拮抗酵母菌控制玉米赤霉烯酮的研究进展

玉米赤霉烯酮是一种有毒的真菌次生代谢产物,是世界上污染粮食范围最广泛的真菌毒素之一,它不仅具有生殖毒性,还具有细胞毒性、免疫毒性以及致癌作用。传统控制玉米赤霉烯酮的方法主要有物理法和化学法,但上述两种方法都具有局限性,近年来,采用拮抗酵母菌控制谷物中玉米赤霉烯酮展现出良好的应用前景。本文对拮抗酵母菌控制玉米赤霉烯酮的机制研究进行了综述,包括酵母菌细胞壁对玉米赤霉烯酮的吸附作用,酵母菌对玉米赤霉烯酮的降解作用,进一步探讨了相关作用对粮食污染生防效果的影响。

脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其乙酰化衍生物免疫亲和柱的研制

本实验采用抗DON杂交瘤细胞株SW-3 F4、SW-3 G12,分别制备出两种不同特性的单抗,然后与蛋白A-琼脂糖凝胶定向偶联,制备出了能同时分离净化DON、3-Ac-DON和15-Ac-DON的脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)及其乙酰化衍生物的三合一免疫亲和柱(IAC),并对其性能进行了评价。结果表明:抗体1和抗体2均为IgG1亚型,亲和常数分别为3.0×10~8 L/mol和2.0×10~9 L/mol,与DON、3-Ac-DON和15-Ac-DON的交叉反应率分别为100%、0.1%、453%和100%、101%、6%。制备的IAC柱,单标过柱的平均柱容量DON、3-Ac-DON和15-Ac-DON依次为3 243 ng/0.25 mL、1 285 ng/0.25 mL和1 527 ng/0.25 mL,非特异性吸附率小于2.3%,3种毒素在小麦基质中平均加标回收率均大于89%。本实验制备的IAC柱容量大、回收率高,适于DON及其乙酰化衍生物的纯化分离。

呕吐毒素时间分辨荧光免疫层析法的建立与评价

构建并评价了呕吐毒素(Deoxynivalenol,DON)时间分辨荧光免疫层析法(TRFIA)。以Eu^(3+)螯合物的纳米微球为荧光探针标记抗DON单抗,采用竞争抑制建立免疫层析定量方法,优化了微球与抗体标记量,检测的环境温度、反应时间、加样体积及缓冲体系;研究了方法的灵敏度、精密度及准确度。结果表明,每100μL荧光微球结合纯单抗50μg,最佳划膜浓度为1.0 mg/m L,最佳测定条件为室温(25±2)℃,10 min,加样体积100μL,PBS (0.01 mol/L,pH7.2)的缓冲体系,方法的灵敏度为0.25 ng/m L,线性范围为0.5~25.0 ng/m L,玉米、小麦阴性样本(加标浓度200、500、1000、2000μg/kg)平均加标回收率为91.4%~109.3%,6种典型样本经TRFIA与免疫亲和净化-高效液相色谱法(IAC-HPLC)同时测定DON含量,相关系数r达0.9754。TRFIA具有灵敏度高、速度快、定量准等技术特点,适用于谷物及制品中DON的快速定量。

时间分辨荧光免疫层析法检测大米中黄曲霉毒素B_1的不确定度分析

对采用时间分辨荧光免疫层析法(TRFIA)测定大米中黄曲霉毒素B1(AFB1)含量的不确定度进行分析,找出影响不确定度的主要分量。根据CNAS GL06—2006《化学分析中不确定度的评估指南》中提供的方法,建立数学模型,分析测定过程中各不确定度分量的来源,并对其进行量化和评定。结果表明,相对标准合成不确定度为3.703%、相对标准总不确定度为7.406%,大米中黄曲霉毒素B_1含量为(5.235 2±0.387 7)μg/kg(k=2)。不确定度主要来源于标准曲线拟合、重复性检测和样品提取,分别占比20.82%、23.27%和19.35%。测定过程中,应首先制备准确且稳定的标准曲线,并增加平行样的测定次数,提高提取操作的准确度。本文所建立的不确定度评定方法可用于TRFIA法测定大米中黄曲霉毒素B_1含量结果的评定。

免疫亲和柱净化-高效液相色谱法测定饲料中玉米赤霉烯酮的不确定度评定

对国标方法GB/T 28716—2012《饲料中玉米赤霉烯酮的测定免疫亲和柱净化-高效液相色谱法》开展不确定度分析,找出影响不确定度的主要分量。依据CNAS-GL 006—2019《化学分析中不确定度的评估指南》,建立数学模型,分析测定过程中各不确定度分量的来源,并进行量化和评定。结果表明,该方法的相对合成不确定度为4.9279%、相对总不确定度为9.8558%,所测饲料样品中玉米赤霉烯酮含量为(508.34±50.10)μg/kg(k=2)。不确定度主要来源于样品提取、回收率校正因子、标准物质纯度和高效液相色谱实验操作,分别占比42.5785%、14.7957%、12.1746%和10.9624%。测定过程中,应选择纯度较高的标准物质,并提高各实验操作步骤的准确度和规范性。建立的不确定度评定方法可用于国标方法GB/T 28716—2012测定饲料中玉米赤霉烯酮的不确定度评定。

时间分辨荧光免疫层析法定量检测稻谷中的镉

本研究制备了一种用于稻谷中镉检测的时间分辨荧光免疫层析定量检测卡。采用铕纳米微球作为荧光探针,标记抗Cd-EDTA的单克隆抗体,基于竞争抑制原理建立免疫层析定量方法并对其进行方法学研究。结果表明:定量检测卡的灵敏度为0.088 ng/mL,标准曲线线性范围为0.1~5.0 ng/mL,检出限和定量限分别为0.026 mg/kg和0.064 mg/kg,对有证标准物质的正确度在81.0%~91.7%,对实际样本的检测与ICP-MS检测结果一致性较高。该法重复性较好,变异系数在10%以内。结果显示,该法灵敏度高、操作简便、成本低廉,因此,非常适合基层单位大量样本的快速初步筛查。

粮食中重金属污染的快速检测研究进展

近年来接连发生的粮食重金属污染事件引发了社会的广泛关注。因此,建立和发展粮食中重金属的快速、准确、简便的检测技术,对于保证粮食的安全非常必要。本文主要介绍了以下几种重金属快速检测方法在粮食中的应用情况,包括酶抑制分析法、电化学分析法、生物传感器法、免疫分析法等,并对这几种方法进行了优缺点分析,希望能为我国粮食中重金属的现场快速检测提供有价值的参考。

辛烯基琥珀酸菊粉酯的乳化及抑霉性能研究

以菊粉为参照,研究了取代度、添加量、冻融等因素对辛烯基琥珀酸菊粉酯乳化能力的影响,考察了辛烯基琥珀酸菊粉酯对扩展青霉、黑曲霉和黑根霉菌丝生长、孢子萌发和芽管伸长的抑制作用。试验结果表明:菊粉经辛烯基琥珀酸酐改性后具有良好的乳化性,其乳化能力随取代度(DS)和添加量的增加而增大。当辛烯基琥珀酸菊粉酯(DS=3.17×10-2)浓度为2.50%时,乳化液乳化效果和冻融稳定性良好,乳液颗粒大小一致、不聚集。抑菌实验表明辛烯基琥珀酸菊粉酯对扩展青霉、黑曲霉和黑根霉三种霉菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为1.00%、4.00%和2.00%(m/V),其对扩展青霉、黑曲霉和黑根霉菌丝生长、孢子萌发和芽管伸长抑制作用随辛烯基琥珀酸菊粉酯浓度增加而增强。低于MIC浓度时,辛烯基琥珀酸菊粉酯对扩展青霉菌丝生长、孢子萌发和芽管伸长的抑制作用最强,其次是黑曲霉,对黑根霉的抑制作用较弱。