CATIAV5结构设计库的构建与使用

介绍CATIA Structure Design模块在客车车身骨架设计中的应用;结合客车行业的特点,利用批处理语言进行型材库的开发,并给出主要的程序代码。

基于CATIA二次开发的车身骨架建模

介绍CATIA的VBA二次开发技术,结合客车车身骨架的结构特点,建立客车车身骨架三维建模平台,并给出部分程序代码。

尾静脉注射及皮下接种B-LCL细胞建立EB病毒相关淋巴瘤动物模型的比较研究

目的:构建绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)和荧光素酶(luciferase,Luc)双标记的EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)感染的人B淋巴母细胞系(B lymphoblastoid cell lines,B-LCL)应用于肿瘤模型,并比较尾静脉注射和皮下注射人B-LCL细胞建立小鼠模型的优缺点。方法:通过二代慢病毒转染、嘌呤霉素筛选构建GFP/Luc双标的B-LCL细胞系(B lymphoblastoid cell lines double-tagged with GFP and Luc,B-LCL-GL),接种低、中和高3种剂量的细胞至NPG[(NOD)/Prkdcscid/IL-2Rγ^(null)]小鼠皮下或尾静脉内,建立皮下移植瘤模型与血行性转移瘤模型并成像分析。结果:B-LCL-GL细胞中的GFP阳性细胞比例为92.5%,荧光素酶平均发光强度为4.80E+08 Photons/s,远高于B-LCL组。在血行性转移瘤模型中,连续成像结果表明从第7天到第28天随着肿瘤移植时间的延长,肿瘤最先定植在腹腔后又转移到全身。在皮下移植瘤模型中,第7天时3组小鼠均可以检测到肿瘤细胞在小鼠皮下接种处发出了中心强、周围弱的荧光信号,第28天时高剂量组肿瘤转移到全身。相同接种剂量分别通过尾静脉和皮下接种时,肿瘤生物发光均无显著性差异(P>0.05);小鼠存活情况显示低、中、高各剂量尾静脉注射组在第100天时全部死亡,低剂量和中剂量皮下注射组小鼠带瘤生存长达100天且未出现小鼠死亡,可允许更长时间进行实验。结论:成功构建GFP/Luc双标的B-LCL细胞系,尾静脉注射和皮下注射异种移植B-LCL细胞两种方法均可成功建立EBV-LCLs肿瘤模型,并可通过成像示踪定位和精准定量肿瘤大小,为肿瘤特性研究及抗肿瘤药物筛选提供了研究平台。

标准化管理在石油物探车辆管理中的应用

随着社会经济的不断发展,石油的使用率也在不断提高,进而在石油物理勘探的过程中,物探车辆设备的投入也明显增加,在这样的情况之下,对石油物探车辆管理实现其标准化是极其重要的。论文对标准化管理如何应用于石油物探车辆管理中进行探讨。

基于Creo和Hyperworks二次开发的支架厚度尺寸优化平台

通过对Creo和Hyperworks进行二次开发,设计了Creo和Hyperworks之间的数据交换方法,建立了可直接在Creo CAD软件中自动进行支架厚度优化设计的平台。

基于超单元法的动力电池舱结构优化设计

通过超单元法,将电动客车动力电池舱分割成待求的子结构,并通过拓扑优化和尺寸优化对其进行轻量化设计。在优化设计中使用超单元法,能大大提高计算效率。

发动机罩的冲压工艺性及形貌的优化设计

采用有限元分析对发动机罩进行冲压工艺性及形貌的优化设计,提高了发动机罩的冲压性能和刚度。

中置电涡流缓速器在前置中型客车上的应用

针对山区客运市场对于装有电涡流缓速器的前置中型客车的需求,本文介绍一种电涡流缓速器在前置中型客车上的布置方案,并具体介绍该方案相关的设计细节。

HIV-1感染小鼠动物模型建立及体内整合前病毒定量分析

近年来,多种新型抗人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)疗法如基因治疗、广谱中和抗体以及衍生的嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor modified T cell,CAR-T)疗法均迫切需要理想的动物模型及用于精准定量病毒基因组的方法。本研究通过双标HIV假病毒构建及感染获得HIV-?ENV-Jurkat-EGFP-m Cherry稳转细胞,并以该细胞基因组作为整合前病毒的标准品,建立巢式荧光定量PCR (nested quantitative polymerase chain reaction,nested-q PCR)定量HIV整合前病毒。通过尾静脉注射健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)到NOD/Prkdcscid/IL2rgnull (NPG)小鼠,通过监测小鼠外周血中h CD45+、h CD3+、h CD4+和h CD8+人源化细胞的比例来判断人源化小鼠模型构建是否成功。腹腔注射HIV NL4-3-Nano Luc病毒,随后通过小动物活体成像及分子病毒学评价HIV体内复制,结果表明,尾静脉注射正常人PBMC细胞至小鼠内3-5周后,实验组小鼠体内均检测到人源免疫细胞的浸润,建模5周后的人源化小鼠外周血中h CD45大于25%,即人源化小鼠模型构建成功。感染27 d后小动物活体成像能检测到病毒相关萤光素酶蛋白表达,分子病毒学结果表明在脾脏中病毒总DNA、RNA和整合前病毒DNA分别达到了18 000 copies/10^(6) cells、15 000 copies/μg RNA、15 000 copies/10^(6) cell。本研究证明了通过尾静脉注射正常人PBMC,可成功建立Hu PBMC-NPG/严重联合免疫缺陷(severe combined immunodeficiency,SCID)人源化小鼠模型,并且HIV病毒可成功感染该模型。本研究建立了有效测定HIV整合前病毒DNA的方法,为艾滋病体内复制水平及病毒库大小和对多种新型抗HIV疗法的治疗效果的评价奠定了基础。

靶向HIV-1的Cas13a/crRNA的快速筛选和抗病毒活力测定

目前基于规律成簇的间隔短回文重复(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)/CRISPR相关蛋白(Cas)系统的基因治疗在遗传病、肿瘤及感染性疾病等领域均取得重大突破,其中Cas13a属于VI型CRISPR系统,Cas13a蛋白在HIV感染细胞内crRNA的引导下定位目标RNA,切割核酸,同时激活Cas13a蛋白的附属效应(Collateral effect)可高效切割细胞内非特异性单链RNA,从而诱导感染细胞凋亡,进一步破坏病毒库,是最有可能功能性治愈HIV的策略。本研究旨在筛选靶向HIV-1的高灵敏度crRNA,进一步探索组合不同crRNA对HIV-1的抑制效果,并在细胞转染水平证明Cas13a/crRNA系统的附属切割活性及其诱导细胞凋亡。在LANL数据库中比对HIV-1各亚型毒株序列,获得各功能蛋白高度保守区。同时,结合HIV数据库中RNA的剪接供体及受体位点信息;然后利用MPRDOCK软件进行crRNA与LwCas13a的分子对接并计算结合复合物的自由能大小选定一组crRNA池;再以荧光标记RNA探针与LwCas13a蛋白组成可视化检测体系,以FAM荧光信号强弱确定了最有效的crRNA。构建LwCas13a和crRNA的共表达质粒,通过共转染HIV全长感染性克隆质粒和含单个或多个crRNA组合的LwCas13a的表达质粒到HEK293T细胞中,根据转染细胞及其上清再感染细胞中萤光素酶和病毒结构蛋白RNA表达水平来判定CRISPR-Cas13a系统对HIV基因表达的抑制效率。初步筛选出优选的27条crRNA并结合切割荧光强弱从中筛选出8条高灵敏度crRNA。细胞共转染实验表明,靶向病毒结构基因的单个crRNA,crGag2,crPol1,crA53能降低HIV-1子代病毒RNA表达降低了43.2%~58.3%,同样,再次感染实验也证明子代病毒活性滴度降低了38%~74.6%。进一步的结果证明,4个crRNA(crD15,crA53,crGag2,crPol1)联用比单个crRNA表达降低了86.4%,比两个crRNAs降低了64.9%,同时在共转染HEK293T细胞中观察到Cas13a蛋白的附属切割活性及其诱导细胞凋亡。我们建立的CRISPR/Cas13a系统能够显著抑制HIV病毒复制和子代病毒产生并诱导细胞凋亡,为HIV的治疗提供了一种新的工具。

丰田(TOYOTA)ABS/TRAC控制系统控制电路的检测(续二)

2 TRAC控制系统电路检测 2.1 TRAC制动主继电器电路的检测 TRAC制动主继电器电路如图26所示。TRAC制动主继电器电路用来向TRAC隔离电磁阀总成(TRAC制动执行器)中各隔离电磁阀供电。当点火开关置于“ON”位置时,TRAC制动主继电器闭合。若该继电器电路中存在故障,ECU便停止向TRAC制动主继电器供电,闭锁驱动防滑转控制功能。

丰田(TOYOTA)ABS/TRAC控制系统控制电路的检测(待续)

《汽车维护与修理》1997年第8期和第9期详细介绍了丰田(TOYOTA)ABS/TRAC控制系统,为补其不足,我们以丰田凌志(IEXUS)LS 400型轿车为例具体介绍丰田(TOYOTA)ABS/TRAC控制系统控制电路的检测方法。 1

丰田(TOYOTA)ABS/TRAC控制系统控制电路的检测(续一)

1.5 ABS电动回液泵电路的检测 ABS电动回液泵电路见图9。在ABS工作时,电动回液泵继电器接通,ABS电动回液泵连续运转。在电动回液泵继电器断开时,ABS/TRAC ECU根据MT端子上的电压变化来感知电动回液泵闭锁和接地情况。ABS电动回液泵闭锁和地线断路时将出现故障代码“51”。

丰田(TOYOTA)ABS/TRAC控制系统控制电路的检测(续完)

2.7 主节气门开度传感器电路检测主节气门开度传感器电路如图32所示。此电路与TRAC控制系统有直接关系,因它出现故障时对TRAC控制系统有影响,所以用它来关断TRAC系统,可以起故障保护作用。该电路出现故障时将出现故障代码“45”或“46”。

检测诊断技术在汽车二级维护中的应用

叙述了二级维护前的检测诊断项目。

夏利轿车四缸电喷发动机废气排放控制系统及其检测

天津夏利轿车四缸电喷发动机使用的废气排放控制系统主要有电子控制燃油喷射系统、曲轴箱强制通风系统和燃油蒸发排放控制系统等，各系统的主要功能如表1所列，其主要部件在车上的安装位置如图1所示。图2所示为废气排放控制原理图。