微生物乙酰辅酶A羧化酶及其抑制剂的研究进展

乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl-CoA carboxylase,ACCase)在微生物生长和脂肪酸合成代谢中发挥着重要作用。本文系统介绍了微生物ACCase的分类、结构与功能、代谢作用和抑制剂研究等方面的进展。微生物ACCase类型主要分为真核型(同质型)和原核型(异质型)两大类,分别以酿酒酵母ACCase和大肠埃希菌ACCase为代表。结构与功能研究主要集中在对异质型ACCase的BC和CT亚基的晶体学、作用位点等方面。许多研究表明ACCase在微生物的生长和脂肪酸合成中发挥着关键作用,ACCase活性减弱和丧失会导致菌体生长减缓或无法存活,脂肪酸的合成也明显减弱。面对临床上越来越多的抗药菌,以微生物ACCase及其亚基作为抗生素筛选靶标,成为筛选和合成新抗生素的重要方向,目前已取得一定进展。

基于导师制的药学专业课程开放实验教学新模式

传统的实验教学模式很难适应行业企业对高素质药学人才的需求。从传统实验教学模式存在的问题、导师制开放实验教学模式的设计、实施和成效等方面,探讨以导师制为基础、以开放式科研平台为载体的药学专业课程开放实验教学新模式的建立。

抗体药物专业应用型人才培养的探索

以聊城大学药学院为例,围绕抗体药物应用型人才培养,介绍聊城大学药学院在双师型师资建设、特色课程设置和产学研人才培养模式方面的有益实践,这些探索将为我国抗体药物应用型人才培养提供借鉴和范例。

ε-聚赖氨酸高产菌株的选育

依据传统诱变理论和白色链霉菌生物合成ε 聚赖氨酸的特点 ,确立了以枯草芽孢杆菌为敏感菌株 ,抗性突变株筛选和抑菌圈法相结合的初筛方法。在优化诱变条件的基础上 ,以白色链霉菌为出发菌株 ,经紫外线与硫酸二乙酯诱变 ,选育出一株遗传性状稳定 ,遗传标记为AECr+Glyr的ε 聚赖氨酸生产菌株 ,其产量可达 0 79g/L。

搅拌转速和pH对ε-聚赖氨酸发酵的影响

采用 5L自控式发酵罐研究了ε 聚赖氨酸分批发酵过程中搅拌转速和pH对发酵指标以及菌体细胞形态的影响。提高搅拌速率对菌体生长和ε 聚赖氨酸的合成有显著的促进作用 ;但当搅拌转速达到 4 0 0r min以上时 ,由于剪切力过大导致细胞死亡 ,ε 聚赖氨酸产量下降。当pH维持 5以上 ,有利于菌体生长 ;pH4 0左右可促进ε 聚赖氨酸的合成。搅拌转速 35 0r/min和控制pH4 0时可获得最大的ε 聚赖氨酸产量 2 95g L ,菌体量 9 33g L ;此时产物ε 聚赖氨酸对葡萄糖的得率和对细胞干重的比生成速率分别为 0 0 6 2g g和 0 0 0 6g g·h。通过对比不同发酵条件下菌丝体的形态变化 ,发现当菌丝球比较均匀、形态无较大差别、具有致密程度相当的核心时 ,有利于ε 聚赖氨酸形成。

合成生物学在天然药物和微生物药物开发中的应用

目的概括了合成生物学的主要研究内容和核心技术,重点介绍了合成生物学在天然药物和微生物药物开发中的应用。方法首先介绍了合成生物学的概念、核心理念和技术,进一步从天然药物和微生物药物两个方面详细介绍了合成生物学在药物开发中的实例,特别是紫杉醇和青蒿素前体的生物合成研究大大促进了合成生物学在药物开发中的应用。结果合成生物学是21世纪生物学领域的新兴交叉学科,其在阐明生物合成基本规律的基础上,通过人工设计新的生物系统或改造旧的生物过程,从而实现新的功能或新物质合成。结论微生物来源药物是医药工业的重要分支,随着临床耐药菌的日益增多和新药研发难度的加大,微生物药物的开发面临着巨大挑战。伴随着合成生物学的兴起,利用合成生物学原理和方法发掘和改造微生物药物成为一条有效途径。

原核生物信号识别颗粒(SRP)介导蛋白识别转运途径的研究进展

SRP介导的蛋白识别转运过程首先在真核细胞中发现,作用机制已经研究清楚;而SRP在原核细胞中的发现较晚,虽然该途径主要功能蛋白的序列同真核细胞相似,进化上比较保守,但作用机制还未完全揭示,而且SRP体系在原核生物物种间有一定差别,预示着其机制既有统一性,又具有物种特异性。目前原核生物SRP途径的研究主要集中在Ffh、FtsY和4.5SRNA结构与功能,以及这一过程中能量物质GTP的代谢和作用;文章以此为着眼点,概括总结了原核生物中SRP介导蛋白识别转运的研究进展,同时简单介绍了链霉菌中SRP介导蛋白识别转运的研究近况。希望通过链霉菌的相关研究,从进化角度完善和统一原核生物SRP途径的作用机制。

发酵过程实时监测与控制系统的研究

介绍了一种生物发酵过程实时监测与控制系统设计的新思路 ,通过对以传统仪表为主、容量为 14L的发酵罐控制系统的技术改造 ,设计完成了发酵过程的计算机实时监测与控制系统 ,提出了一种发酵过程生物参数的软测量方法 。

卡拉胶植物淀粉复合膜制备及其相关性能研究

采用木薯醋酸酯淀粉、玉米淀粉和卡拉胶复配制备复合膜材料。在分别研究三种单一成分的浓度-粘度-温度关系、溶解度、膨胀率等性能基础上,选择了成膜性较好的三种配比5∶3∶2,2∶6∶2和1∶7∶2(醋酸酯淀粉:玉米淀粉:卡拉胶),进一步分析了三种膜的透光率、水蒸气透过率和吸湿率等性能。结果表明1号膜(5∶3∶2)醋酸酯淀粉含量高,膜的抗拉强度和断裂伸展率最大,分别为5.13 MPa和6.0%,当卡拉胶比例一定的条件下醋酸酯淀粉对膜的水蒸气透过性和吸湿性影响显著,而对透光率影响不大,醋酸酯淀粉含量高的1号膜的吸湿增重、水蒸气透过系数和透光率分别为40.16%,0.49 g·mm/m^2·h·k Pa和44.5%(450 nm),而3号膜则分别为21.39%,0.34 g·mm/m^2·h·k Pa和34.80%(450 nm)。综上,醋酸酯淀粉和卡拉胶是影响膜各项性能的关键成分。

pH依赖型植物基微胶囊的制备和体外释药研究

为研究新型肠溶植物基微胶囊,实现消化道定位给药,以植物多糖变性淀粉、果胶和卡拉胶为基质,制备了微胶囊并考察了其性质、体外释药行为和安全性。选用果胶、木薯醋酸酯淀粉与卡拉胶为材料,制备了p H依赖型微胶囊。考察了微胶囊的红外吸收特征、溶解性能、显微结构和细胞毒性,并进一步研究了微胶囊的释药行为。结果表明:当微胶囊中不含果胶时,其在不同p H条件下均不溶解且没有药物释放;当基质中果胶含量为1%,p H在中性偏酸性时微胶囊的释药量最大,随着果胶浓度的增大微胶囊的释药量降低,3%果胶含量微胶囊几乎没有释药。细胞毒性结果表明微胶囊是安全无毒的。果胶是p H依赖型微胶囊的关键成分,通过调节果胶含量可以实现微胶囊在p H中性环境下的有效释药,实现药物在肠道的定位释放,提高药物的生物利用度。

不同溶出介质中辛伐他汀的平衡溶解度和表观油水分配系数测定

目的测定辛伐他汀在11种不同溶出介质中的平衡溶解度及在正辛醇-水/缓冲液体系中的表观油水分配系数,为辛伐他汀新剂型的研究开发提供参考。方法采用高效液相色谱(HPLC)法测定辛伐他汀在11种不同溶出介质中的平衡溶解度;采用摇瓶法测定辛伐他汀的表观油水分配系数。结果辛伐他汀在不同pH缓冲液中平衡溶解度无显著性差异,表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)的加入可使辛伐他汀的平衡溶解度增大约70倍,达到130 mg/L。辛伐他汀在不同pH缓冲液中的表观油水分配系数P约为2.5(lgP=0.39),无显著性差异。结论辛伐他汀水溶性差,属生物药剂学分类系统(BCS)Ⅱ类药物,表面活性剂如SDS能显著增加辛伐他汀在水中的溶解度。辛伐他汀的油水分配系数不受pH的影响。

高效液相色谱法测定农用抗生素武夷菌素的方法优化

目的建立并优化了高效液相色谱法测定发酵液中武夷菌素的方法。方法选用ZORBAXSB-Aq色谱柱，优化了流动相组成、磷酸二氢钾浓度、流动相pH，考察了方法的线性范围、检测限、稳定性、精密度和回收率。结果实验表明，武夷菌素在205nm有最大吸收，确定为液相检测波长，最优的流动相比例为磷酸二氢钾溶液（0．02mol／L）：甲醇=95：5，pH7．0，线性范围为0．2-1．0mg／mL，线性相关系数为0．9999，平均回收率为99．10％，检出限为0．01mg／mL，日内和日间稳定性良好，RSD值分别为1．44％和0．51％。结论该方法准确，灵敏，能够有效分离并监测发酵液中武夷菌素和杂质。

新型微生态益生菌凝结芽孢杆菌研究进展

凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)是近年来益生菌领域的后起之秀,其除具有乳酸菌和双歧杆菌等保健功效外,还具有耐高温、耐酸和耐胆盐等高抗逆性,且具有较强的抑制肠道致病菌能力。在国外已广泛应用于保健、医疗、食品和畜牧等领域,但在我国关于凝结芽孢杆菌的研究和开发起步不久,而且发展缓慢。本文从凝结芽孢杆菌特性、益生作用及机理、发酵培养和临床研究方面概括和总结国内外的研究进展。

蛋白药物聚乙二醇修饰技术研究进展

近年来,聚乙二醇修饰技术已经成为改良蛋白药物最有效的技术之一,得到越来越广泛的应用。目前已经有十余种聚乙二醇修饰的蛋白药物上市,在临床疗效和安全方面有优良表现。此文综述了蛋白药物聚乙二醇修饰技术的发展,特别是聚乙二醇定点修饰的新技术和新方法,并展望了聚乙二醇修饰技术的发展方向。

大孔吸附树脂结合硅胶柱层析纯化环孢菌素A

采用大孔吸附树脂层析结合硅胶柱层析,对环孢菌素A的分离纯化进行研究,确定了最佳层析条件,建立了工业化制备环孢菌素A的工艺。大孔吸附树脂层析选用D101树脂作为吸附介质,提取液丙酮含量控制在50%,最大吸附量为35 mg/g湿树脂,洗脱剂选用丙酮;硅胶柱层析选用42~64μm硅胶作为层析介质,最优层析条件为柱床高径比10∶1,流动相配比V（石油醚）∶V（丙酮）=70∶30,流速80 mL/m in,环孢菌素A上样质量浓度100 g/L,硅胶层析平均收率为84.2%,环孢菌素A纯度可达到97%以上,整个工艺总收率为65%~70%。

多孔木霉色素的结构鉴定和合成基因簇分析

为了鉴定多孔木霉色素的化学结构,并对其合成基因簇进行分析。本研究分离纯化环孢菌素A合成菌多孔木霉(Tolypocladium inflatum)培养液中的色素,然后通过光谱学分析初步鉴定色素的结构。在此基础上,采用生物信息学方法对色素合成基因簇进行解析。多孔木霉色素为蒽醌类物质,分子式为C15H10O5,含有3个苯羟基和2个酮基。T.inflatum色素与镰刀菌红素、孢子黄色素的合成基因簇同源性高,合成T.inflatum色素的基因簇共有43个开放阅读框(ORFs),核心基因为聚酮合酶(polyketide synthase,PKS)合成酶基因。本研究从色素结构和合成基因簇分析入手,为进一步阐明色素的生物合成途径奠定基础。

环孢菌素A结晶工艺的优化

为了确定环孢菌素A结晶工艺,对溶剂种类、反溶剂加入量、结晶温度和降温方式等因素的影响进行研究。首先通过静态结晶研究,确定了丙酮/水结晶体系和溶剂比例。在此基础上,设计了正交试验L9(34)考察动态结晶中各因素对环孢菌素A结晶收率和纯度的影响,并进一步优化了结晶降温方式。结果表明:确定环孢菌素A结晶的最佳条件为采用梯度程序降温,养晶温度为-5℃,丙酮和水的体积比为2∶1,反溶剂水流加时间为0.5 h,开始流加点为降温至0℃,结晶时间约为3 h。经HPLC分析环孢菌素A的纯度平均值为99.15%,收率平均值为87.7%。

微生物法制备单唾液酸四己糖神经节苷脂的机制和方法

单唾液酸四己糖神经节苷脂（GM1）是含有单个唾液酸的酸性鞘糖脂,被认为是除脑源性神经生长因子和层粘蛋白外,对神经系统损伤具有显著临床疗效的生物药物。GM1主要来源于哺乳动物含丰富神经的脑组织，经有机溶剂提取和柱层析分离精制获得。由于GM，

奥利司他原料药制备过程中的杂质分析

目的采用高效液相色谱(HPLC)法分析奥利司他在发酵、制备和包装过程中产生或引入的杂质,为制订药品生产过程控制质量标准提供数据和参考。方法色谱柱为Agilent C18柱(250 mm×4.6 mm,2.5μm),流动相为乙腈-水(80∶20),UV检测波长为195 nm,流速为1.2 mL/min。结果发酵过程中微生物代谢产物是杂质的主要来源;而奥利司他在制备过程中容易发生氧化、水解和受热降解而产生不同的杂质,特别是受酸或碱作用会发生显著的降解;由于奥利司他残留溶剂的作用,采用不同的包装材料也会引入杂质。结论在奥利司他生产过程中,应从生产工艺、原辅料和包装材料各个方面进行严格控制,才能有效控制杂质的含量。