应用聚合酶链式反应检测犬细小病毒

将具有犬细小病毒病典型临床症状的病犬肠溶物经 SDS-酚裂解法提取总 DNA,并以此 DNA为模板 ,通过人工合成的两条 2 0 mer引物进行 PCR扩增 ,该对引物扩增的片段为犬细小病毒结构蛋白 VP2 基因中间 1 /3区段 ,PCR产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定 .试验结果表明 :用 PCR扩增检测犬细小病毒具有良好的特异性 ,应用该方法检测的 2 7份病犬肠溶物样品均获得了预计长度的 DNA片段 ( 53 1 bp) ,而健康犬的肠溶物样品 PCR结果为阴性 .该方法的检测灵敏度很高 ,最高可将提取的总 DNA样品稀释 1 0 6倍 ,即可以检测到 1 .3 7pg总 DNA样品中所含的病毒 DNA.由于该方法直接利用病犬肠溶物提取总 DNA,检测方法快速、简便 ,结果可靠 ,可在 2 4 h内获得满意结果 。

犬细小病毒中国内蒙株VP2基因克隆及序列分析

从我国内蒙古地区流行的犬细小病毒病病犬的肠溶物中分离提纯犬细小病毒 (CPV)。提取病毒基因组DNA ,并以此DNA为模板 ,采用人工合成的引物进行PCR扩增 ,PCR产物经BamHI、SacI双酶切后 ,克隆于 pUC19质粒的BamHI/SacI位点。重组质粒 pUCVP2经PCR鉴定、限制酶切分析和序列分析 ,结果表明 :获得了犬细小病毒内蒙株 (CPV IM )VP2基因的全长克隆 ,VP2基因全长 1755nt,与国外报道的美国 1株 (CPV N)、美国 2株 (CPV B)和猫全白细胞减少症病毒(FPLV)的核苷酸序列同源性分别为 99.32 %、98.2 9%、98.52 % ,氨基酸序列同源性分别为98.87%、97.0 9%、97.77%。

马铃薯卷叶病毒基因间隔区的克隆及序列分析

根据已报道的马铃薯卷叶病毒基因组序列．设计合成一对特异性引物，以马铃薯卷叶病毒中国分离株（ＰＬＲＶ－Ｃｈ）的ＲＮＡ为模板，反转录合成ｃＤＮＡ第一条链，经ＰＣＲ扩增后克隆于ｐＵＣ１９质粒中，进一步用ＰＣＲ鉴定、限制酶切分析和序列分析，结果表明：ＰＬＲＶ－Ｃｈ基因间隔区由１９７个核苷酸组成，与国外报道的荷兰ＰＬＲＶ－Ｎ加拿大ＰＬＲＶ－Ｃ，澳大利亚ＰＬＲＶ－Ａ，苏格兰ＰＬＲＶ－Ｓ各株系核苷酸序列具有很高的同源性，同源率依次为９９％、９８％、９３％、９８％。

马铃薯卷叶病毒基因间隔区转化的马铃薯抗病性研究

将本室合成、克隆的马铃薯卷叶病毒（ＰｏｔａｔｏＬｅａｆｒｏｌＶｉｒｕｓ，ＰＬＲＶ）中国分离株的基因间隔区（ｉｎｔｅｒｇｅｎｉｃｓｅｑｕｅｎｃｅ，ＩＳ）双链ｃＤＮＡ以正、反向两种方式分别构建于转化载体ｐＲＯＫ２中，通过致瘤农杆菌介导，以马铃薯叶圆片为转化材料，转化马铃薯栽培品种Ｄｅｓｉｒｅ，获得了转基因植株。卡那霉素抗性分析和ＰＣＲ检测目的基因，证明ＰＬＲＶＩＳ双链ｃＤＮＡ已经整合到转基因马铃薯的染色体基因组中。将转基因植株移栽网棚用蚜虫接种ＰＬＲＶ，观察症状并用酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）检测转基因植株中ＰＬＲＶ含量。结果表明，表达ＰＬＲＶＩＳ正意和反意ＲＮＡ的转基因植株，接种病毒后表现无症状或症状轻微，ＰＬＲＶ平均滴度均较未转基因对照植株低。表达正意ＲＮＡ的转基因植株ＰＬＲＶ滴度降低４３％～７２％，表达反意ＲＮＡ的转基因植株ＰＬＲＶ滴度降低７２％～８６％，由此可见，表达ＰＬＲＶＩＳ反意ＲＮＡ的转基因马铃薯对ＰＬＲＶ抗性较强。

转座子Tn5对葡萄根癌病生防菌MI15的诱变

以含自杀性质粒pMO75::Tn5的铜绿假单胞菌PAO1826和含自杀性质粒pSUP2021::Tn5的大肠杆菌S17-1为供体菌,以葡萄根癌病生防菌MI15为受体菌,进行接合杂交.当供体菌和受体菌菌体数量比例为1∶1和1∶5时可以产生转移接合子,而当菌体数量比例为5∶1时不能产生转移接合子.共筛选了117株转移接合子,获得了3株不产细菌素的MI15突变株,用光敏生物素标记的Tn5DNA探针与突变株染色体DNA进行斑点杂交,3株突变株均呈阳性反应,证明Tn5转座子已插入到MI15菌株的染色体上引起插入突变并抑制了细菌素的产生.

截形苜蓿生物数据分析平台的构建与应用

为更有效地利用截形苜蓿(M.truncatula)的表达序列标签和其他公共数据,加快对截形苜蓿功能基因的研究步伐,构建了“M.trunca tula Home”生物数据分析平台,并以此为中心,整合了专门为截形苜蓿定制的电子克隆系统。该数据分析平台具有序列基本信息查询、电子克隆系统、试验一致性序列动态分类查询的功能。进一步利用“M.truncatula Home”生物数据分析平台大规模预测了截形苜蓿盐胁迫相关基因,从截形苜蓿的36878条试验一致性序列中预测出650条与耐盐相关的序列,为进一步克隆截形苜蓿耐盐相关功能基因奠定了基础。

高羊茅赤霉素2-氧化酶编码基因的克隆及功能验证

赤霉素(GA)是一类重要的植物激素,在植物的生长发育过程中发挥着重要作用。许多赤霉素代谢途径关键酶的编码基因已经被克隆和研究,但在高羊茅(Festuca arundinacea)中尚未见报道,利用RACE技术获得了高羊茅赤霉素2-氧化酶基因(FaGA2ox)。结果表明:FaGA2oxcDNA全长1566bp,包含1026bp开放阅读框,编码一个由341个氨基酸组成的蛋白质。FaGA2ox转基因烟草(Nicotiana tabocum)表现出赤霉素缺陷的表型,叶片面积明显变小,且叶片褶皱,叶片颜色暗绿,节间长度明显变短。综上所述,FaGA2ox在烟草中的过量表达可以导致植株矮化,为进一步利用该基因转化高羊茅培育矮化植株奠定基础。

新事业单位会计制度下加强和改善事业单位财务管理的方法探讨

随着经济的发展,社会经济形势越来越复杂,无论是作为社会构成主体的企业而言,还是作为管理和公共服务提供者的事业单位,都需要进行相应的改革来适应社会的发展。财务作为经济发展的一部分,良好的财务制度能够极大地促进一个组织的发展。我国会计制度在上世纪90年代确定以来,为我国经济的发展发挥了重要的作用,但是之前的会计制度不再适应当前经济发展的需要,有必要进行一定的改革,新的事业单位会计制度对于财务管理提出了更高的要求。事业单位作为我国社会发展的一个重要部分,在新的会计制度下实行良好的财务管理制度能够保障事业单位的财产安全,文章对相关问题进行了分析探讨。

高中化学教学方法的改进策略

文章首先论述了高中化学教育的重要性必要性,分析了高中化学教学方法的现状和存在的问题,并提出了高中化学教学方法的改进策略,包括用新课改的理念改进传统的教学方法,注重实验教学方法,做到理论联系实践,以探究的方式进行高中化学教学。

行政事业单位管理会计体系建设研究

管理会计属于独立于财务会计的专门会计领域,目前在企业中探讨和应用的较多,行政事业单位管理会计体系的研究比较少。从行政事业单位管理会计内涵和现状出发,提出了行政事业单位管理会计体系建设的方法。

新事业单位会计制度对事业单位会计核算的影响探讨

在事业单位中,新会计制度对会计核算具有重要影响。科学合理开展会计工作,能够最大化实现单位财务效益,提高财务会计信息质量,从而提高会计核算工作整体水平。本文将探讨新事业单位会计制度对事业单位会计核算的影响,并分析新事业单位会计制度对事业单位会计核算的优化对策,仅供参考。

豆科植物特异SnRK1调控共生固氮的机制

豆科植物和根瘤菌之间的共生固氮(symbiotic nitrogen fixation,SNF)是高度耗能的代谢过程,植物每获取1 g固定的氮(N2)需要消耗5.2~18.8 g的碳源[1].尽管这一行为互利于双方,但共生固氮的有效进行依赖于豆科植物持续的碳源供应[2].豆科新型能量感受器GmNAS1/GmNAP1的发现,为设计高效利用作物周围环境中的碳源、提高共生固氮能力提供了理论支撑[3].然而,豆科植物在缺氮时如何分配能量和碳源实现高耗能共生固氮的分子机制尚不清楚[4].豆科植物是否有独特的能量感受器参与这一过程是科学家们一直探究的问题.

复合型人才在中小定点屠宰场中的作用

在现代经济社会，中小定点屠宰企业拥有复合型的人才是企业扩大生产、提高竞争力、实现持续发展的基础和重要手段。在近年来，生猪屠宰企业不仅引进新的生产技术，同时在经营理念、产品质量、商业模式上逐步创新，通过新的生产销售模式，新的购销渠道，为企业的健康发展走出一条新的道路。

浅谈中小生猪屠宰企业发展品牌的必要性

很多中小企业在发展中,常常会忽视品牌建设的重要性,其实产品本身是没有生命力的,只有产品,没有品牌,或者是只有贴牌,没有品牌的企业更是没有生命力和延续性的。企业品牌发展是现代企业实现持续发展、扩大生产、提高竞争力的基础和重要手段。而我县的生猪定点屠宰企业受产业发展的局限性,一直以来实行直接销售和间接销售模式,企业品牌发展基本为零。因此,在生猪屠宰行业中不能够做大、做强。

学前教育对幼儿个性发展的重要性

幼儿是一个孩子身心发展和培养的最重要的时期,很多的幼儿时期的事情会影响一个人的一生。同样也是幼儿个性化形成的关键,影响着幼儿劳动未来发展走向。为了能够更好的使幼儿养成良好的行为习惯和性格,教师和家长都应该重视学前教育相互配合,让幼儿更好的个性化发展。因此,本文就学前教育对幼儿的个性化发展的重要性展开进行具体分析。

经营性差额拨款事业单位的经营业务成本核算策略探析

由于经营性差额拨款事业单位的特殊性,所以其经营业务成本的核算也更为复杂,极易容易产生问题。基于此,本文分析了经营性差额拨款事业单位的特点,结合经营性差额拨款事业单位的经营业务成本核算现存问题,针对性的提出了建立内部监督机制、提升风险防范管理意识、完善经营性业务核算体系等应对策略。

行政事业单位内部控制信息化建设研究

新世纪,信息化在各行各业中得到了广泛的应用。与其它行业比较,我国行政事业单位内部控制的信息化建设与运用仍处在较低水平。建立内控信息化,是行政事业单位实现内控制度建设的必然要求,也是实现内部管理与提高工作效率的必然要求。加强行政事业单位内部控制的信息化,还可以有效地增强防范风险的能力,规范行政事业单位的权力运行,并对其进行日常的监管。

黄颡单尾虫(粘体门,双壳目)的重描述及基于28S rDNA和ITS-5.8S序列的系统地位分析

采用形态分类学方法与以28S rDNA和ITS-5.8S序列为基础的分子系统学研究方法,对采自嘉陵江重庆市磁器口江段的黄颡单尾虫Unicauda pelteobagrusMa,1998进行了形态学和分子生物学的研究。基于28S rDNA数据探讨了黄颡单尾虫以及单尾虫属与相邻种属粘孢子虫间的系统地位;基于5.8S rDNA数据比较分析了粘孢子虫的系统地位。补充了黄颡单尾虫重庆种群形态学信息和28S rDNA、ITS-5.8S rDNA序列的分子信息。

运用“翻转课堂”教学法 推动教与学系统性改革

国内外的教学实践表明,翻转课堂是提升大学生学习成果的有效手段,在自我约束、批判性思维、合作学习、学习成果与投入等方面具有显著优势。随着信息技术和教育教学的不断融合发展,翻转课堂技术也会不断发展。要建空起符合学校特色的翻转课堂教学体系,还需要大学、教师和学生的共同努力。