一种鉴定过氧化氢酶活性的铁染色法

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）技术，建立了一种新的鉴定过氧化氢酶活性的方法──铁染色法．结果表明，细菌过氧化氢酶及牛肝过氧化氢酶显示单一的酶活性带．该方法操作简单、快速。

酶联免疫吸附分析法测定血清中醋酸亮丙瑞林含量

目的:建立一种检测微量醋酸亮丙瑞林的方法。方法:使用酶联免疫吸附分析法(ELISA),测定样品中醋酸亮丙瑞林含量。结果:自制的兔抗亮丙瑞林抗血清具有良好的特异性。使用 ELISA 测定醋酸亮内瑞林的最低检出限为0.025ng·mL^(-1),精密度(日内 RSD<23.5%,日间 RSD<22.4%)良好。不同浓度醋酸亮丙瑞林的平均回收率为97.3%。含样品血清冷冻(-20℃)保存30d 内,醋酸亮丙瑞林的检测结果稳定,重复性好。结论:本实验研究建立了一种操作简单、快速,特异性好、灵密度高的醋酸亮丙瑞林检测方法。

柱前衍生氨基酸的高效液相色谱分析

综述了目前柱前衍生氨基酸高效液相色谱分析技术的最新进展和现状，分别详细介绍了应用最广、技术最先进的几种柱前衍生氨基酸分析技术和方法。

微量氨基酸分析法的改进

本文介绍一种用甲醇作为流动相的微量氨基酸分析方法,通过对17种氨基酸进行了实验观察、分析,结果表明,分离分析结果良好,氨基酸浓度在1.5～12.0pmol之间峰面积成良好的线性关系。

小白鼠皮肤中氨基酸含量分析

本文采用高压液相柱前衍生色谱法，比较了不同年龄小白鼠皮肤中氨基酸的含量，结果表明，小白鼠皮肤中含有１７种氨基酸，其各年龄组之间羟脯氨酸含量有明显的差异，幼年鼠＞中年鼠＞老年鼠。给小鼠皮肤涂抹复合氨基酸能增加羟脯氨酸的含量，有利于延缓皮肤老化的作用，为进一步研究抗衰老药物提供了科学依据。

细菌梭曼水解酶活性的测定

细菌梭曼水解酶活性的测定董泗建刘昌玲梭曼水解酶是国内外抗有机磷毒剂药物研究方向之一，是从菌种微球菌中提取分离得到了一种触酶，称它为细菌梭曼水解酶，它不仅具有催化水解过氧化氢的作用，而且也能催化水解Ｇ类有机磷毒剂的作用。目前，检测有机磷毒剂的方法操作麻...

几种中药成分对脑组织的保护作用

目的：观察几种中药成分对脑组织的保护作用。方法：采用激光多普勒流量仪动态监测脑软膜微循环的变化以及大鼠大脑皮层神经细胞培养法，比较不同药物的作用。结果：葛根总黄酮、三七总皂甙、氧化苦参碱、山莨菪碱、小檗碱均能扩张麻醉小鼠脑膜血管，增加局部血流量；前四者同时还明显加快血流速度，其中氧化苦参碱的作用与山莨菪碱类似，主要使高频运动红细胞增多。三七总皂甙尚能拮抗Ｇｌｕ介导的兴奋性毒性。结论：葛根总黄酮、三七总皂甙、氧化苦参碱、山莨菪碱、小檗碱对脑组织均有一定的保护作用，但是作用的环节不尽相同。

微生物来源的中枢神经系统受体拮抗剂或激动剂的研究——活性菌株的筛选

本文以体外受体结合试验为生物评选方法 ,以中枢神经系统 8种受体 (5 - HT1 ,5 - HT2 ,5 - HT3,D1 ,BDZ,β,GABA,Glu)为评价指标 ,对 15株真菌和 12株放线菌在 9种不同培养基条件下的代谢产物进行评选 ,并结合薄层层析得到 A1 、B1 、B3、C1 1 号 4株阳性菌株 ,它们的代谢产物分别对 5 - HT1 ;5 - HT1 、5 - HT2 、D1 ;5 - HT3;5 -HT1 、D1 和β受体有不同程度的抑制作用。

Fmc,镰刀菌来源的多巴胺1受体抑制剂

应用以中枢神经系统为主的八个体外受体筛选系统 ,从 15株真菌和 12株放线菌中筛选出能产生具有与多巴胺 1受体竞争性结合活性的镰刀菌 Fusariun moniliflore;从其菌体中分离出活性成分 Fmc。通过元素分析和质谱 ,确定其分子式为 C1 0 H1 3O2 N。综合紫外光谱、红外光谱、1 H- NMR和 1 3C- NMR等图谱数据的解析 ,确定 Fmc的结构与镰刀属真菌 (Fusarium moniliflore)发酵液分离出来的夫西地酸 (fusaric acid)一致 ,化学命名为 :5 -正丁基吡啶酸。但关于其作用于中枢神经系统多巴胺

重组人核因子κB亚基p65在大肠杆菌中的可溶性表达及纯化

将扩增得到的核因子(NF)κB亚基p65基因片段克隆至测序载体pGEM-T,测序验证该序列为预期目的片段后,再将该基因片段克隆至表达载体pGEX-4T2中,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,用GST蛋白亲和柱纯化融合蛋白p65/GST,Western印迹验证该蛋白具有NF-κB抗原活性。结果表明,构建了NF-κBp65/GST融合表达载体,并表达和纯化了NF-κBp65/GST融合蛋白,为进一步研究NF-κB的功能和筛选NF-κB拮抗分子奠定了基础。

分泌抗过氧化氢酶单克隆抗体的研制及特性鉴定

用从微球菌中提取纯化的过氧化氢酶为免疫原，以硝酸纤维膜皮下埋植法免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取其脾细胞和ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，获得１１株能稳定分泌抗体的杂交瘤细胞系。其中１Ａ１０、３Ｃ５、４Ｅ１２和４Ｆ６四株经连续传代三个月、冻存１０个月后复苏，仍能稳定分泌抗体．腹水效价在１０－４～１０－６之间．Ｉｇ类型鉴定，１Ａ１０与４Ｅ１２为ＩｇＧ２ａ，４Ｆ６为ＩｇＧ３亚类，３Ｃ５为ＩｇＭ类．染色体数介于８２～１１０之间．将４株ＭｃＡｂ与溶菌酶、纤维结合蛋白等１１种蛋白及多肽物质做交叉反应试验，均无明显交叉反应．以固相抗原竞争ＥＬＩＳＡ试验和ＥＬＩＳＡ相加试验作位点分析，两法一致表明ＭｃＡｂ４Ｆ６与另３株ＭｃＡｂ１Ａ１０、３Ｃ５和４Ｅ１２所针对的抗原位点有差别。４株ＭｃＡｂ相对亲和力测定结果依次为：４Ｅ１２＞１Ａ１０＞３Ｃ５＞４Ｆ６．用亲和层析柱纯化的４Ｆ６ＭｃＡｂ做过氧化氢酶催化活性试验，发现能激活过氧化氢酶对底物索曼的活性，抑制过氧化氢酶对底物过氧化氢的分解．

培养和冷冻对新生大鼠胰岛活性的影响

新生大鼠胰碎片在MEM、DMEM、M-199和RPMI-1640中培养,比较培养不同天数冷冻保存,不同条件处理及液氮贮存不同时间的实验结果。表明新生大鼠胰碎片在RPMI-1640中培养胰岛素分泌量最高,随着培养时间的延长,胰岛素分泌量逐渐升高。培养6d进行冷冻保存为宜。新生大鼠胰碎片在液氮中贮存12个月分泌功能无明显变化。

冷冻对胰岛活性的影响

本文报道了冷冻条件对胰岛活性的影响，通过对胰碎片胰岛素释出量测定结果表明，新生大鼠和人胎胰碎片培养6d，用2mol/LMe2SO作为低温保护剂，以1～3℃／min的速率进行冷冻，样品在液氮中贮存12个月后胰岛仍能保持良好的功能。

一种测定过氧化氢酶活性的新方法

建立了一种测定过氧化氢酶活性的新方法──钼酸铵法，并应用于测定经ＨＰＬＣ分离纯化的细菌过氧化氢酶活性，对分离得到的５个峰酶活性进行了比较，峰２酶比活力达到３６．８８ｍｍｏｌ·ｍｉｎ￣（－１）·ｍｇ￣（－１）蛋白，酶活性明显高于其它峰。结果表明，该方法是一种灵敏、简便、快速及实用的测定细菌过氧化氢酶活性的检测方法。

微量快速分析梭曼的荧光法

建立了一种灵敏度高、简便、快速及重复性好的用荧光测定梭曼的方法。该方法检测灵敏度:梭曼的可测出浓度最低能达到10ng/ml。变异系数在2.8%以内。梭曼浓度与荧光强度呈良好的线性关系,是一种比较理想的微量检测方法。

DNA的微量荧光分析法

建立了用 DABA 荧光分析法检测微量 DNA 的方法,确定了最佳测定条件,该方法简便,快速、灵敏度高,稳定性及重复性好,对测定微量 DNA 含量是一种切实可可行的方法。

三七总皂甙对突触体钙摄取功能的影响(英文)

目的:研究三七总皂甙(PNS)的钙拮抗作用. 方法:大脑皮层突触体通过Ficoll密度梯度离心获取.用同位素测定的方法,观察体内或体外给药时,PNS对突触体钙摄取功能的影响. 结果:在50-800 mg·L^(-1)浓度范围内,PNS对钙摄取的抑制作用呈现量-效关系,IC_(50)=111(46-176)mg·L^(-1),并且对摄取过程的起始和最大反应相均有作用.PNS ip 200 mg·kg^(-1)具有类似反应.介质中的钙离子浓度影响PNS的上述作用.结论:PNS是神经元钙通道的阻滞剂.

从噬菌体随机十二肽库中筛选NF-κB(p65)亲和肽的研究

目的:采用噬菌体展示技术筛选核转录因子-κB(nuc lear factor-κB,NF-κB)亚基p65亲和肽。方法:以p65亚基为靶分子,利用噬菌体随机十二肽库进行亲和筛选,用ELISA法进行阳性克隆结合特异性验证。结果:经过3轮亲和筛选后,随机挑选15个噬菌体克隆,对其亲和力做ELISA试验,其中6个克隆显示较强的阳性结果。将上述6个阳性克隆DNA测序,序列均为CGTCAGCCTCGGCGAATAAGTATCCGAAGGAGTAAA,相应的氨基酸序列为FTPSDTYSPRLT。竞争性ELISA的结果显示,抑制率随p65亚基浓度的增大而升高。结论:从噬菌体随机肽库中筛选到能与NF-κB p65亚基特异性结合的克隆,并确定了其核心序列。