P54/cAMP/PKA信号调控在酒精依赖大鼠中的相关性研究

目的 探讨P54/cAMP/PKA信号调控在酒精依赖大鼠中的相关性。方法 使用随机数表法将SD大鼠(n=50,雄性)随机分为对照组(control组,n=10)、10%双瓶自由连续性饮酒模型组(10%ethanol组,n=10)、慢病毒阴性对照组(JL-control组,n=10)、慢病毒空载组(JL-NC组,n=10)和P54过表达组(JL-P54组,n=10),在构建模型28 d后,JL-control组、JL-NC组和JL-P54组进行转染。取五组大鼠海马组织进行Western Blot检测和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测。结果 10%ethanol组在最后7 d的酒精摄入量(16.80±0.63)ml/24 h保持稳定,饮水量(11.90±0.39)ml/24 h保持稳定,酒精偏好稳定在(57.74±1.83)%,酒精摄入量逐渐增加到达平台期,饮水量伴随饮酒量的增多而降低到稳定,酒精偏好增加到稳定;在Western Blot检测和qRT-PCR检测中,与control组比较,10%ethanol组中P54、腺苷酸环化酶(AC)、cAMP依赖性蛋白激酶(PKA)、cAMP反应元件结合蛋白(CREB)的表达量下降,差异有统计学意义(P <0.05),JL-P54组中P54、AC、PKA、CREB的表达量升高,差异有统计学意义(P <0.05)。结论 P54可能通过cAMP/PKA信号通路的调控参与酒精依赖的形成机制。

白藜芦醇对酒精依赖大鼠肾脏中PTEN/PI3K/AKT信号通路的影响

目的研究酒精依赖大鼠肾脏中PTEN/PI3K/AKT信号通路相关蛋白的表达情况,探讨白藜芦醇对PTEN/PI3K/AKT信号通路的影响。方法将SD大鼠随机分为饮酒组和对照组,首先对饮酒组大鼠进行适应性喂养,然后采用20%酒精交替间隔自由饮制备酒精依赖模型,待模型制备成功后,将饮酒组大鼠随机分为白藜芦醇低、中、高剂量组(25、50、100 mg/kg)、酒精依赖模型组,每组各6只,进行灌胃给药。模型制备期间持续记录大鼠体重变化、酒精摄入量以及酒精偏好,判定酒精依赖大鼠模型构造是否成功;给药结束后,Western Blot法检测大鼠肾脏组织中磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)、磷脂酰肌苷3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)指标的蛋白表达。结果给酒大鼠在最后7 d的饮酒偏好(38.14±1.72)%和酒精摄入量(11.11±1.13)g/(kg·24 h)趋于稳定,即成功制备酒精依赖SD大鼠模型;与对照组相比,酒精依赖模型组肾脏PTEN蛋白相对表达量显著降低,PI3K蛋白和AKT蛋白相对表达量显著升高(P<0.05);在给药后,白藜芦醇高剂量组与酒精依赖模型组相比大鼠肾组织中PI3K和AKT的表达趋势明显下降,白藜芦醇中剂量组与酒精依赖模型组相比大鼠肾组织中PTEN的表达趋势明显上升(P<0.05)。结论PTEN/PI3K/AKT信号通路在酒精依赖大鼠肾脏中的相对表达量发生了变化,而不同剂量的白藜芦醇可以反向调节PTEN/PI3K/AKT的表达水平,说明白藜芦醇对酒精依赖大鼠的肾脏具有一定的保护作用。

两种SD大鼠酒精依赖自由饮模型的建立

目的建立两种SD大鼠酒精依赖模型的自由饮模型,为酒精依赖的动物实验提供实验模型依据。方法以30只雄性SD大鼠为研究对象,使用随机数表法分为对照组、10%双瓶自由连续性饮酒模型组和20%双瓶自由间歇性饮酒模型组,每组10只。在构建模型28 d后,进行行为学测试(高架十字迷宫、水迷宫)和酒精戒断综合征评分。结果3组大鼠在实验中体质量变化经比较,差异无统计学意义(P>0.05);2组模型组大鼠酒精摄入量逐渐增加到达平台期,饮水量伴随饮酒量的增多而降低到稳定,酒精偏好增加到稳定;高架十字迷宫检测中,2组模型组开放臂进入次数和开放臂滞留时间较对照组明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);在水迷宫检测中,2组模型组记忆能力较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05);在酒精戒断评分检测中,2组模型组24 h戒断评分较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论两种酒精依赖的建模方法都可以用来开展相关酒精依赖动物实验研究。

白藜芦醇在神经系统疾病及糖尿病肾病的研究进展

白藜芦醇(Resveratrol,Res)是一种天然多酚类化合物,具有抗炎、抗氧化、抗细胞凋亡等多种药理学活性,其作为一种典型的多效用中药单体,对神经退行性病变、糖尿病、心脑血管疾病等诸多疾病具有多种潜在的治疗靶点,发挥着特有的药理作用。系统查阅国内外相关文献发现,白藜芦醇通过典型的多靶点发挥着强有力的神经系统保护作用,通过其抗氧化作用、抗血管生成、抗内质网应激、调节AMPK及ERK信号通路、调节糖脂代谢、激活自噬等机制发挥其对糖尿病肾病的改善作用。

PDE4B在酒精依赖中对PKA通路的调控作用分析

探讨PDE4B介导PKA通路在酒精依赖大鼠杏仁核中的表达。方法:6周龄雄性SPF级SD大鼠32只,体重240~260g,按照随机数字表法分为空白对照组(n=8)和模型组(n=24)。模型组大鼠采用双瓶20%酒精间断饮制备酒精依赖模型,造模成功后,对模型组大鼠进行转染。蛋白印迹技术检测转染后大鼠的杏仁核区磷酸二酯酶4B(PDE4B)、cAMP依赖蛋白激酶(PKA)、环磷腺苷效应原件结合蛋白(CREB)、脑源性神经营养因子(BDNF)的蛋白表达水平。结果:与SD-NosiRNA组相比,SD-PDE4BsiRNA组大鼠杏仁核的PDE4B蛋白表达下降,PKA蛋白表达下降,CREB蛋白表达下降,BDNF蛋白表达下降,而SD-CtrsiRNA组大鼠杏仁核各项指标无统计学差异。结论:PDE4B介导的PKA信号通路与酒精依赖的发生与发展密切相关。

多巴胺D4受体对酒精依赖大鼠海马区cAMP/PKA通路的影响

目的:探讨多巴胺D4受体(DRD4)对酒精依赖大鼠海马区cAMP/PKA通路的调控作用。方法:34只雄性SD大鼠,双瓶连续饮用10%乙醇制备酒精依赖模型,将建模成功大鼠根据DRD4 siRNA体内转染情况按随机数字表法分为4组,包括模型对照组、空白对照组(SD-No siRNA)、阴性对照组(SD-Ctr siRNA)和DRD4 siRNA低表达组(SD-DRD4 siRNA),采用qPCR和Western blotting检测DRD4、腺苷酸环化酶(AC)、cAMP依赖性蛋白激酶A(PKA)、cAMP反应元件结合蛋白(CREB)等指标的mRNA和蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组DRD4 mRNA及蛋白均明显升高(P<0.01),AC、PKA、CREB mRNA及蛋白均明显下降(P<0.01)。在体内转染24 h后,SD-DRD4 siRNA组DRD4、CREB mRNA及蛋白表达水平均低于SD-No siRNA组和SD-Ctr siRNA组(P<0.01),AC、PKA mRNA及蛋白表达水平均高于siRNA组和SD-Ctr siRNA组(P<0.01)。结论:DRD4可能通过介导cAMP/PKA通路在酒精依赖的神经生物学机制中发挥重要作用。

DRD4/cAMP/PKA在酒精依赖大鼠海马区的表达情况

目的研究DRD4/cAMP/PKA途径在酒精依赖大鼠海马区的表达情况。方法雄性SD大鼠随机数字表法分为对照组(n=8)和模型组(n=8),双瓶连续饮用10%酒精制备酒精依赖模型,记录建模期间大鼠的体重变化、酒精摄入量、酒精偏好,通过高架十字迷宫和酒精戒断综合征评分记录大鼠的行为学变化;建模成功后,采用qPCR法检测大鼠海马组织中多巴胺D4受体(DRD4)、腺苷酸环化酶(AC)、cAMP依赖性蛋白激酶A(PKA)、cAMP反应元件结合蛋白(CREB)等指标的mRNA的水平。结果大鼠最后7 d酒精摄入量(7.11±0.36)g/(kg·24 h)、酒精偏好(57.30±1.86)%趋于稳定,即成功制备SD大鼠酒精依赖模型。与对照组比较,模型组DRD4 mRNA相对表达水平(2.75±0.26)显著升高(P<0.001),AC mRNA相对表达水平(0.50±0.02)、PKA mRNA相对表达水平(0.30±0.01)、CREB mRNA相对表达水平(0.47±0.07)显著下降(P<0.01)。结论DRD4可能通过调控cAMP/PKA通路在酒精依赖中发挥重要作用。

“互联网+”背景下医学院校低年级学生创业意愿的调查及应对策略

本文采用问卷调查法,对牡丹江地区某医学院校的1500名大一、大二年级的学生进行问卷调查。结果显示学生没有创业意向的占74.6%,5.8%正在进行个人创业,但对于未来发展无明确规划,而16.5%曾有过创业打算但因为缺乏资金,没有相应经验而只停留在想法;调查发现低年级学生有创业意愿占调查人群中的比例明显偏少,对于有自己创业方向、方式和规划的学生比例仅为3.1%;在互联网与所学专业的结合上没有联系。作者建议通过学校进行接洽,将医学生的医学创业能力和创意与社会相关企业进行对接,使医学生和社会资源得到优化配置,最终将实现"互联网+"医学生创新创业的新模式。

HPV分型及其定量检测在黑龙江东部地区宫颈病变中的临床意义

研究黑龙江东部地区宫颈疾病中HPV亚型分布及与患者感染量的关系,为临床提供参考。对本地区2011～2017年就诊的500位宫颈疾病患者,运用液基细胞学技术与人乳头瘤病毒核酸分型试剂盒对宫颈脱落细胞进行检测,采用实时荧光定量PCR技术检测HPV不同亚型的量。HPV阳性检出率为71.0%,检出HPV的4种高危亚型。结合液基细胞学技术检验,病变越严重,HPV亚型感染量越高。在本次检测中,HPV16亚型的检出率最高。感染量越多,患者病变程度越高。临床可将病毒载量作为判断病变程度的辅助指标。