CD163双等位基因编辑猪的制备及传代

【目的】猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS),俗称"蓝耳病",是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的一种高致死性传染病,对世界养猪业造成了巨大的经济损失。由于PRRSV遗传变异性较大,因此国内外并未有理想疫苗能够对此病进行有效防制。Cluster of differentiation 163(CD163)是PRRSV感染猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophage,PAM)的受体之一,研究旨在利用CRISPR/Cas9技术结合体细胞核移植技术制备CD163基因编辑的大白猪。【方法】针对猪CD163基因的第7外显子设计构建CRISPR/Cas9基因编辑载体;转染大白猪胎儿成纤维细胞,获得基因编辑阳性细胞克隆;以基因编辑细胞为核供体、体外成熟的猪卵母细胞为核受体构建克隆胚胎;胚胎移植到受体母猪生产CD163基因编辑猪,并进行后续的扩繁试验。【结果】设计的g RNA能够高效的识别靶位点。对获得的127个细胞单克隆进行PCR和测序显示,共有21个克隆发生突变,其中14个克隆为单等位基因突变或双等位基因杂合突变,7个克隆为双等位基因纯合突变。通过体细胞核移植技术,成功获得了CD163双等位基因编辑的纯合大白猪;并获得首批F1代CD163基因编辑仔猪,目前健康状态良好。随后将有更多的F1代CD163基因编辑猪陆续出生。【结论】制备的无抗性筛选标记的CD163双等位基因编辑猪,能够安全并快速地为培育抗PRRSV新品种猪提供育种材料。

猪传染性胃肠炎病毒荧光定量PCR检测方法的建立

【目的】建立1种猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的荧光定量PCR检测方法。【方法】用RT-PCR方法扩增TGEV的N基因片段,构建含有N基因片段的重组质粒,基于SYBR Green方法以不同浓度的TGEV-N基因重组质粒作为模板进行检测TGEV的荧光定量PCR扩增。【结果】TGEV SYBR Green荧光定量PCR的扩增效率为101%,标准曲线的决定系数为0.9997,可准确检测的最低核酸模板浓度为490copies/μL,重复性试验的变异系数小于3%,对其他3种常见的猪源RNA病毒的检测结果全为阴性,对临床样品的检出率高于常规PCR方法。【结论】建立了1种TGEV SYBR Green荧光定量PCR检测方法,可用于TGE的早期快速诊断。

猪圆环病毒病原学研究进展

猪圆环病毒(porcine circovirus,PCV)有2种不同的血清型,即猪圆环病毒1型(PCV1)和猪圆环病毒2型(PCV2)。目前研究表明PCV1暂无致病性,但PCV2则被认为是引起猪圆环疾病(PCVDs)的主要病原。很多地区养猪业的经济效益因此而遭受了重大的影响。PCV现已受到全球的关注,引起了许多专家学者的高度重视。本文对PCV的病原学最新研究进展进行了综述。

热应激对母猪的影响及应对措施

本文阐述了母猪遭受热应激时所做出的适应性反应以及由此带来的影响,并从营养调控、环境温度控制和饲养管理等方面提出可采取的应对措施,以减少热应激给母猪带来的影响,提高母猪的生产效率。

氯化钯的研制与应用

氯化钯（ＰｄＣｌ２）是一种棕红色结晶体，可溶于水、盐酸、乙醇、丙酮和氢溴酸。在石油化工领域，它不仅直接用作乙烯氧化制乙醛的催化剂，还用于制备具有不同载体的催化剂或分子筛。另外，在配制非导体材料镀层用的表面活性剂及制做气体敏感元件等方面也具有重要用途。...

例谈新课程标准下高中生物教学目标的设计

新课程标准大力倡导目标教学,教学目标在课堂教学效果的提升、课程目标的落实上起着决定性的作用。在高中生物教学中,在设计教学目标时教师要准确定位学生学情,要切中教学本质,使教学目标简明扼要,明确具体,简便易行。

傣西医结合治疗接腰(腰椎间盘突出症)50例临床观察

目的:观察傣西医结合治疗接腰(腰椎间盘突出症)的临床疗效。方法:选取100例患者随机均分为两组,对照组采用傣医外治方法咱雅(拖擦药物疗法)治疗;治疗组采用傣医外治方法咱雅(拖擦药物疗法)配合红花注射液、甘露醇注射液和地塞米松注射液治疗。结果:治疗组患者总有效率为96.0%,明显优于对照组的86.0%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:傣西医结合治疗接腰(腰椎间盘突出症)疗效较好,值得临床推广应用。

提高母猪窝产仔数的措施

养猪生产过程当中，母猪产仔数的多少成为一个猪场饲养成本高低的关键因素，那如何提高母猪产仔数呢？本人根据多年的生产实践经验，建议应做好以下几点：

二甲苯异构化反应操作工况统计调优

确定影响反应的主要因素，在对原有工艺数据进行预处理和数据回归分析的基础上，对统计模型求解，找出了优化的工艺条件；反应温度，３９９－４０１℃；压力，１．４－１．５ＭＰａ，进料量，１５１－１５７ｍ＾３氢油比，６－７。然后以此对芳烃联合装置中二甲苯异构化反应操作工况进行了实际优化操作。

哺乳仔猪腹泻病流行现状及防治措施

近几年来,全国各地的猪场频繁发生哺乳仔猪腹泻疾病,10日龄以内的哺乳仔猪发病率和死亡率均很高。给养猪业造成不小的损失。笔者从流行特点、临床症状、病理变化、病因调查和防治措施等几方面介绍该病。

天津地区猪伪狂犬病流行概况及病因分析

2008-2011年,天津地区猪伪狂犬病临床发病病例相对较少,但从2012年开始猛增,给养猪业带来巨大损失。笔者对近几年天津地区猪伪狂犬病从流行特点、临床症状、病理解剖、疫苗免疫程序等方面进行简要介绍。

猪群亚健康原因及消除办法

据农业部统计，中国一头母猪年出栏育肥猪数只有13．6头，而欧美国家能达到26头以上，丹麦甚至能达到30头，这与中国的养殖水平低下有很大关系，但更主要的原因是中国猪群长期处于亚健康状态。猪群亚健康首先表现免疫力低下，对病毒和细菌等抵抗力下降，容易感染疾病，时常有病猪出现并有增加趋势；长期处于应激状态，易受应激和暴发大规模疾病，当地流行什么病，就得什么病；