病理技术学科的规范化与质量控制

常规病理制片技术、免疫组化技术、分子病理学技术,这3大技术的发展和应用为病理学认识疾病、鉴别疾病、揭示疾病的本质并指导疾病的治疗奠定了技术基础。3大技术的规范化、病理技术人才队伍的建设、科学统一的管理制度是病理技术学科建设和发展目前亟需关注的问题。

“校企合作”是高职“双师型”师资队伍建设的重要途径

"双师型"师资队伍的建设是高等职业技术教育发展的关键。高职院校与企业建立"产一学一研"结合的合作关系,将教师派到企业参加实践,聘请企业人员任兼职教师及与企业合作进行科研及项目开发,对于建设高素质的"双师型"师资队伍,进而推动学校的改革与发展,是十分必要的。

黄河大柳树河段水情实测结果分析

对黄河大柳树河段19个典型代表断面的流速、水深分布等情况进行了分析。结果表明:1大柳树河段各断面水位从上游至下游呈下降趋势,相对窄深的断面水流相对湍急,相对宽浅的断面水流相对平稳,天然弯道河段的河床变化符合凹岸冲刷、凸岸淤积的水沙基本运移规律;2大柳树河段河面相对狭小,水流相对湍急,部分河段的平均流速可达2m/s;3大柳树河段弯道上的流速分布符合自由涡和强迫涡定律,断面流速与水深基本保持正相关关系,且弯道入口处靠近凸岸的水深相对较深,流速也较大,当弯道中心角较大时平均流速的最大值逐渐由凸岸向凹岸转移。

煤矿变频调速与节电技术研究

邯郸矿业集团通过近几年的实践,在提升、通风、压风、供水等系统经过变频技术改造,不仅获得良好的调速性能,而且还节约了电力成本,减少了能源浪费,创造了良好的社会经济效益。

γ-干扰素转基因表达对不同时期博莱霉素致小鼠肺间质纤维化的作用

目的 探讨小鼠γ -干扰素 (mIFN -γ)在气道上皮细胞局部转基因高效表达对不同时期博莱霉素致小鼠肺间质纤维化的治疗作用。方法 选择 4周龄的雄性ICR小鼠 (2 5g左右 ) ,使用博莱霉素诱导小鼠肺间质纤维化。将小鼠分为 5组 ,阳性对照组 (PC)为吸入博莱霉素组 ,阴性对照组 (NC)为经鼻吸入生理盐水组 ,基因治疗A、B、C组分别于博莱霉素刺激后 7、14和 2 1d给予小鼠滴入含有小鼠γ -干扰素cDNA片段的重组复制缺陷型腺病毒 (AdCMVmIFN -γ) 5× 10 8空斑形成单位(pfu/mL) ,在给予腺病毒后 2周处死小鼠 ,收集小鼠肺组织及肺泡灌洗液 (BALF) ,右肺经HE和Mas son染色 ,左肺匀浆后检测羟脯氨酸含量。结果 经气道给予AdCMVmIFN γ处理的转基因组小鼠BALF中均可测得高浓度mIFN -γ表达 ,其水平在基因治疗A组 (GTA)、基因治疗B组 (GTB)和基因治疗C组 (GTC)分别为 (895 4 . 6 8± 85 3 .88)pg/mL、(9312. 6 4± 36 1 2 .8)pg/mL和 (96 4 3. 32± 6. 12 74 )pg/mL。博莱霉素刺激后第 7d时给予小鼠mIFN γ转基因处理 (GTA组 ) ,小鼠肺间质纤维化程度和羟脯氨酸含量为 (12 6 7. 0 9± 37 .0 7) μg ,与阳性对照组的 (12 4 4 . 86± 6 2. 4 6 ) μg相近 ,而于14d(GTB组 )和 2 1d(GTC组 )后给予小鼠mIFN- γ转基因?

乳腺癌中PCNA表达及其与组织学分级的关系

采用抗ＰＣＮＡ单克隆抗体ＰＣ１０，对９６例乳腺良恶性病变组织进行免疫组化表达研究。其中乳腺增生性病变３１例，乳腺非典型增生１５例，乳腺癌Ⅰ级１２例，Ⅱ及２３例，Ⅲ级１５例。结果显示：ＰＣＮＡ染色强度指数良性病变为３９．８０，非典型增生４０．７１，Ⅰ级乳腺癌５４．５８，Ⅱ级６６．８３，Ⅲ级１０８．７４．各级乳腺病变之间可见差异有高度显著性（Ｐ＜０．０１）。表明ＰＣＮＡ指数与乳腺病变及乳腺癌组织的分级有密切关系。

左旋多巴对形觉剥夺性弱视猫视皮层17区神经生长因子的影响

目的观察左旋多巴对猫形觉剥夺性弱视的治疗作用及其对视皮层17区神经生长因子(NGF)表达的影响。方法18只4周龄幼猫分为正常组、单眼剥夺组、左旋多巴组,每组6只。通过单眼眼睑缝合制备形觉剥夺弱视模型,观察不同干预条件下各组视觉诱发电位(P-VEP)的P1隐含值及波幅,应用免疫组织化学法测定各组视皮层17区NGF的差异。结果单眼剥夺组剥夺眼P100波隐含值延长,波幅降低,与正常组及对侧眼比较,差异均有统计学意义(P<0.01),左旋多巴组双眼P-VEP各指标与正常组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。剥夺组视皮层NGF免疫阳性细胞密度为80.23±9.54,正常组为111.83±7.49,2组比较差异有统计学意义(P<0.01);左旋多巴组为118.06±12.37,与正常组比较差异无统计学意义(P=0.94)。结论敏感期内剥夺性弱视幼猫视皮层17区NGF的表达减弱。左旋多巴干预治疗后,NGF表达明显增加,弱视眼P-VEP明显改善,左旋多巴能促进实验猫弱视眼的视功能改善。

高迁移率蛋白A2在浆液性卵巢癌中高表达及其与let-7家族microRNA的关系

目的:检测高迁移率蛋白A2(high mobility group A2,HMGA2)、let-7家族microRNA和P53在浆液性卵巢癌中的表达,分析HMGA2和let-7家族microRNA的关系,比较HMGA2与P53在浆液性卵巢癌中的表达情况。方法:用免疫组织化学方法检测50例卵巢癌和4例正常输卵管石蜡包埋标本中HMGA2和P53蛋白的表达,采用实时荧光定量逆转录-PCR方法检测对应标本以及卵巢癌细胞系中HMGA2 mRNA和let-7家族microRNA的表达。结果:HMGA2和P53在浆液性卵巢癌中免疫组织化学染色阳性率分别为70%(35/50)和78%(39/50)。HMGA2在输卵管纤毛上皮中有微弱表达,在分泌型上皮细胞中不表达;HMGA2的表达存在随着肿瘤病理分级的增高而增高的趋势,但与肿瘤临床分期没有关系。HMGA2 mRNA在所有卵巢癌标本中均能检测到,但在72%(36/50)的标本中表达量高于正常输卵管组;恶性程度高的细胞系(SKOV3.ipl)比恶性程度低(SKOV3)的细胞系HMGA2 mRNA表达更高。let-7家族各成员在所有浆液性卵巢癌标本中均表达,其表达量与HMGA2 mRNA呈低度负相关(r=-0.305,P<0.05)。结论:HMGA2可能与P53一样,可以作为浆液性卵巢癌的生物标志物,其表达与浆液性卵巢癌恶性程度有关。let-7表达降低是HMGA2在浆液性卵巢癌中高表达的一种、但非唯一机制。

过敏原所致小鼠气道高反应性的动态演变和布地奈德干预对其的影响

目的观察哮喘模型小鼠气道高反应性动态演变过程,探讨雾化吸入布地奈德后的疗效.方法 36只雌性BALB/c小鼠随机分组,阴性对照组(C组)腹腔注射氢氧化铝凝胶[Al(OH)3];其余用卵白蛋白(OVA)诱导制备哮喘模型.①分别于实验第15、18、21和25 d(分别为A1、A2、A3和A4组)测定小鼠在不同氯化乙酰甲胆碱(MCH)剂量下的潮气量(VT)、呼气相气道阻力(RA)和胸肺动态顺应性(CT-L),并观察肺组织病理变化.C组第15 d测定上述肺功能指标后处死.②于第15～17 d给予1 mg布地奈德混悬液雾化吸入(B组),每日1次,第18 d同A2组一起检测呼吸生理及病理变化.结果①MCH 200 ng/g时,A1、A2、A3组小鼠RA增长率明显大于C组.②MCH 100 ng/g和200 ng/g时,A1、A2组小鼠CT-L下降率均较C组明显.③MCH 100 ng/g时,A2组VT下降率大于C组;MCH 200 ng/g时,A1、A2、A3、A4组小鼠VT下降率均大于C组.④模型小鼠气道周围和血管旁可见以嗜酸粒细胞为主的大量炎性细胞浸润,以A1组最明显,随时间延长而逐渐减轻.⑤MCH 200 ng/g时,B组RA增长率明显小于A2组,与C组间差异无显著性;MCH 100和200 ng/g时,B组CT-L下降率均低于A2组,但与C组间差异无显著性;B组VT下降率明显小于A2组,但与C组间差异无显著性;B组经布地奈德治疗后肺部炎性浸润明显减轻.结论 MCH可增加模型小鼠的RA和降低CT-L,并持续7 d左右;布地奈德混悬液雾化吸入可明显减轻模型小鼠的气道炎症和气道高反应性.

辣椒素受体在银屑病皮损中的表达及其意义

目的:探讨辣椒素受体(TRPV1)在银屑病皮损中的表达及其意义。方法:采用半定量RT-PCR检测12例银屑病皮损和10例正常皮肤中TRPV1的mRNA表达;用免疫组化方法检测TRPV 1在32例寻常性银屑病患者皮损及20例正常人皮肤组织中的表达水平。结果:半定量RT-PCR结果显示银屑病皮损中TRPV1的mRNA水平较正常皮肤表达下降[为正常皮肤的(69.8±4.3)%,P<0.05];20例正常皮肤的表皮角质形成细胞均有TRPV1蛋白表达(100%),32例银屑病皮损的表皮角质形成细胞TRPV1蛋白表达显著下降(P<0.05)。结论:辣椒素受体在银屑病皮损的表皮角质形成细胞中表达下降,其可能参与银屑病皮损的形成。

乳腺肿物Bcl-2表达与激素调节的相关研究

用免疫组化方法，观察乳腺癌及良性病变是否有Bcl－2表达；Bcl－2表达及丧失与激素受体的相关性；Bcl－2表达与肿瘤分级的关系等。结果发现Bcl－2表达与ER、PR、肿瘤组织分级显著相关，Bcl－2表达阳性的乳腺癌多伴有ER＋（75％）、PR＋（70％），而Bcl－2阴性表达与预后较差的分子标志呈正相关，即ER、PR阴性率高、组织分级高。我们的发现支持了乳腺癌Bcl-2表达受激素调节的假说。

乳腺肿物Bcl-2表达与激素受体的相关研究

研究利用免疫组化方法，观察乳腺癌及良性病变是否有Bcl－2表达；Bcl－2表达及丧失与激素受体的相关性；Bcl－2表达与肿瘤分级的关系等。结果发现Bcl－2表达与ER、PR、肿瘤组织分级显著相关，Bcl－2表达阳性的乳腺癌多伴有ER＋（75％）、PR＋（70％），而Bcl－2阴性者ER、PR表达也少。因此乳腺癌中Bcl－2阴性表达与预后较差的分子标志呈正相关，即ER、PR阴性率高，组织分级高。我们的发现支持了乳腺癌Bcl－2表达受激素调节的假说。

主提系统扩能技术改造方法

针对临漳矿现有条件下主提系统,仔细分析并确定改造原则和技术关键,围绕核心问题对相关配套设备设施进行了更新改造,介绍了主提系统扩能的技术改造方法,解决了影响矿井产能提高的提升环节问题。

面向“碳中和”能源互联网的风光储联动配置算法

我国提出了争取在2060年前实现“碳中和”的目标。为实现该目标,以新能源和可再生能源为主体的能源互联网建设必不可少。合理地配置风光储设施,可以使设备的使用率最大化,同时满足碳中和的需求。文中提出了一种碳中和场景下的能源互联网配置方法。该方法首先对风能、光伏和储能分别建模,确认出力的计算公式和约束条件。然后进行能源可靠性研究,确定满足负荷需求的风光储配置方程,计算得出所有的可行解,然后利用迭代的思路,对解进行优化。最后,将碳经济性约束条件纳入考虑因素,得出净现值最低的最优解。文中以天津中新生态城气象数据为依据,对算法的有效性和结果进行了验证,并与常见的粒子群算法、禁忌搜索进行了比较。实验表明,本文算法有更快的计算速度和更高的收敛精度。

氧诱导小鼠视网膜新生血管的实验研究

目的制作氧诱导视网膜新生血管的小鼠动物模型并了解其视网膜血管内皮生长因子(VEGF)的变化。方法将出生后第7d的C57BL/6J小鼠置于75%的高氧环境中5d,再置于普通空气中5d。在空气中饲养的小鼠为对照组。两组进行视网膜铺片,ADPase染色,组织切片染色,ELISA测定视网膜VEGF蛋白含量。结果实验组新生血管形成率为100%,对照组未见新生血管。实验组小鼠生后第17d时突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核数目达(46.7±11.1)个,对照组不足2个。第12d实验组视网膜VEGF蛋白水平比对照组下降,第17d比对照组升高。结论该动物模型是研究早产儿视网膜病变(ROP)发病机制及治疗的合适模型。VEGF是造成视网膜新生血管发生的主要机制之一。

海马局部注射人骨髓间充质干细胞对癫痫持续状态后大鼠视空间记忆的影响

目的探讨海马局部移植人骨髓间充质干细胞(hMSC)对癫痫持续状态(SE)后大鼠视空间记忆功能的影响。方法雄性SD大鼠随机分为hMSC移植组、人成纤维细胞组、磷酸盐缓冲液(PBS)组、假手术组和正常对照组,采用氯化锂-匹罗卡品诱导SE模型。SE 3 d后通过立体定位方法分别向海马CA1区注射hMSC(1.5×107个/ml)、人成纤维细胞(1.5×107个/ml)和PBS各3μl,假手术组不进行立体定向注射。2周后部分大鼠行灌流取脑组织,MAB1281免疫组化染色观察示踪细胞。剩余大鼠在4周后进行水迷宫实验。结果免疫组化染色显示仅在hMSC移植组见到CA1区有染棕黄色的细胞,而人成纤维细胞组、PBS组和假手术组均未见到染色阳性细胞。水迷宫试验显示hMSC移植组的逃逸潜伏期短于人成纤维细胞组和PBS组,仅略长于假手术组,虽与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),但除正常对照组以外,其余4组组间两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论hMSC可在SE大鼠海马CA1区局部存活,移植后4周未发现hMSC能明显改善SE大鼠的视空间记忆功能。

热应激对慢性粒细胞白血病细胞系K562中热休克蛋白gp96表达的影响及其意义

本研究查明不同热应激条件对慢性粒细胞白血病细胞系K562细胞中热休克蛋白gp96表达量的影响,为寻找增加K562细胞中gp96的提取量的最佳热应激条件提供实验依据。用免疫组织化学方法检测经38、40、42、44、46及48℃水浴热休克处理30分钟后的K562细胞中gp96表达量的变化;以平均阳性细胞百分率和平均荧光强度为指标,用流式细胞术研究40、44、48及52℃各水浴热休克处理30分钟对K562细胞中gp96表达量的影响;利用免疫印记原理,用Westernblot技术研究K562细胞经40、44、48与52℃水浴各休克处理30分钟后gp96表达量的变化。结果表明免疫组织化学方法显示gp96主要在胞浆内表达,在48℃水浴热休克处理30分钟时,强阳性的细胞数最多,积分也最高;流式细胞术显示平均阳性细胞百分率和平均荧光强度均在48℃水浴热休克处理30分钟组达高峰,各温度间gp96表达量的差异有统计学意义;Westernblot显示48℃水浴热休克处理30分钟时gp96的表达量达到高峰,各温度间gp96表达量的差异有统计学意义。结论48℃水浴热休克处理30分钟,gp96在K562细胞中的表达量达到高峰,该条件可作为提取K562细胞gp96的一个有效预处理条件。

多次大剂量贝伐单抗结膜下注射抗兔眼小梁切除术后瘢痕化研究

背景贝伐单抗是第一个完整长度的人抗血管内皮生长因子（VEGF）单克隆抗体，已作为抑制新生血管的药物而广泛用于眼科临床。然而，作为小梁切除术后抑制伤口及滤过泡的纤维化及抗血管生成的药物，贝伐单抗多次大剂量使用的安全性和有效性尚待评估。目的评估大剂量贝伐单抗结膜下多次注射抗小梁切除滤过术后滤过泡瘢痕化的安全性及有效性。方法采用自身双眼配对的研究设计。对新西兰白兔18只36只眼行小梁切除术滤过手术，动物左眼在术后即刻及术后第3、5、7天于滤过泡结膜下注射25g／L贝伐单抗0．1ml，右眼术后不进行注射作为对照眼。术后间隔2d裂隙灯下观察滤过泡形态并根据Moorefield滤过泡分级系统进行分级。分别于术后第10、20、30天各摘除12只眼球行苏木精一伊红染色评估细胞的性质，用Masson染色评估成纤维细胞化程度，并以抗血管性血友病因子（anti-vWf）免疫组织化学染色评估每组兔眼的血管化程度。结果与对照组相比，贝伐单抗治疗眼的滤过泡大且更为弥漫，术后第7天贝伐单抗治疗组与自身对照组眼滤过泡面积分别为（2．48±0．22）cm。和（1．73±0．27）em。，差异有统计学意义（t=5．194，P〈0．05）。贝伐单抗治疗眼的滤过泡生存天数（21．O¨0±1．56）d与对照组（12．50±1．97）d相比明显延长，差异有统计学意义（P=0．005）。组织学及免疫组织化学分析证实，与对照组相比，在术后20d时，贝伐单抗治疗眼的滤过泡及邻近组织结膜的血管化程度明显减少，2组间vWf阳性染色吸光度值的平均差值为14320．7±4134．9，差异有统计学意义（t=12．275，P〈0．05）；而术后30d时贝伐单抗治疗眼的成纤维细胞沉积明显减少，2组间成纤维细胞阳性染色面积的平均差值为0．27±0．03，差异有统计学意义（t=15．980，P〈0．05）。结论兔眼小梁切除术后多次结膜下注射贝伐单抗可有效地延长滤过泡的生存时间，在术后30d贝伐单抗能减轻滤过泡和邻近结膜组织的血管化程度。此外，贝伐单抗在术后滤过泡及邻近组织血管化的末期可显著抑制成纤维细胞介导的组织增生。

口腔鳞癌中CD24的表达、作用和治疗靶点价值

目的:明确口腔鳞癌组织和细胞中黏液素样细胞表面黏附分子CD24的表达模式、作用及其作为治疗靶点的潜在价值。方法:利用免疫组化、real-time RT-PCR和Western blot方法,明确CD24在78例人口腔组织标本和59例动物模型金地鼠(Hamster buccal)颊囊组织标本,以及口腔癌前病变上皮细胞DOK4、口腔鳞癌细胞CAL-27和WSU-HN6中的表达模式;以CAL-27和WSU-HN6细胞为模型,明确在常规和无血清成球培养条件下,全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)和CD24抗体对CAL-27和WSU-HN6细胞及肿瘤球生长的影响,并观察它们是否影响这两种细胞中CD24的表达。结果:人和金地鼠组织的免疫组织染色结果显示,在正常/单纯增生组织、轻度/中度异常增生组织、重度异常增生和鳞癌组织中均依次呈现CD24表达递增的现象(P<0.05);与DOK细胞相比较,CAL-27和WSU-HN6口腔鳞癌细胞中CD24表达上调(P<0.05)。相对于癌前病变细胞DOK,口腔鳞癌细胞CAL-27和WSU-HN6具有更强的增殖和肿瘤球成球的潜能(P<0.05)。ATRA能够有效地抑制这两种口腔鳞癌细胞的CD24表达、体外增殖和肿瘤球形成的能力(P<0.05),而CD24抗体虽然也一样能够抑制口腔鳞癌细胞的增殖和肿瘤球形成(P<0.05),但却不影响其CD24的表达。结论:CD24在口腔鳞癌中表达上调,具有促进口腔鳞癌细胞增殖和肿瘤球形成的作用,维甲酸和CD24抗体皆能以CD24为靶点有效地抑制口腔鳞癌细胞的增殖和肿瘤球形成。

HSCs改善糖尿病小鼠血-视网膜屏障功能的研究

目的探讨自体造血干细胞动员是否可使成体造血干细胞(HSCs)环境诱导分化,修复受损的视网膜微血管内皮细胞,使血-视网膜屏障得到功能性重建。方法糖尿病小鼠和正常小鼠各分为干细胞动员组和生理盐水对照组。流式细胞术以CD34-/low和sca1+为标记鉴定外周血HSCs。小鼠视网膜病理切片行苏木精-伊红染色观察和VEGF免疫组织化学分析,伊文思蓝定量检测血-视网膜屏障的破坏程度。结果自体干细胞动员使糖尿病小鼠视网膜的VEGF表达量明显下降。糖尿病小鼠经干细胞动员后清蛋白的渗出量明显下降(P=0.033)。结论自体HSCs动员可以通过外周血干细胞倍增使血-视网膜屏障得到一定程度的功能性修复。