菱角壳的化学成分和药理活性研究进展

近年来对菱角壳的研究主要分为化学成分和药理活性研究两个方面,其中化学成分方面的研究可以概括为生物碱、酚酸类、萜类和甾体、多糖类、黄酮类5个方面;药理活性方面的研究可以概括为抗癌活性、抗氧化活性、降低α-葡萄糖苷酶活性、保肝护肝活性、抗菌活性5个方面。目前在化学成分方面的研究较弱,从研究结果来看,没食子酸及其衍生物是菱角壳的主要药用成分。最后就菱角壳的开发利用提出了几点建议。

DNA条形码技术在部分菱属植物分子鉴定中的应用

为了弥补形态学鉴定方法的不足,本研究利用DNA条形码技术,选取标准基因序列对部分菱属植物进行初步的分子鉴定。通过对浙江、江苏2省南湖菱、两角菱、四角菱的ITS,mat K和rbc L序列扩增及多重序列比对,探寻菱属植物的分子鉴定方法。克隆了菱属植物692 bp的ITS序列、878 bp的mat K序列及685 bp的rbc L序列,其中mat K和rbc L序列不存在变异位点,不能用于鉴定菱属植物;ITS序列存在20个变异位点,包括6处插入/缺失和14处碱基置换,在部分菱属植物的分子鉴定中具有应用价值。

芦笋食用与废弃部分皂苷含量的比较研究

目的优化芦笋皂苷提取工艺,比较芦笋食用部分和废弃部分的皂苷含量。方法采用超声提取法,以芦笋中皂苷的提取率为指标,采用单因素实验和正交实验考察乙醇浓度、料液比、提取时间和提取温度对超声法提取芦笋两部分中总皂苷的影响,并用紫外分光光度法测定皂苷在两部分中的含量。结果芦笋食用部分总皂苷最佳提取条件为提取温度为70℃,提取时间为2h,料液比为1∶15,乙醇浓度为10%,提取率为179.83mg·g-1;芦笋废弃部分总皂苷最佳提取条件为提取温度为40℃,提取时间为2.5h,料液比为1∶15,乙醇浓度为30%,提取率为117.81mg·g-1。结论经SPSS软件进行独立样本T检验,得知芦笋食用与废弃部分粗提物中皂苷的含量差异较大,需待进一步进行研究。

人YAP1基因亚型的质粒构建及表达鉴定

目的:构建人Yes相关蛋白1(YAP1)基因亚型1δ、2δ的真核表达载体并进行瞬时表达鉴定,为研究YAP1亚型间的区别及其在肿瘤中的作用打下基础。方法:在已有pCI_2-Flag-YAP1-2γ质粒的基础上,利用重叠PCR增加碱基的方法得到YAP1-2δ的片段,再同理删减WW基因序列得到YAP1-1δ片段,通过Cla I和Sal I两个酶切位点将片段和pCI_2载体相连接,构建pCI_2-Flag-YAP1-1δ及pCI_2-Flag-YAP1-2δ质粒。利用测序确认完整的DNA序列。在HEK293细胞中瞬时转染质粒,用Western blot方法检测YAP1两个亚型的蛋白表达。结果:重组质粒经双酶切和基因测序比对鉴定正确,HEK293细胞经瞬时转染表达出YAP1-1δ和YAP1-2δ蛋白。结论:成功构建了pCI_2-Flag-YAP1-1δ及pCI_2-Flag-YAP1-2δ真核表达质粒,并在HEK293细胞内过表达成功。为进一步探讨YAP1各亚型对肿瘤发展的影响奠定基础。

芦笋食用部分和废弃部分多糖成分的研究

目的 优化芦笋多糖提取工艺,比较芦笋不同部位多糖含量,为芦笋工业化生产以及合理利用提供理论依据。方法 以多糖提取率为指标,对多糖进行超声提取,采用单因素和正交试验,分析乙醇浓度、料液比、提取时间、提取温度对多糖提取率的影响,从而得到最佳提取工艺。结果 正交试验结果 表明,芦笋食用部分最佳提取工艺:乙醇浓度为10%,料液比为1∶15,提取时间为2 h,温度为30℃。各因素影响次序为乙醇浓度>提取温度>料液比>提取时间。废弃部分最佳提取工艺:乙醇浓度为40%,料液比为1∶20,提取时间为2.5 h,温度为30℃。各因素影响次序为乙醇浓度>提取温度>提取时间>料液比。结论 经SPSS软件进行独立样本t检验,得知芦笋食用与废弃部分粗提物中多糖的含量差异较大,需待进一步进行研究。

YAP1基因敲除对胰腺癌L3.6细胞增殖及迁移能力的影响

目的:研究胰腺癌细胞中YAP1对胰腺癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法:利用CRISPR-Cas9技术,在人胰腺癌L3.6细胞中敲除YAP1基因,并用Western blot验证;通过MTT比色法及EdU流式检测敲除YAP1前后的癌细胞增殖能力;用细胞划痕及Transwell实验研究迁移能力。结果:成功获得YAP1敲除的L3.6稳定细胞株(YAP1-KO)。相对于野生型的L3.6细胞,YAP1-KO细胞的增殖与生长能力明显下降,细胞迁移能力也明显减弱。结论:YAP1基因敲除显著降低胰腺癌L3.6细胞的增殖和迁移能力,可能为靶向治疗胰腺癌提供新的潜在靶标。

芦笋食用部分与废弃部分总黄酮含量比较

目的:比较芦笋食用部分与废弃部分总黄酮的含量。方法:采用超声波提取嘉兴本地芦笋食用部分与废弃部分的总黄酮,并利用L9(34)正交表试验方案设计,确定总黄酮的最佳提取工艺,比较芦笋食用部分与废弃部分总黄酮含量的差异性。结果:芦笋食用部分总黄酮最佳超声提取工艺条件为:乙醇浓度50%,料液比1∶20,提取温度70℃,提取时间2.5h;废弃部分总黄酮最佳超声提取工艺条件为:乙醇浓度70%,料液比1∶10,提取温度60℃,提取时间2.5h。结论:经比较,芦笋食用与废弃部分中总黄酮的含量没有显著性差异。