和健康志愿者对Dex相对不敏感。Dex半抑制率 （IC50Dex）与糖皮质激素受体GRα核内转移呈负相关 （r=-0.54,P=0.000 8）。Dex可诱导增加各组PBMC中的总GRα,但GRα胞内分布各组间存在差异。Dex可明显增加健康人及哮喘患者核内的GRα,但并未增加COPD患者核内GRα。健康人及哮喘患者的PBMC中,Dex预处理能显著抑制TNF-α诱导的IL-8分泌,而在COPD患者的PBMC中这种抑制作用不明显。结论 COPD对糖皮质激素的不敏感与GRα核内转移有关。GRα核内转移受抑制可能是造成糖皮质激素在COPD患者中发挥抑制炎性作用欠佳的原因之一。

PI3K/CTGF信号通路在TGF-β1诱导A549细胞表达collagen Ⅰ过程中的作用

目的:研究磷脂酰肌醇3-激酶/结缔组织生长因子(PI3K/CTGF)信号通路在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人肺腺癌A549细胞表达I型胶原蛋白(collagen I)过程中的分子机制。方法:体外培养A549细胞,予TGF-β1刺激,观察CTGF和collagen I的mRNA和蛋白表达及PI3K信号通路的活化;PI3K抑制剂LY294002预先处理A549细胞后,观察TGF-β1刺激下CTGF和collagen I mRNA和蛋白表达的变化;CTGF特异性si RNA干扰A549细胞中CTGF的表达后,观察TGF-β1刺激下collagen I mRNA和蛋白表达的变化和PI3K信号通路的活化。结果:TGF-β1可以诱导A549细胞中CTGF和collagen I的mRNA和蛋白表达以及PI3K信号通路的活化;PI3K特异性抑制剂LY294002可以部分逆转TGF-β1诱导的A549细胞中CTGF和Collagen I mRNA和蛋白表达的升高。干扰CTGF可以降低TGF-β1诱导的A549细胞collagen I mRNA和蛋白表达,而不影响PI3K信号通路的活化。结论:CTGF是TGF-β1/PI3K信号通路调控的即刻早期反应效应蛋白,参与了TGF-β1诱导的A549细胞中collagen I表达。

PKCα对脂多糖诱导的C57BL/6J小鼠急性肺损伤中细胞自噬及焦亡的调节作用

目的:探讨蛋白激酶Cα(PKCα)在脂多糖(LPS)诱导的C57BL/6J小鼠急性肺损伤中的作用及PKCα对小鼠肺损伤过程中细胞自噬及焦亡的调控。方法:将雄性C57BL/6J小鼠随机分成空白组、DMSO组、DMSO+calphostin C组、LPS组和LPS+DMSO+calphostin C组,每组9只。按0.15 mg/kg剂量腹腔注射calphostin C预处理小鼠4 h以抑制PKCα的活化。将LPS以10 mg/kg的剂量经口气管插管滴入小鼠气道刺激24 h后收取支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺组织标本。BALF检测蛋白浓度及炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)分泌水平;肺组织HE染色后进行肺损伤病理学评分;通过Western blot及免疫组化染色检测肺组织自噬相关蛋白及NLRP3炎症小体相关蛋白的表达。体外实验中,用calphostin C(100 nmol/L)预处理RAW264.7细胞2 h后予LPS(1 mg/L)刺激6 h及24 h,分别提取细胞蛋白及RNA,Western blot检测自噬相关蛋白(LC3B和p62)及细胞焦亡相关蛋白(NLRP3、cleaved caspase-1、caspase-1和ASC)表达水平,RT-qPCR检测NLRP3炎症小体相关mRNA水平。结果:在LPS诱导的小鼠急性肺损伤中,PKCα磷酸化水平上调(P<0.05);抑制PKCα后LPS诱导的肺损伤病理学改变及肺内炎症反应显著减轻(P<0.01),细胞自噬及焦亡水平显著下调(P<0.01)。在RAW264.7细胞中,抑制PKCα也可部分逆转LPS诱导的细胞自噬及焦亡活性(P<0.05)。结论:抑制PKCα对LPS诱导的急性肺损伤C57BL/6J小鼠发挥保护作用,其保护机制涉及PKCα-自噬/焦亡信号通路。

PM诱导支气管上皮细胞炎症反应及内质网应激机制研究

目的探讨细颗粒物(PM)诱导气道炎症中支气管上皮细胞内质网应激(ERS)现象和氧化应激的调控机制。方法雄性C57BL/6小鼠用4 mg/kg PM连续气道滴注2 d,构建动物模型。获取空白组和PM组小鼠肺组织进行病理分级评分;采用Western blot法检测肺组织葡萄糖调节蛋白前体78(GRP78)和CCAAT增强子结合蛋白(CHOP)的相对表达量,采用免疫组化法检测GRP78和CHOP的累计光密度值,采用硫代巴比妥酸(TBA)法测定肺组织中丙二醛(MDA)质量摩尔浓度。获取肺泡灌洗液,ELISA法检测IL-6、IL-8和前列腺素E(PGE)的分泌水平。用100、200、400 mg/L PM和2.5 mmol/L N-乙酰半胱氨酸(NAC)、200 mg/L PM与支气管上皮细胞BEAS-2B共培养,构建细胞模型。检测各组细胞活性氧(ROS)变化。Western blot法检测NAC干预下的BEAS-2B中GRP78和CHOP表达变化,ELISA法检测炎症介质分泌水平。结果气道滴注PM诱导C57BL/6小鼠支气管病理形态学改变,肺组织GRP78、CHOP表达升高(P<0.05),肺组织MDA质量摩尔浓度升高(P<0.05),伴随肺泡灌洗液中IL-6、IL-8和PGE分泌增多(P<0.05)。细胞模型中,PM作用下各组细胞ROS表达水平均升高(均P<0.05)。NAC干预后细胞ROS表达水平降低(P<0.05),CHOP/GRP78相对表达量降低(P<0.05),IL-6、IL-8和PGE分泌水平降低(P<0.05)。结论PM诱导的支气管上皮细胞炎症中存在内质网应激现象,其调控机制为氧化应激。

慢性阻塞性肺疾病急性加重合并Ⅱ型呼吸衰竭有创机械通气治疗预后因素分析

目的探讨分析影响慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)合并Ⅱ型呼吸衰竭行有创机械通气治疗患者的预后因素。方法选择2013年10月~2015年4月收治的慢性阻塞性肺疾病急性加重合并Ⅱ型呼吸衰竭有创机械通气治疗患者的临床资料(包括年龄、性别、实验室指标、并发症及合并症等),根据此次住院的临床结局将研究对象分为存活组和死亡组,分析研究对象的各项临床资料,通过单因素和多因素Logistic回归分析,探讨影响其预后的独立因素。结果①入院后两组血红蛋白、血尿素氮、血清清蛋白、有创机械通气后PaCO2下降率是否大于31.64%、并发呼吸机相关性肺炎、并发多脏器功能不全综合征比较,差异有统计学意义(P<0.05)。②有创机械通气后PaCO2下降率是否大于31.64%、并发呼吸机相关性肺炎、并发多脏器功能不全综合征是预后的独立影响因素,PaCO2下降率是其保护因素。结论AECOPD合并Ⅱ型呼吸衰竭行有创机械通气患者并发多脏器功能不全综合征、呼吸机相关性肺炎是预后不良的独立危险因素,而PaCO2下降率>31.64%则是保护因素。

成纤维细胞生长因子10在肺损伤性修复中的研究进展

成纤维细胞生长因子(FGF)10来源于间充质细胞,介导间充质-上皮之间的信号转导,调控支气管-肺泡上皮细胞的增殖分化,在胚胎支气管-肺的形态发生过程中发挥重要调控作用。伴随组织修复和再生医学的兴起,FGF10在肺损伤中的修复能力开始受到关注,FGF10-FGF受体2b信号通路决定了FGF10靶向调控支气管-肺泡上皮的细胞特异性,在支气管-肺泡上皮的损伤性修复中发挥调控作用。然而,FGF10在肺损伤性修复中的表达调控和促进上皮修复的分子机制尚未明确,未来仍需更多研究进一步阐明其促进肺损伤性修复的分子机制。

肺泡蛋白沉积症15例临床分析

目的分析肺泡蛋白沉积症(PAP)的临床表现、辅助检查、诊断方法及治疗效果,以提高临床医生对该疾病的认识。方法回顾性分析2005~2019年15例PAP住院患者的临床资料(包括年龄、性别、职业暴露、临床症状及体征、辅助检查、治疗方法等)。结果患者临床表现主要为咳嗽、呼吸困难、胸闷,肺功能提示弥散功能下降,影像学检查主要表现为双肺间质性改变,典型特征为“铺路石征”“地图征”改变。确诊主要依靠肺活检或肺泡灌洗液病理明确。9例患者进行全肺灌洗术治疗,1例患者接受雾化吸入治疗。治疗后临床症状均有缓解。结论PAP是一种少见的间质性肺病,由于其缺乏特异性的临床表现,在诊断PAP时常常出现误诊漏诊。熟悉掌握PAP的临床表现及影像学特征,可以减少PAP的误诊漏诊,更好地服务临床。

急性肺损伤小鼠肺组织CCL20的表达及其在巨噬细胞炎症反应中的作用

目的观察趋化性细胞因子CCL20在急性肺损伤小鼠肺组织中的表达,研究气道及肺泡上皮细胞CCL20表达的调控及其在巨噬细胞炎症反应中的作用。方法采用气道滴注脂多糖(LPS)建立小鼠急性肺损伤模型,通过HE染色观察小鼠肺组织炎症反应,免疫组化染色观察小鼠肺组织CCL20的表达,同时利用qRT-PCR检测肺组织中CCL20 mRNA表达水平。并设置细胞实验,分别以LPS、TNF-α和IL-1β刺激人气道上皮细胞16HBE和肺泡上皮细胞A549,qRT-PCR检测CCL20 mRNA表达水平;并以CCL20刺激小鼠单核巨噬细胞RAW264.7,qRT-PCR检测炎症因子单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、IL-6、环氧合酶2 mRNA表达水平。结果与对照组比较,造模组小鼠肺组织炎症反应显著加重;免疫组化显示肺组织CCL20蛋白的表达在气道上皮细胞更为明显;造模组小鼠肺组织CCL20 mRNA表达水平较对照组升高(P<0.01)。同时发现,LPS、TNF-α、IL-1β刺激后人气道上皮细胞16HBE及肺泡上皮细胞A549 CCL20 mRNA表达水平较对照组均升高(均P<0.01),重组CCL20蛋白刺激4 h后小鼠单核巨噬细胞RAW264.7 MCP-1 mRNA表达水平较对照组升高(P<0.05)。结论气道上皮来源的CCL20在急性肺损伤中表达水平显著升高,其表达受LPS、TNF-α和IL-1β多种炎症因子的调控,CCL20在巨噬细胞介导的炎症反应中发挥了一定作用,可为未来急性肺损伤的诊治靶点研究提供新的思路。

NOX-4型NADPH氧化酶在肺部疾病中的研究进展

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4（NOX-4）主要经介导活性氧簇（ROS）的产生发挥生物学作用，参与自身稳态维持、炎症免疫反应、组织修复、肿瘤恶性转化等，异常NOX-4导致的氧化应激是不同肺部疾病共同的病理生理特点。本文检索了近年来NOX-4在急性肺损伤、气道阻塞性疾病、问质性肺病、肺动脉高压和非小细胞肺癌等的文献报道，就NOX-4在不同肺部疾病中的差异调控、致病机制研究进展作一综述，以期为肺部疾病的诊治揭示新的靶点。

PI3K/Akt信号通路在肿瘤坏死因子α诱导肺泡上皮细胞表达IL-22BP中的作用

目的 研究磷脂酰肌醇3-激酶 （PI3K）信号通路在肿瘤坏死因子α （TNF-α）诱导肺泡 上皮细胞表达白介素22结合蛋白 （IL-22BP）的分子机制。方法 体外培养肺泡上皮细胞 A549细胞, 给予脂多糖、干扰素γ和 TNF-α刺激,观察IL-22BP的 mRNA 和蛋白表达的变化及 PI3K 信号通路的 活化;PI3K 抑制剂 LY294002预先处理 A549细胞,观察 TNF-α刺激IL-22BP 的 mRNA 和蛋白表达 的变化。结果 TNF-α可以诱导 A549细胞中IL-22BP的 mRNA 和蛋白表达升高以及 PI3K 信号通路 的活化;PI3K 特异性抑制剂 LY294002可以逆转 TNF-α诱导 A549细胞中IL-22BP 的 mRNA 和蛋白 表达的升高。结论 炎症因子 TNF-α可以诱导 A549细胞IL-22BP的表达升高,PI3K 信号通路参与了 TNF-α诱导IL-22BP的信号转导过程。