目的:探讨维生素 A 缺乏导致新生大鼠枕颈部畸形的作用机制。方法:将40只5周龄雌性健康 SPF 级 SD 大鼠随机分为2组,正常对照组20只,维生素 A 缺乏组20只;20只适龄雄性健康 SPF 级 SD 大鼠分笼饲养。正常对照组饲以 AIN -93M饲料...目的:探讨维生素 A 缺乏导致新生大鼠枕颈部畸形的作用机制。方法:将40只5周龄雌性健康 SPF 级 SD 大鼠随机分为2组,正常对照组20只,维生素 A 缺乏组20只;20只适龄雄性健康 SPF 级 SD 大鼠分笼饲养。正常对照组饲以 AIN -93M饲料,维生素 A 缺乏组饲以缺乏维生素 A 的 AIN -93M饲料,雄性大鼠饲以 AIN -93M饲料。饲养至第10周从雌性大鼠的目外眦取血,采用酶联免疫吸附法检测2组雌鼠血清维生素 A 含量,鉴定大鼠模型。造模成功后,将大鼠按雌2雄1的比例合笼交配,第2天清晨检查阴栓,有阴栓者记为 E0 d。于妊娠 E11.5 d 取2组半数的孕鼠,麻醉处死后剖腹,每只孕鼠取出2只胚胎,剥离被膜,置于液氮中,然后转移至-80℃的冰箱里保存待测。于妊娠 E21 d 取新生鼠,麻醉处死后剥离皮肤筋膜以及内脏,置于95%的酒精中固定待测。采用 RT -qPCR 方法检测胚胎 Hoxd3基因 mRNA 表达情况;采用双色染色法制作大鼠骨骼标本,观察新生鼠枕颈部骨骼发育情况。结果:①雌鼠血清维生素 A 含量。维生素 A 缺乏组大鼠血清维生素 A 含量明显低于正常对照组[(214±39)ng·mL -1,(432±54)ng·mL -1,t =14.636,P =0.000]。②胚胎 Hoxd3基因 mRNA 的表达量。维生素 A 缺乏组胚胎 Hoxd3基因表达量低于正常对照组(0.58±0.11,1.03±0.14,t =10.407,P =0.000)。③新生鼠枕颈部骨骼形态。正常对照组可见枕骨与寰枢椎发育正常,对位关系良好;维生素 A 缺乏组可见寰椎后弓与枕骨大孔后缘角度增大,寰枢椎对位关系异常,寰枢椎后弓角度增大,C2~C7椎弓及棘突高度降低、宽度变窄,且相邻椎体间隙增大。结论:维生素 A 缺乏可以导致新生大鼠枕颈部结构发育异常,这可能与其胚胎发育期 Hoxd3基因 mRNA 表达水平下降有关,但其具体的分子生物学机制还有待进一步研究。展开更多
目的:研究雌鼠孕期维生素A(Vitamin A,VA)缺乏补充异补骨脂素对胎鼠上颈椎发育异常的影响及相关基因的表达。方法:初断乳(3周龄)SD雌性大鼠50只,按体质量顺序编号并随机分为维生素A缺乏(Vitamin A Deficiency,VAD)组及正常(Normal,N)组...目的:研究雌鼠孕期维生素A(Vitamin A,VA)缺乏补充异补骨脂素对胎鼠上颈椎发育异常的影响及相关基因的表达。方法:初断乳(3周龄)SD雌性大鼠50只,按体质量顺序编号并随机分为维生素A缺乏(Vitamin A Deficiency,VAD)组及正常(Normal,N)组,分别喂养维生素A缺乏饲料和正常纯化饲料。喂养10周验证VAD组VA缺乏状态后,所有雌鼠按2∶1与正常雄鼠合笼,VAD组进一步分为维生素A缺乏空白组(VAD)、异补骨脂素补充低剂量组(Isopsoralen Supplement with Low Dose,ISL)、中剂量组(Isopsoralen Supplement with Medium Dose,ISM)、高剂量组(Isopsoralen Supplement with High Dose,ISH),其中ISL,ISM,ISH三组分别于妊娠0.5d起补充异补骨脂素。于妊娠第11.5天随机处死半数孕鼠取其胚胎,采用RT-QPCR方法分别检测胚胎Hoxd3基因和视黄酸受体(Retinoic Acid Receptors,RARs)蛋白mRNA分子表达水平。妊娠第21天取新生鼠,骨骼双染法观察上颈椎骨骼发育形态。结果:VAD组及异补骨脂素补充组均可见胚胎骨骼发育迟缓,上颈椎出现骨骼畸形早期表现。VAD组及异补骨脂素补充组Hoxd3基因及RARs mRNA表达水平下降(P<0.01),异补骨脂素补充组Hoxd3基因mRNA表达水平较VAD组高(P<0.05)且与补充剂量成正比,但差异不明显(P>0.05),RARs mRNA的表达与异补骨脂素的补充相关性不明显。结论:孕期雌鼠维生素A水平的下降可以导致胎鼠上颈椎一定程度的发育异常,而孕期补充异补骨脂素可上调Hoxd3基因的表达水平,但对形态异常的改善影响较小。展开更多
文摘目的:探讨维生素 A 缺乏导致新生大鼠枕颈部畸形的作用机制。方法:将40只5周龄雌性健康 SPF 级 SD 大鼠随机分为2组,正常对照组20只,维生素 A 缺乏组20只;20只适龄雄性健康 SPF 级 SD 大鼠分笼饲养。正常对照组饲以 AIN -93M饲料,维生素 A 缺乏组饲以缺乏维生素 A 的 AIN -93M饲料,雄性大鼠饲以 AIN -93M饲料。饲养至第10周从雌性大鼠的目外眦取血,采用酶联免疫吸附法检测2组雌鼠血清维生素 A 含量,鉴定大鼠模型。造模成功后,将大鼠按雌2雄1的比例合笼交配,第2天清晨检查阴栓,有阴栓者记为 E0 d。于妊娠 E11.5 d 取2组半数的孕鼠,麻醉处死后剖腹,每只孕鼠取出2只胚胎,剥离被膜,置于液氮中,然后转移至-80℃的冰箱里保存待测。于妊娠 E21 d 取新生鼠,麻醉处死后剥离皮肤筋膜以及内脏,置于95%的酒精中固定待测。采用 RT -qPCR 方法检测胚胎 Hoxd3基因 mRNA 表达情况;采用双色染色法制作大鼠骨骼标本,观察新生鼠枕颈部骨骼发育情况。结果:①雌鼠血清维生素 A 含量。维生素 A 缺乏组大鼠血清维生素 A 含量明显低于正常对照组[(214±39)ng·mL -1,(432±54)ng·mL -1,t =14.636,P =0.000]。②胚胎 Hoxd3基因 mRNA 的表达量。维生素 A 缺乏组胚胎 Hoxd3基因表达量低于正常对照组(0.58±0.11,1.03±0.14,t =10.407,P =0.000)。③新生鼠枕颈部骨骼形态。正常对照组可见枕骨与寰枢椎发育正常,对位关系良好;维生素 A 缺乏组可见寰椎后弓与枕骨大孔后缘角度增大,寰枢椎对位关系异常,寰枢椎后弓角度增大,C2~C7椎弓及棘突高度降低、宽度变窄,且相邻椎体间隙增大。结论:维生素 A 缺乏可以导致新生大鼠枕颈部结构发育异常,这可能与其胚胎发育期 Hoxd3基因 mRNA 表达水平下降有关,但其具体的分子生物学机制还有待进一步研究。
文摘目的:研究雌鼠孕期维生素A(Vitamin A,VA)缺乏补充异补骨脂素对胎鼠上颈椎发育异常的影响及相关基因的表达。方法:初断乳(3周龄)SD雌性大鼠50只,按体质量顺序编号并随机分为维生素A缺乏(Vitamin A Deficiency,VAD)组及正常(Normal,N)组,分别喂养维生素A缺乏饲料和正常纯化饲料。喂养10周验证VAD组VA缺乏状态后,所有雌鼠按2∶1与正常雄鼠合笼,VAD组进一步分为维生素A缺乏空白组(VAD)、异补骨脂素补充低剂量组(Isopsoralen Supplement with Low Dose,ISL)、中剂量组(Isopsoralen Supplement with Medium Dose,ISM)、高剂量组(Isopsoralen Supplement with High Dose,ISH),其中ISL,ISM,ISH三组分别于妊娠0.5d起补充异补骨脂素。于妊娠第11.5天随机处死半数孕鼠取其胚胎,采用RT-QPCR方法分别检测胚胎Hoxd3基因和视黄酸受体(Retinoic Acid Receptors,RARs)蛋白mRNA分子表达水平。妊娠第21天取新生鼠,骨骼双染法观察上颈椎骨骼发育形态。结果:VAD组及异补骨脂素补充组均可见胚胎骨骼发育迟缓,上颈椎出现骨骼畸形早期表现。VAD组及异补骨脂素补充组Hoxd3基因及RARs mRNA表达水平下降(P<0.01),异补骨脂素补充组Hoxd3基因mRNA表达水平较VAD组高(P<0.05)且与补充剂量成正比,但差异不明显(P>0.05),RARs mRNA的表达与异补骨脂素的补充相关性不明显。结论:孕期雌鼠维生素A水平的下降可以导致胎鼠上颈椎一定程度的发育异常,而孕期补充异补骨脂素可上调Hoxd3基因的表达水平,但对形态异常的改善影响较小。