温肾填精方及其拆方对肾阳虚不孕小鼠生殖功能的影响

目的 观察温肾填精方及其拆方对肾阳虚证不孕小鼠生殖功能的影响。方法 采用冰羟基脲灌胃法制备肾阳虚不孕小鼠模型,中药干预15 d后灌胃给予PMSG 5 IU+HCG 5 IU进行超促排卵,合笼观察子代,计算获卵数,检测血清cAMP、cGMP、ATP、NO水平,JC-1荧光染色后用激光共聚焦显微镜观察卵母细胞ΔΨm, HE染色观察卵巢各级卵泡数,RT-qPCR检测卵母细胞Mfn1、OPA1、Drp1、Fis1 mRNA表达。结果 与自然周期组、促排对照组比较,阳虚模型组小鼠无法产出子代,获卵数减少,异常卵增加(P<0.05,P<0.01);血清cAMP、ATP水平降低,cGMP、NO水平升高(P<0.05,P<0.01);卵母细胞ΔΨm降低,卵巢原始卵泡减少,闭锁卵泡增加(P<0.05,P<0.01);卵母细胞Mfn1、OPA1 mRNA表达降低,Drp1、Fis1 mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01)。与阳虚模型组比较,各中药组小鼠受孕结局均有所改善;其中资冲颗粒组NO水平最低,异卵数最少(P<0.05);温肾填精颗粒组ΔΨm,原始卵泡数最高(P<0.05),闭锁卵泡数最少。结论 温肾填精复方及其拆方均可不同程度纠正肾阳虚不孕小鼠生殖功能。与拆方比较,复方在调节小鼠卵母细胞线粒体动力学状态方面更优,可恢复线粒体功能,增强能量代谢,最终提升卵母细胞质量,改善卵巢储备,增加受孕率。

基于阴阳互根互用理论的不孕症肾阳虚证、肾阴虚证患者因-症关系关联分析

目的通过数据挖掘关联分析的方法,分析不孕症肾阳虚证、肾阴虚证患者病因、症状的关联关系。方法收集不孕症肾阳虚证、肾阴虚证受试者共148例,其中肾阳虚证84例,肾阴虚证64例。对肾阴虚证、肾阳虚证常见的发病因素和出现的主要症状舌脉进行调查。运用Apriori算法来获取两者之间的支持度与置信度,进行关联分析。结果不孕症肾阳虚证患者中,具备强关联规则的包括:饮食不节→畏寒、肢冷、舌淡、脉沉细;压力过大→畏寒、肢冷、舌淡;湿热郁滞→畏寒、肢冷、舌淡;人流不当→畏寒、肢冷、舌淡。肾阴虚患者中,具备强关联规则的包括:人流不当→舌红;湿热郁滞→手足心热、潮热、烘热;压力过大→少苔、手足心热、舌红、脉细数。两组具有的共同的高频次发病因素为:压力过大、湿热郁滞。结论不孕症肾阴虚证、肾阳虚证患者的因-症关系,符合阴阳互根互用的基础理论。进一步应用数据挖掘的方法来探讨中医证型,是一种新的研究思路。

连续超促排卵致肾精不足伴生育力低下雌性小鼠模型制备和比较研究

目的探究应用连续超促排卵的方法,制备肾精不足伴生育力低下的雌性小鼠模型。比较连续超促排卵与反复超促排卵两种造模方式,探索最优造模方案。方法6周龄雌性昆明小鼠60只,随机分为自然周期组、超促排卵组、连续超促排卵15天组、连续超促排卵30天组、反复超促排卵5次组。其中,自然周期组于动情期腹腔注射绒毛膜促性腺激素(HCG)5IU,其余各组在小鼠动情间期予孕马血清促性腺激素(PMSG)5IU腹腔注射,48小时后腹腔注射HCG 5IU进行超促排卵。连续超促排卵15天即无间断连续超促排卵5个周期;连续超促排卵30天即无间断连续超促排卵10个周期。反复超促排卵5次组于每次注射HCG后间隔2天开始下1个周期,重复5个周期。最后1次注射HCG后解剖小鼠取卵,镜下计数卵细胞及分期;子宫组织进行HE染色,测定子宫内膜厚度、腺体情况;合笼计数产仔数及子代出生1周后存活情况。结果(1)连续超促排卵15天组,总获卵数降低(P<0.05),其中MII期卵数及占比均显著降低(P<0.01);产仔数降低(P<0.05)。连续超促排卵30天组,子宫腺体面积降低(P<0.05),腺体最大直径降低(P<0.05);MII期卵数及占比均降低(P<0.05),总获卵数显著降低(P<0.01);产仔数降低(P<0.05);出生1周子代存活数及存活率均显著降低(P<0.01)。(2)连续超促排卵15天组与反复超促排卵5次组比较,子宫内膜厚度、腺体情况、各级获卵数、子代数及存活率均无统计学差异。结论(1)连续超促排卵15天、连续超促排卵30天,均可以作为肾精不足伴生育力低下的研究模型。(2)连续超促排卵15天是时间最优化的造模方案。

基于“气虚生毒”学说论糖尿病大血管区域免疫炎症微环境紊乱

糖尿病大血管区域免疫炎症微环境紊乱归属于中医经脉病变,脏腑功能失调,正气亏虚为导致其紊乱的根本,气虚而生的痰湿、瘀血等病理产物留注脉中,诸邪结滞成毒,形成"气虚生毒"的病理状况。其紊乱调节过程与中医正气抗邪过程密切相关。应用益气解毒法扶正祛邪,正气存内,邪不可干,祛除邪气,邪去正安,激发机体免疫调节功能,发挥正常的免疫防御、自稳及监视功能,恢复微环境紊乱,减少血管损伤。

浅析“经病发热”

经病发热为妇科常见疾病,我国古代医家对其病因病机、证型分类及治疗方法皆有详细描述。从现代女性先天体质、生活环境、情志因素等角度出发,并结合引用古代经典医家著述对经病发热进行阐述,简要剖析该病的辨证思路及遣方用药。

温肾补虚方对甲减大鼠下丘脑-垂体-甲状腺轴的影响

目的:探讨温肾补虚方对甲减大鼠下丘脑-垂体-甲状腺(HPT)轴干预的疗效性和量效性。方法:60只雄性SD大鼠,适应性饲养1周后,随机选取10只为正常组,余为实验组;实验组予丙硫氧嘧啶片(PTU)药品溶液(蒸馏水配成0.05%浓度)灌胃,持续造模4周后随机分为温低组、温中组、温高组、西药组、模型组,每组10只。分别予相应药物灌胃,周期28d。实验期间观察各组大鼠一般情况;干预后,检测各组大鼠血清TRH、TSH、FT4、FT3、TT4、TT3水平并观察甲状腺组织病理形态学改变。结果:与正常组比较,模型组大鼠饮食量、饮水量、体质量、肛温均下降(P<0.01),TRH、FT4、FT3、TT4、TT3下降(P<0.01),TSH上升(P<0.01),甲状腺组织损害严重。与模型组比较,温高组、西药组饮食量增加(P<0.01,P<0.05);温高组体质量增加(P<0.05,P<0.01);温高组、温中组肛温升高(P<0.05,P<0.01)。各治疗组大鼠血清TRH、FT4、FT3、TT4、TT3均升高(P<0.01,P<0.05),TSH下降(P<0.01,P<0.05)。HE染色发现各治疗组甲状腺腺泡均呈结节状增生,间质见充血、出血,与模型组比较,温中组腺泡增生及充血缓解更为明显。结论:温肾补虚方能有效改善甲减大鼠HPT轴功能,且存在一定量效性。

温肾复方对冰羟基脲建立的肾阳虚证不孕小鼠生殖功能影响

目的:探讨温肾复方中药对肾阳虚证不孕小鼠生殖功能的影响。方法:将4周龄昆明雌性小鼠随机分为对照组、模型组、温肾复方组。按冰羟基脲灌胃法建立模型后,对照组和模型组予0.9%氯化钠溶液,温肾复方组予温肾复方灌胃。观察各组小鼠一般情况、肛温,药物干预后各组小鼠合笼观察子代,用PMSG 5IU+HCG 5IU进行超促排卵获取卵母细胞进行分期计数,检测血清雌二醇(E2)、孕激素(P)、抗缪勒管激素(AMH)水平,运用HE染色观察卵巢病理改变。结果:与对照组比较,模型组小鼠产仔数、获卵数、E2、P及AMH水平、卵泡期及黄体期原始卵泡数均显著下降(P<0.01,P<0.05);异卵率、卵泡期及黄体期闭锁卵泡数显著增加(P<0.01)。与模型组比较,温肾复方组小鼠产仔数、获卵数、卵泡期E2、AMH水平、卵泡期原始卵泡数显著增加(P<0.01,P<0.05);异卵率、卵泡期及黄体期闭锁卵泡数显著下降(P<0.01,P<0.05)。结论:温肾复方中药能改善肾阳虚不孕小鼠生殖功能,与正向调节性腺和下丘脑-垂体-卵巢(HPO)轴功能有关。

补肾益气养血法治疗人流术后月经过少1例

月经过少是指月经周期正常,经量明显减少,或行经时间不足2d,甚或点滴即净者。古籍有称＂经水涩少＂、＂经水少＂、＂经量过少＂。近年来随着人工流产的普遍开展,月经过少的发病率呈逐渐上升的趋势,已成为临床常见病。笔者（第一作者）跟随张庆文导师对本病进行临床观察,发现补肾益气养血法治疗人流术后月经过少有良好的疗效,现将验案1则介绍如下。

附子-肉桂配伍对阳虚型慢传输型便秘大鼠肠动力及SCF、c-Kit表达的影响

目的 研究附子-肉桂配伍对阳虚型慢传输型便秘(STC)大鼠肠神经递质、干细胞因子(SCF)及酪氨酸激酶(c-Kit)表达的影响,并探讨其改善肠动力的作用机制。方法 将90只SD大鼠随机分为空白组(15只)和模型组(75只),采用盐酸洛哌丁胺结合0℃冰水复合灌胃法建立阳虚型STC大鼠模型。造模成功后70只模型大鼠随机分为模型对照组、附子-肉桂(2:1)组、附子-肉桂(1:2)组、附子-肉桂(1:1)组、附子组、肉桂组、普芦卡必利组,每组10只,同时取空白组为10只。各中药组分别给予相应水煎液灌胃,普芦卡必利组给予0.18 mg/kg普芦卡必利混悬液灌胃,空白组和模型对照组给予10 mL/kg体积蒸馏水灌胃,每天1次,各组均连续灌胃14天。观察大鼠一般情况、粪便含水率、肠道推进率,ELISA法检测结肠5-羟色胺(5-HT)、血管活性肠多肽(VIP)、P物质(SP)含量;免疫组化法观察结肠5-HT、VIP、SP、SCF、c-Kit表达情况;Western Blot法测定SCF、c-Kit蛋白水平,RT-PCR法检测c-Kit、SCF mRNA表达水平。结果 与空白组比较,模型对照组粪便含水率、肠道推进率、结肠5-HT、SP表达、SCF、c-Kit蛋白和mRNA表达均下降(P<0.01),结肠VIP表达增加(P<0.01)。与模型对照组比较,附子-肉桂(2:1)组、普芦卡必利组粪便含水率、肠道推进率、结肠5-HT、SP表达、SCF、c-Kit蛋白和mRNA表达水平增高(P<0.01),结肠VIP表达降低(P<0.01)。与附子-肉桂(2:1)组和普芦卡必利组比较,附子组、肉桂组c-Kit、SCF蛋白和mRNA表达水平降低(P<0.05,P<0.01)。结论 附子-肉桂(2:1)配伍可有效改善阳虚型STC肠道动力障碍,其促进肠动力的作用与下调VIP表达、上调结肠5-HT、SP、SCF、c-Kit表达水平有关。