氨和乳酸对悬浮培养的BHK-21细胞生长和胞内酶活性的影响

为了研究氨和乳酸对悬浮培养的BHK-21细胞生长和细胞内酶活性的影响,用添加了不同浓度氨和乳酸的培养基悬浮培养BHK-21细胞,间隔12h取样,比较细胞的生长状况,检测细胞代谢过程中营养物质的消耗和细胞内琥珀酸脱氢酶的活性。结果显示,当氨和乳酸的添加浓度分别为2.5和10mmol/L时,对细胞的生长产生弱抑制作用;随着氨和乳酸添加浓度的增加,细胞生长缓慢,营养物质消耗量降低,琥珀酸脱氢酶活性降低;在氨和乳酸添加浓度分别达到5和20mmol/L时,细胞生长代谢受到严重的抑制,琥珀酸脱氢酶活性在整个培养过程中显著低于对照组。因此,培养液中氨和乳酸积累到一定浓度会抑制BHK-21细胞生长,影响细胞内琥珀酸脱氢酶的活性。

新型猪瘟疫苗的研究进展

文章对新型猪瘟疫苗的研究现状进行了概述,为进一步研制和开发猪瘟疫苗提供参考。

新城疫疫苗的研究进展

文章介绍了新城疫疫苗的应用现状,概述了灭活疫苗、活疫苗及基因工程苗等主要的新城疫疫苗研究现状及发展动态。旨在为研制广谱、多价、浓缩、高效、价廉的新城疫疫苗提供科学的参考依据,从而进一步控制当前新城疫疫病的蔓延。

氨对悬浮培养幼仓鼠肾细胞(BHK-21)生长代谢的影响

【目的】研究在幼仓鼠肾细胞（BHK-21）悬浮培养过程中,不同浓度氨对其生长代谢的影响。【方法】用添加0,1.8,2.5,5.5,8.0和15.0 mmol/L氨的培养基培养BHK-21细胞,每隔12 h取样1次,用细胞计数仪进行细胞计数,测定细胞活力,采用AO/EB双染色法和Annexin V-FITC/PI流式细胞仪2种方法检测细胞的凋亡情况,同时测定细胞培养过程中葡萄糖、氨和乳酸浓度的变化。【结果】在BHK-21细胞连续培养过程中,当氨的添加浓度低于1.8 mmol/L时,其对细胞的生长几乎不产生抑制作用,细胞活性、细胞总数与对照组差异不显著,未出现细胞聚集成团现象;当氨添加浓度达到15.0 mmol/L时,BHK-21细胞直接进入死亡期;当氨的添加浓度为2.5~8.0 mmol/L时,氨对细胞生长的抑制作用由弱变强,这种抑制作用在细胞培养至24 h开始出现。另外,随着氨添加浓度的增加,葡萄糖的消耗量减少,细胞代谢产生的乳酸和氨降低。【结论】氨对悬浮培养的BHK-21细胞的生长和代谢有显著影响。

磁场对低温保存鸡精液品质的影响

1材料与方法 1．1材料 选40只健康、精液品质良好的伊沙种公鸡供采精用。精液简易磁化装置：N、S两极磁场大小范围为56mT左右，两磁极间距为3cm，磁化瓶置于两磁极正中间。显微镜、烘干箱、灭菌锅、滴管、集精杯、血球分类计数器、电冰箱、载玻片、盖玻片等。药品及稀释液：青霉素、硫酸链霉素、甘农一号稀释液。

磁场对低温保存鸡精液品质的影响

[目的]探讨磁化处理对低温保存鸡精液品质的影响。[方法]将5 m l新鲜精液平均分为5份,每份按1∶4（V/V）进行稀释,其中1份为对照组,不作磁化处理,其余4份分别放入自制磁化器中磁化6、12、24、48 m in,5组均置于2-4℃的冰箱中保存,定时观测精子活率、存活时间、生存指数和畸形率。[结果]精液经磁化后活率提高,并且有效生存指数明显优于对照组,尤以磁化24 m in效果最明显,比对照组提高了7.75%,而精子的畸形率磁化组低于对照组。[结论]磁化处理可有效提高冷冻保存鸡精液的品质。

不同浓度葡萄糖和谷氨酰胺对BHK-21细胞凋亡的影响

研究葡萄糖和谷氨酰胺两种重要营养物质对BHK-21细胞凋亡的影响,在BHK-21细胞体外培养过程中,加入不同浓度的葡萄糖和谷氨酰胺,每隔24 h取样细胞计数,活性分析和细胞凋亡率的测定。结果发现,当葡萄糖浓度降至0 mmol/L^4 mmol/L,谷氨酰胺浓度降至0 mmol/L^1 mmol/L时,细胞生长速率降低,细胞培养至48 h就开始大量凋亡,细胞活性也随之下降。可见,葡萄糖和谷氨酰胺的浓度对BHK-21细胞的活性和细胞凋亡有着显著性的影响。

动物细胞大规模培养中细胞凋亡检测方法的研究

为了探讨动物细胞大规模培养中细胞凋亡的检测方法,以不同浓度氯化铵诱导BHK-21细胞凋亡,每隔12 h收集细胞,采用台盼兰形态学排染法、吖啶橙和溴化乙锭双重荧光染色法、FITC-Annexin V/PI双染色荧光显微镜观察法、原位缺口末端标记法(TUNEL)、DNA凝胶电泳、流式细胞术(FCM)法进行细胞凋亡的检测。通过比较发现,不同方法检测结果都存在着显著性差异,但吖啶橙和溴化乙锭双重荧光染色法是一种简单、易行、准确、全面定性细胞凋亡的较为可靠的方法,而FITC-Annexin V/PI双染色流式细胞仪能特异地、准确地检出早期凋亡的细胞,是较为理想的凋亡定量检测方法。这2种方法的联合运用更适应于动物细胞大规模培养过程中细胞凋亡的检测。

番茄早疫病、晚疫病、灰霉病综合防治

近几年，随着全省“百万亩设施蔬菜工程”建设的推进，陕西的设施蔬菜种植面积大幅增长。笔者发现，在设施蔬菜生产中，新菜农面临的最大问题是缺乏对蔬菜常见毁灭性病害的识别和防治知识，老菜农面临的是因常年连作而导致的病虫危害加重问题。番茄早疫病、晚疫病和灰霉病是最常见的三种病害，其在春提早和秋延后栽培中发生更为迅猛，且因防治不当有逐年加重趋势。现将这三种病害的危害症状、发病原因、综合防治措施总结如下。

水稻区试品种抗病性鉴定结果分析

1977-2006年对19888个（次）品种抗病性鉴定结果表明，近7年来，我省水稻区试品种抗病性明显下降，建议省种子管理部门对抗病性不如对照的品种，特别是高感稻瘟病的品种，在（审）认定时，实行抗病性否决。

草莓保护地栽培技术

介绍保护地草莓栽培技术,包括品种选择、土壤消毒、培育壮苗、定植、定植后管理、秧苗更新、病虫害防治等方面内容,以为农民增收和农业产业结构调整提供技术支撑。

大规模细胞培养过程中污染的类型及控制策略探讨

细胞污染是动物细胞培养技术中面临的主要问题。本文从细胞培养过程中污染产生的来源、种类及控制策略等方面对规模化培养过程中常见的污染类型及防控手段进行综述,为提高细胞培养水平、防治细胞培养过程中可能出现的污染状况及研究新的去除污染的手段提供新的思路,为有效减少和控制污染、降低损失,提高生物制品的质量奠定基础。

沙门氏菌载体在疫苗应用中的研究进展

沙门氏菌不仅可以用作疫苗,也是理想的疫苗载体,已受到医学与兽医学的广泛重视。其主要优点包括:沙门氏菌可以经黏膜途径免疫(口服或鼻内),操作方便,对接种对象刺激小。此外,沙门氏菌为胞内侵袭细菌,能有效递呈抗原,激发抗沙门氏菌和诱导外源蛋白的特异性体液免疫反应与细胞免疫反应,并能同时诱导黏膜免疫与全身免疫。作者对沙门氏菌的入侵机制、免疫机理及其在疫苗中的应用状况进行了综述,为新型疫苗的研究提供参考。

BHK-21悬浮细胞流加培养的研究

试验旨在研究流加培养基中不同营养成分、初始接种密度、流加起始时间对BHK21悬浮细胞流加培养的影响。结果表明，流加浓缩包中的氨基酸对促进细胞生长有明显影响，而无血清培养基添加成分不仅促进细胞生长，且对细胞活力的维持起着较为重要的作用。初始接种密度为3×10^5～6×10^5／mL，培养至48h开始流加一定量的浓缩液，流加培养效果较好。另外，在已优化的条件下进行流加培养，未出现细胞大量凋亡现象。

卵黄抗体在疾病防治中应用的研究进展

卵黄抗体是一种多克隆抗体,由禽类经特异性抗原刺激后通过B淋巴细胞产生并运行至卵黄中所形成,具有强大的免疫功能。对卵黄抗体的结构特点、理化性质、作用机理及其在各类动物疾病治疗预防方面的应用进行了综述,并指出了目前存在的问题。

国内外疫苗规模化生产技术研究进展

文章通过从细胞产品、培养基种类以及疫苗生产等方面对国内外疫苗规模化生产技术进行综述,分析了我国兽用疫苗的生产现状,提出我国兽用疫苗的发展方向。

三株BHK-21悬浮细胞培养特性比较

为了筛选出适应于口蹄疫疫苗生产的最佳细胞株,用自制的GMEM培养基,以30mL/L血清浓度,在同等条件下比较了3种不同来源的BHK-21悬浮细胞培养特性。结果显示,这3种细胞在形态上无明显的差异,在显微镜下不易区分;在培养过程中,BHK-21-L细胞株在最短时间内可达到最大培养密度,细胞生长速度快,细胞活性较高,DNA合成旺盛;BHK-21C13-2P细胞株最大密度较低,在72h^96h被完全阻止在G0/G1,放大比例较小,为1∶1.5~1∶2;BHK-21-B细胞在72h^96h停止增殖,可放大较大比例,但易出现细胞结团、易贴壁的现象,影响细胞的增殖。可见,BHK-21-L细胞是生产口蹄疫疫苗可供选择的最佳细胞株。

动物细胞代谢工程进展

动物细胞被越来越广泛地用于工业生产,一些现代化企业已采用分子生物学技术,将一些比较重要的基因导入动物细胞,生产具有医用价值的药物。但该技术并未成熟,主要是因为体外培养的细胞,其生长代谢及生理模式都比较复杂,而且细胞的应答机制还受外界因素的影响。因此,采用细胞代谢工程手段,提高体外培养细胞的生长率、产品产率及有效性,成为人们追求的新目标。我们从细胞代谢中心途径、抑制细胞调亡的因素、细胞生长周期的控制及其相关代谢、多基因共表达代谢工程及糖基化代谢工程等方面对代谢工程进行阐述,为动物细胞的培养提供新的思路。

口蹄疫亚单位疫苗真核表达系统简述

目前,防治口蹄疫最有效的方式是接种灭活疫苗,但该疫苗免疫周期短,且存在一定安全隐患,生产和研制新型口蹄疫疫苗尤显重要。亚单位疫苗是利用基因工程技术生产保护性抗原来诱导机体产生免疫反应,由于不含病毒DNA,不会使动物发病,安全性极高,具有良好的应用前景。研制亚单位疫苗,首先要构建携带编码目的蛋白基因的表达载体,然后将构建好的载体导入合适的宿主细胞来表达,需要一个由表达载体和宿主细胞组成的完整表达系统。目前所用表达系统主要有原核系统以及酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞、植物生物反应器等真核系统,其中真核表达系统具有翻译后的加工修饰体系,表达的外源蛋白更接近于天然蛋白质而被广泛应用。本文就常用表达FMDV结构蛋白和非结构蛋白的真核表达系统、FMD亚单位疫苗研究进展进行综述。

不同添加剂对BHK-21悬浮细胞增殖影响的研究

摘要：为探讨不同的添加剂对BHK-21悬浮细胞生长代谢的影响，分别添加三种不同的物质A、B、C于培养基中，在同等条件下观察细胞形态、生长速率和细胞活性，验证不同添加物对细胞增殖的影响。试验结果表明，添加剂A可使细胞生长速度加快、活性提高、细胞放大5～10倍，可有效刺激细胞增殖。