沉默miR-208a对急性心肌梗死大鼠心室重构的影响及机制研究

目的探究沉默miR-208a对急性心肌梗死大鼠的心室重构的影响及相关机制。方法选取40只SD健康雄性大鼠,10只为正常组,其余30只建立急性心肌梗死模型,并分为模型组、过表达miR-208a组、沉默miR-208a组,对4组大鼠分别进行干预。检测大鼠心功能[左心室舒张末期内径(LVEDd)、左心室舒张末期容积(LVEDV)、左心室收缩末期内径(LVESd)],观察4组大鼠心脏外观,心肌梗死面积、心肌细胞凋亡情况,检测4组大鼠miR-146a表达,Western blot法检测[B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、果蝇MAD类似基因2(Smad2)、果蝇MAD类似基因3(Smad3)]相对表达量,免疫透射比浊法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化脂质(LPO)、丙二醛(MDA)水平。结果过表达miR-208a组大鼠miR-208a、Bcl-2、Caspase-3、TGF-β1、Smad2、Smad3表达高于模型组和正常组,与模型组、过表达miR-208a组比较,沉默miR-208a组大鼠miR-208a、Bcl-2、Caspase-3、TGF-β1、Smad2、Smad3表达较低(P<0.05)。过表达miR-208a组大鼠LVEDd、LVEDV、LVESd水平高于模型组和正常组(P<0.05),与模型组、过表达miR-208a组比较,沉默miR-208a组大鼠LVEDd、LVEDV、LVESd水平较低(P<0.05)。与模型组、过表达miR-208a组比较,沉默miR-208a组大鼠心肌梗死面积、心肌细胞凋亡指数较低(P<0.05)。与模型组、过表达miR-208a组比较,沉默miR-208a组大鼠GSH-Px水平较高,LPO、MDA水平较低(P<0.05)。结论沉默急性心肌梗死大鼠miR-208a表达,能够靶向调控Bcl-2、Caspase-3表达,抑制心肌细胞凋亡,改善大鼠心室重构,能够减轻心肌组织氧化应激损伤以及心肌纤维化,为急性心肌梗死的临床治疗提供一定的参考依据。

金丝桃苷对慢性心力衰竭大鼠心脏功能及自噬相关蛋白表达的影响

目的 探讨金丝桃苷对心力衰竭大鼠心脏功能的影响及其可能的作用机制。方法 SD大鼠随机分为假手术组[6只,氯化钠溶液2 mL/(kg·次)]、模型组[6只,氯化钠溶液2 mL/(kg·次)]、治疗组[6只,金丝桃苷30 mg/(kg·次)],每日腹腔注射给药1次,连续给药4周。采用彩色超声心动图检查记录大鼠心动图指标;采用醋酸铀-硝酸铅双重染色观察心肌组织形态学改变;Western blot检测自噬相关蛋白的表达。采用新生大鼠心肌细胞体外建立心肌细胞损伤模型,分为对照组、异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)模型组、金丝桃苷组及自噬抑制组,免疫荧光染色检测心肌细胞自噬情况。结果 与模型组比较,治疗组大鼠超声心动图指标左心室射血分数(LVEF)、左心室缩短率(LVFS)明显升高(P<0.05),左心室舒张末期室间隔厚度(IVSd)、收缩末期左心室后壁厚度(LVPWs)、收缩期室间隔厚度(IVSs)和舒张期左心室后壁厚度(LVPWd)明显降低(P<0.05);大鼠心肌病理学改变有明显改善。Westernblot结果显示,治疗组大鼠心肌组织中微管相关蛋白轻链3(microtubuleassociated protein 1 light chain 3,LC3)II/LC3I比例、Beclin-1蛋白表达水平下降(P<0.05),p62蛋白表达水平增加(P<0.05)。免疫荧光染色显示,对照组、ISO模型组、金丝桃苷组及自噬抑制组细胞中自噬体数分别为(4.3±2.02)个、(39.8±6.03)个、(15.3±6.83)个及(4.79±2.41)个;与ISO模型组比较,金丝桃苷组及自噬抑制组自噬体数显著下降(P<0.05)。结论 金丝桃苷能改善心力衰竭大鼠的心脏功能,其作用机制可能是通过抑制慢性心力衰竭大鼠心肌细胞自噬来实现。