天麻诱导骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞的实验研究

目的 :探讨天麻对体外定向诱导大鼠骨髓间质干细胞 (MSC)分化为神经元样细胞的影响。方法 :通过贴壁法分离大鼠MSC ,体外扩增培养。中药天麻定向诱导分化为类神经元样细胞。光镜下观察细胞形态 ,免疫细胞化学法检测神经细胞特异性抗原标志物神经原烯醇化酶 (NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、巢蛋白 (Nestin)。结果 :大鼠MSC可通过贴壁法成功分离并可在体外大量扩增。天麻诱导 2h后大部分可分化为神经元样细胞 ,出现胞体和突起 ,免疫细胞化学染色NSE、Nestin呈阳性 ,GFAP阴性。结论 :大鼠MSC可诱导分化为神经元样细胞。

黄芪诱导骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞(英文)

目的体外定向诱导大鼠骨髓间质干细胞(MSC)分化为神经元样细胞。方法通过贴壁法分离鼠MSC,体外扩增培养。中药黄芪定向诱导MSC分化为类神经元样细胞。光镜下观察细胞形态,免疫细胞化检测神经细胞特异性抗原标志。结果大鼠骨髓间质干细胞可通过贴壁法成功分离并可在体外大量扩增。黄诱导90 min后大部分MSC转变为神经元样细胞,出现胞体和突起,免疫细胞化学染色NSE、Nestin呈阳性、FAP阴性。结论大鼠骨髓间质干细胞可在体外诱导分化为神经元样细胞。

黄芪诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经样细胞的基因表达谱

目的:从基因水平了解黄芪在诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化过程中的作用途径。方法:实验于2002-09/2005-06在广州医学院病理生理学教研室和解剖教研室完成。①间充质干细胞的定向诱导分化:实验组加入预诱导液(20mL/L天麻注射液含体积分数为0.1的胎牛血清的L-DMEM),对照组只换液不加天麻。24h后吸去预诱导液,实验组加入诱导液(100mL/L黄芪注射液不含胎牛血清的L-DMEM),诱导细胞分化1h,对照组换液为不含胎牛血清的L-DMEM。②细胞总RNA的提取。③间充质干细胞诱导分化过程中差异表达基因的筛选。结果:①骨髓间充质干细胞及其诱导分化细胞:培养5～10代的细胞在黄芪诱导液中诱导1h后分化为神经元样细胞,免疫组织化学染色显示巢蛋白阳性,神经元特异性烯醇酶阳性,胶质纤维酸性蛋白阴性。②两组细胞的总RNA:紫外分光光度检查其吸光度(A值),A260/A280为1.8～2.0;甲醛变性凝胶电泳显示28S,18S,5S3条带。③在9052个基因中,与对照组相比,实验组检测到有379个基因表达下调,其中下调倍数大于2倍的有19个;表达上调的基因共有151个,其中有7个基因的上调倍数大于2,包括bHLH,epiregulin,fibroblastgrowthfactor9等基因。结论:黄芪可有效地诱导骨髓间充质干细胞分化神经元,其作用过程涉及多种基因。

中药诱导大鼠骨髓间质干细胞分化的实验(英文)

背景:体外定向诱导分化可使骨髓间质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)转化为成骨细胞、脂肪细胞、软骨、肌肉细胞、神经元样细胞等,而中药是否能对大鼠骨髓间质干细胞有诱导分化作用呢?目的:研究SD大鼠MSCs体外扩增培养及用中药定向诱导分化为神经元样细胞的功效。设计:以细胞为研究对象,重复观察测量,探索性研究。单位:一所医学院病理生理学教研室。材料:实验用骨髓取自经检验健康的SD雄性大鼠。方法:通过贴壁法分离大鼠MSCs,体外扩增培养,流式细胞仪检测其表面抗原表达,多种中药成分定向诱导MSCs分化为神经元样细胞。光镜下观察细胞形态,免疫细胞化学法检测神经细胞特异性抗原标志。主要观察指标:①MSCs分离和扩增结果。②MSCs表面抗原及神经元样细胞鉴定结果。结果:大鼠MSCs可通过贴壁法成功分离并可在体外大量扩增。流式细胞仪检测结果显示CD14,CD11α,CD34,CD38,CD45,CD80,CD86为阴性,CD29,CD44,CD90,CD105,CD166呈阳性。黄芪、天麻、人参、当归、脑新舒、人参蜂王浆等多种中药诱导1～3h后大部分MSCs转变为神经元样细胞,出现胞体和突起,免疫细胞化学染色神经元特异性烯醇酶、巢蛋白呈阳性,胶质纤维酸性蛋白阴性。结论:SD大鼠骨髓间质干细胞是具多向分化潜能的细胞,具有较强的增殖、自我更新能力?

漆树酸和阿霉素联合应用抗肝癌的协同作用

目的评价漆树酸与阿霉素联合应用对人肝癌HepG2细胞是否具有协同作用。方法人月十癌HepG2细胞经漆树酸和（或）阿霉素处理后，MTS法检测细胞的增殖情况，Westernblot方法检测Caspase-3，8，9和PARP凋亡相关蛋白的变化。结果漆树酸和阿霉素联合应用能够明显增强抑制HepG2细胞增殖，与单药组相比具有明显的协同作用。漆树酸和阿霉素联合应用可以活化Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9，引起PARP的切割。结论漆树酸和阿霉素联合应用具有明显的协同作用，能够增强抑制HepG2细胞的增殖，两药联合作用的机制可能与诱导Caspase系统活化相关。

大鼠骨髓间质干细胞神经分化相关基因cNDA片段的克隆与初步鉴定

目的:寻找与骨髓间质干细胞(MSC)向神经细胞分化相关的基因。方法:应用荧光-差异显示(flu orescence differential display)技术,分离骨髓间质干细胞和由黄芪诱导分化来的神经元样细胞之间的差异表达cDNA 片段,分离的片段分别与pGEM-T载体连接并转化JM109菌中,斑点杂交排除假阳性克隆,提取质粒进行测序。以 BLAST程序进行GenBank的同源性检索。结果:共得到在神经元样细胞中表达而在MSC中不表达的差异表达cDNA片段7条,其中5条为已知基因,2条为新基因。结论:克隆的7条cDNA序列所在的基因可能与MSC神经分化 的分子机制相关,对它们的进一步研究将为神经退行性疾病的治疗提供思路。

睾酮定向诱导MSC分化的实验研究

目的:激素体外定向诱导大鼠骨髓间质干细胞(MSC)分化为神经元样细胞。方法:通过贴壁法分离大鼠MSC,体外扩增培养,睾酮定向诱导MSC分化为类神经元样细胞。光镜下观察细胞形态,免疫细胞化学检测神经细胞特异性抗原标志。结果:大鼠骨髓间质干细胞可通过贴壁法成功分离并可在体外大量扩增。睾酮诱导6h后大部分MSC转变为神经元样细胞,出现胞体和突起,免疫细胞化学染色NSE、Nestin呈阳性、GFAP阴性。结论:大鼠骨髓间质干细胞可在体外经睾酮诱导分化为神经元样细胞。

中国高校大学生思想政治教育研究热点分析

以中国知网数据库检索到的2012年发表的1700余篇文章作为研究对象,借助Ucinet社会网络分析软件,对大学生思想政治教育研究热点进行剖析,为大学生思想政治教育提供可借鉴的资料。

当归诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞

目的 研究当归体外定向诱导大鼠骨髓间充质干细胞 (MSCs)分化的作用。方法 通过贴壁法分离大鼠MSCs,体外扩增培养。MSC用 2 0 μl当归注射液 /ml含 10 %胎牛血清的L -DMEM为预诱导条件 ,预诱导 2 4h后用当归注射液 10 0 μl/ml不含胎牛血清的L -DMEM进行诱导。光镜下观察细胞形态 ,免疫细胞化学检测神经细胞特异性抗原标志。结果 大鼠骨髓间充质干细胞可通过贴壁法成功分离并可在体外大量扩增。当归诱导 3h后大部分MSCs转变为神经元样细胞 ,出现胞体和突起 ,免疫细胞化学染色NSE及nestin呈阳性、GFAP阴性。

多种中药成分诱导大鼠骨髓间质干细胞转变为神经元样细胞

目的 体外定向诱导大鼠骨髓间质干细胞 (MSCs)分化为神经元样细胞。方法 通过贴壁法分离大鼠MSCs,体外扩增培养 ,流式细胞仪检测其表面抗原表达 ,中药成分定向诱导MSCs分化为神经元样细胞。光镜下观察细胞形态 ,免疫细胞化学法检测神经细胞特异性抗原标志。结果 大鼠MSCs可通过贴壁法成功分离并可在体外大量扩增。流式细胞仪检测结果显示CD1 4、CD1 1α、CD34、CD38、CD45、CD80、CD86为阴性 ,CD2 9、CD44、CD90、CD1 0 5、CD1 66呈阳性。黄芪、天麻、人参、当归、脑新舒、人参蜂王浆等多种中药诱导 1～ 3h后大部分MSCs转变为神经元样细胞 ,出现胞体和突起 ,免疫细胞化学染色神经元特异性烯醇酶 (NSE)、巢蛋白 (nestin)呈阳性 ,胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)阴性。

天麻在肾缺血再灌注损伤中的作用机制

目的探讨天麻在大鼠肾缺血再灌注损伤中的保护作用及其机制。方法通过建立大鼠急性肾缺血再灌注损伤模型,测定天麻对肾缺血再灌注后血清BUN浓度、肾组织SOD活力、MDA及NO含量的变化。结果与对照组相比,使用天麻后,在灌注24h后血清BUN浓度明显下降(P<0.01),再灌注6,12和24h后肾组织SOD活力明显升高(P值分别<0.01,0.05,0.01),MDA含量明显降低(P值分别<0.05,0.01,0.05)。结论天麻在大鼠肾缺血再灌注损伤模型中有保护作用,其机制可能与天麻的抗自由基损伤和减轻脂质过氧化的作用有关。

三七总皂苷对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用及其线粒体机制

目的:观察三七总皂苷(血栓通注射液的药物成分)对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用,分析其可能的线粒体机制。方法:实验于2006-01/09在广州医学院病理生理学实验室完成。实验分组:取108只SD雄性大鼠,随机分为假手术组、缺血再灌注模型组、三七总皂苷组,每组36只。实验干预:①假手术组:实验前1h腹腔注射生理盐水,全麻下行右肾摘除,左肾暴露40min后取下。②缺血再灌注模型组:实验前1h腹腔注射生理盐水,全麻下行右肾摘除,左肾动脉夹闭缺血45min后再灌注1h。③三七总皂苷组:实验前1h腹腔注射血栓通注射液70mg/kg,其余方法同缺血再灌注模型组。实验评估:①再灌注后1h取肾组织匀浆检测肾组织超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量。②测血浆肌酐、尿素氮、血清降钙素基因相关肽含量。③电镜观察肾组织线粒体超微结构的改变。④检测线粒体细胞色素氧化酶、琥珀酸脱氢酶活性,Ca2+含量。结果:108只大鼠均进入结果分析。①三七总皂苷组肾组织超氧化物歧化酶活性高于缺血再灌注模型组;丙二醛含量低于缺血再灌注模型组。②三七总皂苷组血浆肌酐、尿素氮含量低于缺血再灌注模型组;降钙素基因相关肽水平高于缺血再灌注模型组。③电镜观察三七总皂苷组线粒体结构有明显的改善,嵴数目减少不多,且排列较整齐,没有线粒体崩解的情况。④三七总皂苷组肾组织线粒体中细胞色素氧化酶、琥珀酸脱氢酶活性高于缺血再灌注模型组;Ca2+含量低于缺血再灌注模型组。结论:三七总皂苷对肾缺血再灌注损伤有明显保护作用,其保护作用机制与直接清除自由基,提高琥珀酸脱氢酶、细胞色素氧化酶活性、升高血清降钙素基因相关肽水平,降低钙超载,从而减轻线粒体损伤有关。

桑根酮C通过激活caspase 3及caspase 9诱导前列腺癌PC3细胞凋亡

目的探讨桑根酮C诱导雄激素非依赖型前列腺癌PC3细胞凋亡的作用及其可能机制。方法 MTT法检测桑根酮C对PC3细胞増殖的抑制作用:实验分6组,分别加入不同浓度的桑根酮C(0、1、5、20、50、100μmol/L),作用24 h检测细胞生长抑制率;20μmol/L桑根酮C加入PC3细胞,分别于0、6、12、24、48 h收集细胞,MTT法检测生长抑制率。流式细胞技术检测细胞凋亡率:20μmol/L桑根酮C加入PC3细胞,分别于0、12、24、48 h收集细胞检测凋亡率。荧光分光光度计检测caspase 3的活性:20μmol/L桑根酮C作用PC3细胞,分别在0、6、12、18、24、48 h收集细胞,检测caspases 3的活性。MTT法检测caspase 3、caspase 8及caspase 9抑制剂对桑根酮C抑制PC3细胞增殖的影响:实验分4组,分别加入DMSO、z-DEVD-fmk、z-LEHD-fmk及z-IETD-fmk,1 h加入桑根酮C,24 h收集细胞,MTT法计算细胞生长抑制率。结果桑根酮C能抑制PC3细胞的增殖,呈剂量、时间依赖性,桑根酮C 1、5、20、50、100μmol/L作用PC3细胞24 h的增值抑制率分别为:4.86%、12.92%、52.34%、82.05%、87.45%,1μmol/L组与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),其他组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。半数有效抑制浓度IC50为18.76μmol/L。20μmol/L桑根酮C作用PC3细胞,分别在6、12、24、48、72 h检测增值抑制率为:10.57%、27.09%、51.88%、80.73%、87.99%,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。20μmol/L桑根酮C可诱导PC3细胞的凋亡,在12、24、48 h的凋亡率分别为:7.43%、20.91%、37.56%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。检测caspases 3的活性18 h比对照组增加了7.6倍,应用caspase抑制剂后发现caspase 3及caspase 9的抑制剂可显著逆转桑根酮C对PC3细胞增殖的抑制作用,抑制率从52.48%降到24.29%及28.81%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。而caspase8抑制剂作用不明显,与对照组相比差异没有统计学意义(P>0.05)。结论桑根酮C可通过激活caspase 3及caspase 9途径诱导PC3细胞的凋亡。

大鼠骨髓间质干细胞用肾上腺素类激素诱导为神经细胞的研究

目的 :体外诱导大鼠骨髓间质干细胞 (MSC)分化为神经细胞。方法 :SD大鼠股骨骨髓细胞体外扩增。用肾上腺素、去甲肾上腺素和异丙肾上腺素注射液分别加入无血清L -DMEM诱导MSC分化为神经细胞。免疫细胞化学鉴定有神经元烯醇化酶 (NSE)、神经干细胞标志物巢蛋白 (nestin)和胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)表达。结果 :大鼠骨髓间质干细胞在体外扩增 5 - 2 2代 ,对照组不加任何诱导剂 ,有 5 3%的神经样细胞。加入肾上腺素、去甲肾上腺素和异丙肾上腺素诱导 1- 5h ,约 70 %MSC形态转变为典型的神经样细胞。免疫细胞化学显示诱导出的神经样细胞NSE、nestin、GFAP表达阳性。继续培养 5d后对照组神经样细胞逐渐凋亡。肾上腺素类各组虽存活 6d ,但细胞正常形态改变 ,部分细胞死亡漂浮。一瓶MSC在正常培养至第 7代时 ,自发出现约 5 0 %的神经细胞 ,传至第 13代 ,有约 6 0 %的神经细胞 (6 6 .5 %± 6 .4 % )。结论 :骨髓本身可能存在着神经干细胞。大鼠骨髓间质干细胞用肾上腺素类诱导可分化为多种形态的神经细胞。

发病前细菌感染抑制过敏性哮喘发作的实验研究

目的:研究发病前细菌感染对过敏性哮喘发病的影响。方法:用豚鼠作动物模型,观察金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌、肺炎双球菌等4种呼吸道常见细菌感染之后哮喘发作时肺泡灌洗液中的白细胞总数、酸性粒细胞总数和百分比以及肺部的病理变化。结果:各细菌感染组肺泡灌洗液(BALF)中的白细胞总数均明显低于对照组,金黄色葡萄球菌组和大肠杆菌组酸性粒细胞总数和百分比明显降低,病理结果表明各细菌感染组的病变程度都要明显轻于对照组。结论:部分细菌感染后能够抑制哮喘的发作。

黄芩甙诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的实验研究

目的 黄芩甙体外定向诱导SD大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞。方法 通过贴壁法分离大鼠骨髓间充质干细胞 ,体外扩增培养。中药黄芩甙定向诱导分化为类神经元样细胞。光镜下观察细胞形态 ,免疫细胞化学检测神经细胞特异性抗原标志物神经元烯醇酶 (NSE)、巢蛋白 (Nestin)、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)的表达。结果 大鼠骨髓间充质干细胞可通过贴壁法成功分离并可在体外大量扩增。黄芩甙诱导 5h后大部分骨髓间充质干细胞转变为神经元样细胞 ,出现胞体和突起 ,免疫细胞化学染色NSE及Nestin呈阳性 ,GFAP阴性。结论黄芩甙可在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞。

漆树酸联合紫杉醇对肝癌细胞生长抑制和凋亡的影响

目的:评价漆树酸和紫杉醇联合用药对人肝癌HepG2细胞是否具有协同作用。方法:人肝癌HepG2细胞经漆树酸和(或)紫杉醇处理后,MTS法检测细胞增殖情况,流式细胞仪技术检测细胞凋亡,Westernblot方法检测Bax、Bcl-2及Caspase-3、8、9和PARP凋亡相关蛋白的变化。结果:漆树酸和紫杉醇联合应用能够明显增强对HepG2细胞的增殖抑制,与单独用药组相比具有明显的协同作用。漆树酸联合紫杉醇可以明显诱导HepG2细胞凋亡。两药联合作用可以诱导Bax表达增加,Bcl-2表达减少,Bax/Bcl-2比率增加,引起Caspase-3、8、9的活化,PARP的切割。结论:漆树酸和紫杉醇联合用药具有协同作用,明显增强抑制HepG2细胞的增殖和诱导细胞凋亡,其作用机制可能与Caspase系统活化相关。

转LacZ基因骨髓间充质干细胞体内造血分化的初步研究

目的 初步探讨小鼠骨髓间充质干细胞在体内造血细胞分化的潜能。方法 利用转LacZ基因小鼠MSCs输注X射线亚致死量照射的BALB/C小鼠,2个月后取骨髓细胞作体外甲基纤维素培养和X -Gal染色,取肝脏X -Gal染色。结果 MSCs输注组和对照组骨髓细胞体外集落培养均能形成鹅卵石样造血细胞集落,经X -gal组化染色后,输注组部分造血集落产生蓝绿色,对照组没有颜色变化。肝脏X -Gal染色输注组部分产生蓝色,对照组没有颜色变化。结论 小鼠MSCs具有向造血细胞分化的潜能。

转LacZ基因骨髓间充质干细胞体内造血分化的初步研究

目的初步探讨小鼠骨髓间充质干细胞在体内向造血细胞分化的潜能。方法利用转LacZ基因小鼠MSCs输注X射线亚致死量照射的BALB/C小鼠,2个月后取骨髓细胞作体外甲基纤维素培养和X-Gal染色,取肝脏X-Gal染色。结果MSCs输注组和对照组骨髓细胞体外集落培养均能形成鹅卵石样造血细胞集落,经X-gal组化染色后,输注组部分造血集落产生蓝绿色,对照组没有颜色变化。肝脏X-Gal染色输注组部分产生蓝色,对照组没有颜色变化。结论小鼠MSCs具有向造血细胞分化的潜能。