雷公藤-甘草配伍干预肾病综合征大鼠AVPR2/AQP2的表达

目的探讨阿霉素诱导的肾病综合征大鼠AVPR2和AQP2的表达以及雷公藤-甘草配伍的干预机制。方法选取成年健康雄性SD大鼠,随机选取10只作为空白组,其余大鼠均接受尾静脉注射给予6.5 mg·kg^(-1)的阿霉素诱导复制大鼠肾病综合征模型。并采用随机数字法将造模成功的大鼠分为4组(n=10):模型组(n=10)、阳性对照组(雷公藤多苷片80 mg·kg^(-1)·d^(-1),n=10)、雷公藤组(雷公藤提取物240 mg·kg^(-1)·d^(-1),n=10)及雷公藤-甘草组(雷公藤提取物240 mg·kg^(-1)·d^(-1)+甘草提取物80 mg·kg^(-1)·d^(-1),n=10)。测定大鼠24 h尿蛋白含量、血清白蛋白、尿素、肌酐水平、肾脏中AVPR2和AQP2 mRNA表达水平。结果大鼠经阿霉素造模后表现出大量蛋白尿、低蛋白血、高度水肿症候。相比于模型组,雷公藤及配伍给药组大鼠精神状态较好,体质量增加明显。与模型组相比,雷公藤组24 h尿蛋白、尿素、AQP2 mRNA表达均显著下降(P<0.05);雷公藤-甘草组24 h尿蛋白、血清白蛋白、尿素、肌酐、AVPR2 mRNA及蛋白、AQP2 mRNA及蛋白表达均显著回调(P<0.05)。相比于雷公藤组,雷公藤-甘草组的24 h尿蛋白、血清白蛋白、AVPR2 mRNA、AQP2蛋白表达回调更加显著(P<0.05)。结论雷公藤可显著降低肾病综合征大鼠AVPR2和AQP2 mRNA高表达,且与甘草配伍后效果更优,雷公藤-甘草配伍给药干预阿霉素诱导的肾病综合征大鼠的机制与纠正AVPR2与AQP2的高表达、减少水的重吸收有关。

苦芪滴丸成型工艺研究

目的:确定苦芪滴丸的成型工艺。方法:以滴丸的外观质量为评价标准,对基质与冷凝液的选择、滴速、滴距采用单因素平行实验法;以滴丸的溶散时限、外观质量及丸重差异为考察指标,对提取物与基质的用量配比、滴制温度、冷凝剂温度采用正交试验法,优选出最佳滴制条件。结果:最佳工艺为PEG6000-PEG4000=3:2作为基质,药物与基质比为1:2,液体石蜡(上层)-二甲基硅油(下层)=1:3作为冷却剂,药液温度80℃,以每分钟20～25滴的速度,滴入10℃左右的冷却剂中,滴距为5～8cm,滴丸外观质量最好。结论:通过上述试验确定的成型工艺合理,所制滴丸符合药典规定。

LC-MS/MS法测定布洛芬颗粒剂的人体生物等效性研究

目的研究布洛芬颗粒在健康人体内的药动学及其生物利用度,以评价其与布洛芬混悬液的生物等效性。方法 23例健康男性志愿受试者,采用随机、开放、单剂量、双周期自身交叉试验设计。分别口服布洛芬颗粒(受试制剂)与布洛芬混悬液(参比制剂)后,采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定血浆中布洛芬的药物浓度。结果受试制剂与参比制剂的Cmax分别为(17.438 6±5.304 0)、(18.557 7±4.641 7)mg/L,AUC0-24分别为(59.000 3±13.935 3)、(58.506 4±16.720 2)mg/(h·L),AUC0-∞分别为(59.718 0±14.020 0)、(59.227 8±16.815 8)mg/(h·L),Tmax分别为(1.478 3±0.922 9)、(1.021 7±0.822 0)h。结论空腹口服布洛芬颗粒受试制剂与参比制剂具有生物等效性。

UPLC法同时测定生脉注射液中6种指标性成分

目的：建立超高效液相色谱法同时测定生脉注射液中六种指标性成分的方法。方法：采用UPLC法同时测定：人参皂苷Rg1;人参皂苷Rb1;人参皂苷Rb2;人参皂苷Re;人参皂苷Rg3;五味子醇甲。选用Waters BEH C18色谱柱（2.10 mm×50 mm×1.7μm）;以乙腈-水进行梯度洗脱;流速为0.3 mL·min^-1;检测波长为203 nm。结果 6种指标性成分在5～200μg/mL浓度范围内,其浓度和峰面积有良好的线性关系,方法加样回收率在94.2%～100.1%之间,精密度、重现性和加样回收率的RSD均符合要求。结论：该方法简便、快速、重现性好,可用于同时测定生脉注射液中的6种成分,为生脉注射液的质量控制提供了理论依据。

LC-MS/MS法测定血浆中麦冬皂苷D’的含量

目的:测定生脉注射液中麦冬皂苷D’在Beagle犬血浆中的含量。方法:应用LC-MS/MS分析方法,以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,测定血浆中麦冬皂苷D’浓度。结果:麦冬皂苷D’线性范围分别为10.90~877.50μg·L^(-1),回收率在85.40%~94.01%,日内、日间RSD值均小于15%。麦冬皂苷D’药代动力学参数t1/2(0.083±0.015)h,Cmax(116.801±2.645)μg·L^(-1)AUC0-∞(221.549±3.127)μg·h·L^(-1)。结论:本方法简便快速、灵敏度高,适用于血浆中麦冬皂苷D’的含量测定。

LC-MS法测定麦冬皂苷D’浓度的不确定度评定

目的:评定LC-MS法测定血浆中麦冬皂苷D’浓度的不确定度。方法:对测定方法的全过程进行分析,建立评定其不确定度的数学模型,确定影响不确定度的因素并对各个不确定度因素进行评估,计算合成不确定度并进行扩展。结果:置信概率P为95%时,血浆中低(35.10μg/L)、中(280.80μg/L)、高(702.00μg/L)浓度麦冬皂苷D’的扩展不确定度分别为:6.22、7.64、76.50μg/L。结论:本方法适用于LC-MS法测定人血浆中麦冬皂苷D’浓度的不确定度评定。

苦芪滴丸中氧化槐果碱在大鼠血浆中的药代动力学研究

目的：建立测定血浆中氧化槐果碱浓度的高效液相色谱法,并用此方法进行苦芪滴丸中氧化槐果碱的药代动力学研究。方法色谱柱为Inertsil-NH2（150 mm ×4．6 mm,5μm）；流动相：乙腈-无水乙醇-3%磷酸水（86∶8∶6）；流速：1．0 mL/min；检测波长：220 nm；进样量：20μL。结果血浆中氧化槐果碱的线性范围：0．20~20μg/mL,r=0．993,最低检测限为0．20μg/mL。日内、日间精密度及准确度、提取回收率符合要求。6只大鼠灌胃给药8．5 mg/kg苦芪滴丸后,血浆中氧化槐果碱Tmax为（4．03±0．72）h,Cmax为（4．00±0．54）ng/mL, t1/2为（0．05±0．66）h,采用梯形法计算,AUC0-t为（30．70±0．54）μg·h/mL,AUC0-∞为（30．8±0．32）ng·h/mL。结论本方法简便、快速、准确、专属性强,可用于苦芪滴丸中氧化槐果碱的药代动力学研究。

清血通脉饮对脂肪肝模型大鼠肝组织中CYP2E1、p38MAPK、CRP表达的影响

目的观察清血通脉饮对大鼠非酒精性脂肪肝模型的影响。方法将60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、清血通脉饮(1.8 g/kg低剂量组,3.6 g/kg中剂量组,7.2 g/kg高剂量组),阿托伐他汀钙片对照组(10 mg/kg),除空白组外其余各组采用高脂饲料喂养大鼠8周,空白组、模型组灌胃给予蒸馏水,其余各组灌胃给与相应药物,给药容积(10 mL/kg),边造模边给药8周。实验结束后,检测各组大鼠血清谷丙氨酸转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)的活性以及肝组织中的甘油三酯(TG)的含量,并采用苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织脂肪变性损伤程度,采用免疫组化法检测肝组织中CYP2E1、p38 MAPK及CRP的表达。结果清血通脉饮可显著降低脂肪肝模型大鼠肝组织中TG的含量(P<0.0)。清血通脉饮可显著降低脂肪肝模型大鼠血清GPT、GOT的活性(P<0.05)。清血通脉饮可显著降低脂肪肝模型大鼠的肝细胞脂肪变性损伤程度。清血通脉饮可显著降低CYP2E1及CRP在脂肪肝模型大鼠肝组织中的表达(P<0.05)。清血通脉饮可显著增加p38 MAPK在脂肪肝模型大鼠肝组织中的表达(P<0.05)。结论研究结果表明清血通脉饮对高脂饮食诱发的脂肪肝及脂肪肝形成对肝组织的损害具有防治作用。

超高效液相色谱法测定人体血浆中水杨酸含量的方法学研究

目的:建立人体血浆中水杨酸含量的超高效液相色谱(ultra performance liquid chromatography,UPLC)测定方法。方法:采用Waters Spursil C18(100 mm×2.10 mm,3μm)色谱柱;乙腈∶水(含0.2%磷酸)=20.7∶79.3为流动相,用前经0.22μm的滤膜过滤,超声脱气;流速为0.3 ml/min;检测波长为304 nm;柱温为35℃,进样量5μl。结果:此方法最低检测浓度为0.018 mg/L,线性范围为0.018～28.200 mg/L,方法平均回收率在95.52%～104.63%,日内及日间精密度的相对标准差均<10%。结论:该方法简便、快速、重现性好,可用于临床血药浓度监测和复方制剂的药代动力学和生物利用度研究。

苍附导痰汤加二甲双胍联合穴位埋线对肥胖型多囊卵巢综合征不孕症患者免疫功能及肠道菌群的影响

目的观察苍附导痰汤加二甲双胍联合穴位埋线对肥胖型多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)不孕症患者免疫功能及肠道菌群的影响。方法选取肥胖型PCOS不孕症120例,采用随机数字表法随机将其分为观察组和对照组两组各60例,其中84例顺利完成研究,观察组40例,对照组44例。观察组采用苍附导痰汤加二甲双胍联合穴位埋线进行治疗,对照组采用苍附导痰汤加二甲双胍进行治疗,均治疗12周。比较两组治疗前后T细胞免疫应答指标、胰岛素抵抗指标和肠道菌群情况,并观察两组治疗期间不良反应发生情况。结果治疗前,两组T细胞免疫应答指标、胰岛素抵抗指标及肠道菌群情况比较差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、白细胞介素-10(IL-10)水平及乳酸杆菌、双歧杆菌均较治疗前升高;血清白细胞介素-17(IL-17),空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2 h PBG)、空腹胰岛素(FINS)、稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)水平,以及肠杆菌均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.01)。治疗后,观察组血清TGF-β1、IL-10水平及乳酸杆菌、双歧杆菌高于对照组;血清IL-17,FBG、2 h PBG、FINS、HOMA-IR水平,以及肠杆菌低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。治疗期间,观察组出现皮疹5例,因埋线导致皮肤红肿1例;对照组出现皮疹5例。结论苍附导痰汤加二甲双胍联合穴位埋线应用于肥胖型PCOS不孕症可以减少胰岛素抵抗、纠正Treg/Th17失衡、调节T细胞免疫应答、改善肠道微生物稳态失衡,且不良反应较少。

参麦注射液活性成分在正常和心肌缺血Beagle犬体内的药动学研究

目的:研究参麦注射液活性成分人参皂苷Rg1、人参皂苷Re在正常和心肌缺血Beagle犬体内的药动学。方法:取6只Beagle犬sc盐酸异丙肾上腺素(1.1 mg/kg)以复制心肌缺血模型(模型组),另取6只犬sc等体积生理盐水(2.2 ml/kg)作为对照组。两组犬分别于第1天上午8:00、下午13:00和第2天上午8:00给药。第2天给药后1 h,各组犬iv参麦注射液(1.6 ml/kg),在1h左右滴注完成。各组犬于iv开始后0、0.25、0.5、0.75、1(iv结束)、1.5、2、3、4、6、8、12、24 h取血。采用液相色谱-质谱联用法测定人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的血药浓度,Win Nonlin 6.3软件计算药动学参数并进行比较。结果:人参皂苷Re在模型组犬体内的t_(1/2)为(2.69±1.12)h,AUC_(0-24 h)为(2 060.78±812.18)h·μg/L,V_z为(46.16±20.98)ml,CL为(9.02±4.45)ml/h;与正常组比较,AUC_(0-24 h)显著升高,V_z、CL显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。而两组犬人参皂苷Rg_1的药动学参数无显著性差异(P>0.05)。结论:心肌缺血会影响Beagle犬体内人参皂苷Re的消除,对人参皂苷Rg_1药动学过程无明显影响。

生脉注射液与参麦注射液在心绞痛患者体内的药代动力学

目的:比较研究生脉注射液与参麦注射液中人参皂苷类成分在稳定型心绞痛患者内的药代动力学变化。方法:20名稳定型心绞痛患者分成2组,交叉试验,两组分别一次性滴注生脉注射液与参麦注射液,采用质谱法检测人参皂苷类成分不同时间点的血药浓度,计算药代动力学参数并对其进行比较。结果:两组患者分别静脉滴注生脉注射液和参麦注射液后,人参皂苷Rg_1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb_1和人参皂苷Rc的达峰血药浓度参麦组均高于生脉组,且有统计学意义(P≤0.05);人参皂苷Rg_1的半衰期,人参皂苷Rc的表观分布容积和清除率,人参皂苷Rd达峰时间两组间亦均有差异(P≤0.05);而其他药动参数均无显著性差异。结论:两组患者分别一次性滴注生脉注射液与参麦注射液,人参皂苷Rg_1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb_1、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd在患者体内的药代动力学特征存在差异,临床用药应对患者辨证施治。

LC-MS法测定人血浆中人参皂苷Rb_1浓度的不确定度评定

目的:评定LC-MS法测定人血浆中人参皂苷Rb_1浓度的不确定度。方法:对LC-MS法测定人血浆中人参皂苷Rb_1浓度的全过程进行分析,建立数学模型评定其不确定度,确定影响不确定度的因素并对各个因素进行评估,计算合成不确定度并进行扩展。结果:置信概率P为95%时,血浆中低(4.73μg/L)、中(94.50μg/L)、高(7 560μg/L)浓度人参皂苷Rb_1的扩展不确定度分别为11.64、15.42、820.58μg/L。结论:本方法适用于LC-MS法测定人血浆中人参皂苷Rb_1浓度的不确定度评定,不确定度主要由线性回归过程引入。

挥发油对黄芩中主要黄酮成分的透皮影响

目的考察陈皮油、莪术油、川芎油、石菖蒲油4种挥发油对黄芩中黄酮成分的透皮影响。方法采用体外透皮试验方法,以接受液中黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素为指标,建立稳态扩散模型,从累积渗透-时间方程求得渗透速率常数,并计算增渗倍数。结果 4种挥发油对黄芩中3种黄酮成分透皮影响不同,陈皮油对黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素均有促透作用;莪术油对黄芩苷、汉黄芩苷有促透作用;石菖蒲油对黄芩素有促透作用;川芎油不但未显示促透作用反而抑制了3种成分的透皮。综合指标显示4种油对黄芩促透作用强度顺序为:陈皮油>莪术油>石菖蒲油>川芎油。结论陈皮油、莪术油对黄芩具有促透作用。

雷公藤提取物与甘草提取物配伍对肾病模型大鼠血液学指标的影响

目的:探讨雷公藤提取物与甘草提取物配伍的减毒增效作用。方法:采用雷公藤提取物及雷公藤提取物与甘草提取物的不同剂量配比,干预肾病模型大鼠,检测对大鼠体重、24 h尿蛋白、血液学主要指标的影响,观察雷公藤与甘草配伍的减毒增效作用。结果:阿霉素造肾病模型对大鼠体重、24 h尿蛋白量、血液系统有明显的毒性作用。使大鼠体重下降,24 h尿蛋白量升高,血液红细胞、血红蛋白、血小板明显减少。对于上述毒性表现,雷公藤提取物和雷公藤提取物与甘草提取物配伍均能显示一定的治疗和改善作用,在治疗和改善程度上雷公藤提取物与甘草提取物配伍优于雷公藤提取物。结论:甘草提取物对雷公藤提取物具有一定的减毒增效作用。

生脉注射液中人参皂苷Rb_1在心绞痛患者体内的PK-PD结合模型研究

目的:建立生脉注射液中人参皂苷Rb_1在心绞痛患者体内的PK-PD结合模型。方法:10名稳定性心绞痛受试者静脉滴注生脉注射液,连续给药14天,于给药后不同时间点采集血浆样品,采用质谱法检测人参皂苷Rb1的血药浓度,绘制药-时曲线,进行非房室模型拟合并计算PK参数;以受试者的收缩压和舒张压作为药效指标,进行PK-PD模型的拟合,计算PK-PD结合模型参数。结果:10名受试者静脉滴注生脉注射液后,人参皂苷Rb_1在心绞痛受试者体内的药动学过程符合一室模型,生脉注射液中人参皂苷Rb_1的降压效应滞后于血药浓度,效应与效应室浓度呈良好的相关性,符合Inhibitory Effect Imax模型。结论:该研究成功建立了生脉注射液中人参皂苷Rb_1在心绞痛患者体内的PK-PD结合模型,可有效地用于评价生脉注射液的药效物质基础。

LC-MS法测定人血浆中人参皂苷Rg_1浓度的不确定度评定

目的:评定LC-MS法测定人血浆中人参皂苷Rg1浓度的不确定度。方法:对LC-MS法测定人血浆中人参皂苷Rg1浓度的全过程进行分析,建立数学模型评定其不确定度,确定影响不确定度的因素并对各个不确定度因素进行评估,计算合成不确定度并进行扩展。结果:置信概率P为95%时,血浆中低(2.55μg/L)、中(50.90μg/L)、高(814.40μg/L)浓度人参皂苷Rg1的扩展不确定度分别为7.24μg/L、9.32μg/L及98.50μg/L。结论:本方法适用于LC-MS法测定人血浆中人参皂苷Rg1浓度的不确定度评定,不确定度主要由线性回归过程引入。

人参皂苷Rg_1微乳的制备及其表征

目的:制备人参皂苷Rg_1微乳剂,并对其理化性质进行考察。方法:选择适宜的油相、表面活性剂和助表面活性剂,利用伪三元相图筛选微乳处方,研制出适合经口给药的微乳制剂并对其进行表征。结果:所制备的人参皂苷Rg_1微乳剂为无色澄清、透明均一的溶液。最优处方为油酸乙酯:HS 15∶乙醇∶5%葡萄糖溶液=12.5∶33.0∶11.0∶43.5。结论:通过优化处方制备的人参皂苷Rg_1微乳理化性质稳定,载药量提高。

黄芪和苦参不同配伍比例对小鼠免疫功能影响的研究

目的:通过黄芪、苦参的配伍比例(以质量比计)变化对小鼠的免疫功能的影响研究来探讨黄芪和苦参配伍增强机体免疫力的最佳配伍比例。方法:利用ELISA法检测血清中的白介素2(IL-2)水平,微量溶血分光光度法检测血清溶血素的生成,显微镜下观察腹腔巨噬细胞吞噬功能,测定黄芪和苦参不同配伍比例对小鼠免疫功能影响。结果:黄芪和苦参以1∶2配伍比例能够促进血清中IL-2的水平和血清溶血素的生成以及增强腹腔巨噬细胞的吞噬功能;结论:黄芪和苦参以1∶2配伍比例为最佳增强免疫力配伍比例。

HPLC法同时测定苦参中5种生物碱的含量

目的：建立用HPLC同时测定苦参中5种生物碱含量的方法。方法：采用Inertsil—NH2柱（150mm×4．6mm，5μm）；流动相为乙腈-无水乙醇-3％磷酸溶液（86：8：6）；流速1．0mL／min；检测波长210nm。结果：槐果碱在0．01136-0．05680μg范围内，苦参碱在0，02560—0．12800μg范围内，氧化槐果碱在0．08640—0．43200峭范围内，槐定碱在0．04188—0．20940μg范围内，氧化苦参碱在0．5186—2．5930μg范围内线性关系均良好。结论：本方法适用于苦参中5种生物碱的含量测定。