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耻垢分枝杆菌DNA末端结合蛋白Ku的表达、纯化及酶学性质研究
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作者 林雅宁 董智聪 +1 位作者 占景华 徐忠玉 《国际检验医学杂志》 CAS 2013年第7期782-783,共2页
目的构建耻垢分枝杆菌末端结合蛋白Ku原核表达载体,并进行表达纯化及酶学测定。方法以耻垢分枝杆菌str.MC2 155基因组DNA为模板,PCR法扩增ku基因,构建pQE-30-ku重组质粒,在表达宿主菌E.coli M15中诱导表达蛋白,Ni2+-NTA亲和层析柱纯化,... 目的构建耻垢分枝杆菌末端结合蛋白Ku原核表达载体,并进行表达纯化及酶学测定。方法以耻垢分枝杆菌str.MC2 155基因组DNA为模板,PCR法扩增ku基因,构建pQE-30-ku重组质粒,在表达宿主菌E.coli M15中诱导表达蛋白,Ni2+-NTA亲和层析柱纯化,最后通过凝胶迁移电泳实验测定Ku蛋白与5′粘末端、3′粘末端和平末端3种不同末端DNA结合情况。结果成功构建了ku原核表达载体pQE-30-ku,并能在宿主菌E.coli M15中表达,纯化后具有结合不同末端DNA的酶活性。结论 Ku基因克隆到原核宿主菌中能进行表达、纯化,纯化后的蛋白具有结合不同末端DNA的生物学活性,为分枝杆菌非同源末端连接的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 分枝杆菌属 基因 聚合酶链反应
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他克莫司胶囊微生物限度检查法验证的探讨 被引量:2
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作者 占景华 石鹤坤 +2 位作者 钟渊福 董智聪 胡永狮 《实用药物与临床》 CAS 2014年第11期1442-1445,共4页
目的按2010版《中国药典》的要求探讨他克莫司胶囊微生物限度检测方法。方法选取5种具有代表性的微生物菌悬液,用常规法、稀释法、膜过滤法或其相结合的方法分别对他克莫司胶囊进行微生物验证试验。结果细菌总数用膜过滤法稀释1∶10,霉... 目的按2010版《中国药典》的要求探讨他克莫司胶囊微生物限度检测方法。方法选取5种具有代表性的微生物菌悬液,用常规法、稀释法、膜过滤法或其相结合的方法分别对他克莫司胶囊进行微生物验证试验。结果细菌总数用膜过滤法稀释1∶10,霉菌和酵母菌用膜过滤法稀释1∶1 000,检测后回收率均能达到70%以上。结论避免采用单一常规法或膜过滤法进行微生物限度检测,使实验科学合理,提高工作效率,更加规范性。 展开更多
关键词 微生物方法验证 稀释法 膜过滤法
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迷走神经刺激对兔脑爆炸伤后血清及脑组织中TNF-α、 IL-1β和IL-10水平的影响 被引量:8
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作者 周龙 林进皇 +3 位作者 郁毅刚 郭源 林俊明 董智聪 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期442-445,共4页
目的 探讨迷走神经刺激对兔脑爆炸伤后血清及脑组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)及白介素-10(IL-10)水平的影响. 方法 24只雄性新西兰大白兔按随机数字表法分为假手术组(6只)、爆炸伤组(10只)和迷走神经刺... 目的 探讨迷走神经刺激对兔脑爆炸伤后血清及脑组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)及白介素-10(IL-10)水平的影响. 方法 24只雄性新西兰大白兔按随机数字表法分为假手术组(6只)、爆炸伤组(10只)和迷走神经刺激组(8只),爆炸伤组和迷走神经刺激组制作兔脑爆炸伤模型,迷走神经刺激组爆炸伤后接受右侧颈迷走神经刺激(10V,5 Hz,刺激5 ms后间断195ms,持续20 min).各组兔行血清(伤后6 h)和脑组织(伤后24 h)TNF-α、IL-1β 和IL-10水平检测及脑组织含水量测定. 结果 爆炸伤组兔血清及脑组织内TNF-α水平[(595.63± 18.70) pg/mL、(16.08±0.68) pg/mg]、IL-1β水平[(71.26±2.72) pg/mL、(16.08±0.68) pg/mg]及脑组织含水量(81.2%±2.2%)均明显高于假手术组[对应值分别为(497.03± 16.87) pg/mL、(11.34±1.34) pg/mg、(51.46±3.59)pg/mL、(1.22±0.11) pg/mg、76.9%±1.2%]和迷走神经刺激组[对应值分别为(528.05±31.64) pg/mL、(13.14±1.40) pg/mg、(63.07±3.28) pg/mL、(1.35±0.13) pg/mg、79.5%±1.6%],差异有统计学意义(P<0.05);迷走神经刺激组兔血清及脑组织内IL-10水平[(34.65±3.70) pg/mL、(0.89±0.07) pg/mg]均明显高于假手术组[(22.43±2.87) pg/mL、(0.63±0.06) pg/mg]和爆炸伤组[(28.34±2.96) pg/mL、(0.71±0.06)pg/mg],差异有统计学意义(P<0.05). 结论 迷走神经刺激可通过降低血清及脑组织内TNF-α、IL-1β水平和升高IL-10水平来减轻脑爆炸伤后脑组织水肿程度,发挥脑保护作用. 展开更多
关键词 迷走神经刺激 爆炸伤 肿瘤坏死因子-α 白介素-1Β 白介素-10
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某军队医院医务人员科研能力调查分析 被引量:8
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作者 胡永狮 董智聪 +1 位作者 钟渊福 占景华 《人民军医》 2015年第5期594-595,共2页
目的:调查某军队医院医务人员科研能力情况,为制定相应措施提供依据。方法:采用自制的《科研情况调查表》,调查某医院近10年来发表在核心期刊以上的论文、获得的基金资助项目和取得的科研成果,分析影响科研成果产出的相关因素。结果:人... 目的:调查某军队医院医务人员科研能力情况,为制定相应措施提供依据。方法:采用自制的《科研情况调查表》,调查某医院近10年来发表在核心期刊以上的论文、获得的基金资助项目和取得的科研成果,分析影响科研成果产出的相关因素。结果:人员类别、年龄、学历、职称、任职情况、参加学术会议情况等因素影响科研能力和科研成果的产出。结论:应加强人才和科研意识培养,提高科研能力和水平。 展开更多
关键词 军队医院 医务人员 科研能力
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