柴胡皂苷A对抑郁模型大鼠海马神经细胞凋亡的保护作用

目的探讨柴胡皂苷A对抑郁模型大鼠海马神经细胞凋亡的保护作用及机制。方法 60只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、模型组、西药组、中药组;采用慢性不可预见性应激刺激结合孤养方式建立抑郁模型;利用敞箱实验与糖水偏爱度检测大鼠行为学改变;采用电镜观察大鼠脑海马区超微结构变化;应用免疫组化与RT-PCR检测大鼠海马区脑源性神经生长因子(BDNF)蛋白及基因的表达水平。结果与正常对照组相比,模型组水平运动得分、垂直运动得分和糖水偏爱度明显降低(P<0.01,P<0.001),与模型组比较,西药组和中药组水平运动得分、垂直运动得分和糖水偏爱度均明显升高(P<0.05,P<0.001);与正常对照组相比,模型组大鼠海马区BDNF mRNA与蛋白表达明显下调(P<0.05),与模型组相比,西药组、中药组海马区BDNF mRNA与蛋白表达明显上调(P<0.05)。结论柴胡皂苷A抗抑郁症的作用机制可能与其促进海马区BDNF蛋白与mRNA的活性和表达,进而减少神经细胞凋亡有关。

β-细辛醚+远志皂苷对APP/PS1双转基因小鼠SOD、GSH-PX、CAT、MDA和HO-1表达的影响

该论文主要是通过观察β-细辛醚+远志皂苷对APP/PS1双转基因小鼠超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-PX)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)和血红素加氧酶-1(Heme oxygenase-1,HO-1)表达的影响,探讨β-细辛醚协同远志皂苷对APP/PS1双转基因小鼠氧化应激损伤的保护作用和治疗AD的作用机制。将3月龄APP/PS1双转基因小鼠分为模型组,盐酸多奈哌齐组(0.33 mg/kg·d),β-细辛醚+远志皂苷低、中和高剂量组(18.5、37和74 mg/kg·d),选同月龄C57 BL/6小鼠为空白对照组,采用Morris水迷宫法和新物体识别试验检测小鼠的学习记忆能力,采用分光光度法检测SOD、GSH-PX和CAT活性,以及MDA含量。采用Western blot检测CAT和HO-1蛋白表达,实时定量RT-PCR检测CAT和HO-1 mRNA表达。结果表明β-细辛醚协同远志皂苷可明显改善APP/PS1双转基因小鼠的学习记忆功能障碍,增强其学习和记忆功能。β-细辛醚协同远志皂苷还能升高SOD、CAT和GSHPX的活性,降低MDA含量,诱导CAT和HO-1的mRNA与蛋白表达。该论文研究结果表明,β-细辛醚+远志皂苷可通过上调SOD、CAT、GSH-PX和HO-1,降低MDA,对APP/PS1双转基因小鼠氧化应激损伤发挥保护作用,进而拮抗AD。

柴胡疏肝散对抑郁症模型大鼠海马单胺氧化酶与乙酰胆碱酯酶活性的影响

目的观察柴胡疏肝散对大鼠大脑海马乙酰胆碱酯酶（AChE）与单胺氧化酶（MAO）活性的影响。方法选取60只4~5月龄的SD大鼠随机分为正常组、模型组、氟西汀组和中药组,共4组,每组15只。利用孤养结合慢性轻度不可预见性应激刺激制造抑郁症模型。21 d后,采用敞箱实验、糖水消耗量检测和体重检测等指标评定大鼠行为学改变,并用免疫组织化学染色法观察大鼠大脑海马区AChE的蛋白表达变化,利用比色法检测大鼠大脑海马区MAO活性。结果与正常组相比,模型组水平运动得分、垂直运动得分、体重和糖水偏爱度均明显降低（P〈0.01）,与模型组比较,氟西汀组和中药组水平运动得分、垂直运动得分、糖水偏爱度与体重均明显升高（P〈0.05~0.001）;免疫组化结果显示,与正常组相比,模型组海马区AChE的蛋白表达均明显升高（P〈0.05）,与模型组相比,氟西汀组和中药组大鼠海马区AChE的蛋白表达均明显降低（P〈0.05）;比色法结果显示,与正常组相比,模型组海马区MAO活性明显升高（P〈0.05）,与模型组相比,氟西汀组、中药组海马区MAO活性明显下降（P〈0.05）。结论柴胡疏肝散抗抑郁症的作用可能与其降低大脑组织海马区AChE蛋白表达和MAO活性有关。

不同年龄组大鼠抑郁症模型评价

目的观察年龄对抑郁模型大鼠行为及生化方面的影响。方法选取SD雄性大鼠,按照年龄分为幼年、成年和中年,采用慢性轻度不可预见性应激刺激与孤养相结合的方法建立抑郁症动物模型,运用开野法(Open-Field)与糖水消耗量评定大鼠行为学改变,用比色法测量大鼠海马区单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)活性,用酶联免疫吸附法检测血清促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)含量。结果与对照组相比,各组模型组糖水消耗量与Open-Field得分均下降(P<0.05),成年抑郁组比幼年抑郁组均下降(P<0.05),中年抑郁组比成年抑郁组均下降(P<0.05);MAO活性与CRH、ACTH、CORT含量,模型组比对照组均升高(P<0.05),中年抑郁组比幼年抑郁组、成年抑郁组均升高(P<0.05),成年抑郁组与幼年抑郁组没有显著性变化(P>0.05)。结论刺激强度相等条件下,年龄的增长与抑郁模型大鼠行为学指标呈负相关,与生化指标呈正相关。

芍药苷对大鼠皮质酮损伤的海马神经元TrkB/BDNF信号通路的影响

目的观察芍药苷对皮质酮诱导海马神经元损伤的影响。方法体外培养新生SD大鼠海马神经元,采用皮质酮诱导原代培养海马神经元建立皮质酮损伤模型。培养体系中加入不同浓度的芍药苷进行预处理。采用WST-1法检测芍药苷对神经元存活率的影响,应用PCR与Western印迹检测神经元脑源性神经营养因子(BDNF)与酪氨酸激酶受体B(Trk B)的表达。结果与皮质酮组相比,中高剂量芍药苷可明显增加海马神经元活力(P<0.05),可明显增加海马神经元Trk B与BDNF的mRNA与蛋白表达水平(P<0.05)。结论芍药苷对皮质酮诱导的原代培养海马神经元损伤具有保护作用,具有抗抑郁作用。

低分子量姬松茸多糖对树突细胞Th1型免疫反应的影响

目的探讨姬松茸多糖(LMPAB)对树突细胞(DCs)Th1型免疫反应的影响。方法体外培养ICR小鼠骨髓来源的DCs。应用WST检测LMPAB增强DCs对T淋巴细胞的增殖作用,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测LMPAB对DCs分泌的干扰素(IFN-)γ与白细胞介素(IL)-12的影响。结果与正常组(4.84±0.21)比较,LMPAB+卵白蛋白(OVA)组(6.59±0.19)可以增强DCs对T淋巴细胞的增殖作用(P<0.05);与正常组IL-12〔(32.31±2.45)pg/ml〕、IFN-γ〔(657.34±43.41)pg/ml〕比较,LMPAB+OVA组IL-12〔(45.89±1.03)pg/ml、IFN-γ(854.42±35.06)pg/ml〕明显升高(P<0.05)。结论 LMPAB可以增强DCs Th1型免疫反应,可能具有免疫佐剂的调节作用。

通络救脑口服液对AD大鼠学习记忆能力及nNOS、SS表达的影响

目的观察通络救脑口服液对β-淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)诱导的AD大鼠学习记忆障碍的改善作用及对神经元型一氧化氮合酶(nNOS)、生长抑素(Somatostatin,SS)蛋白表达的影响。方法采用大鼠海马立体定向注射凝聚态Aβ1-40诱导老年性痴呆(Alzheimer's disease,AD)动物模型。采用Morris水迷宫测试大鼠寻找平台所需时间和通过原平台次数评价大鼠学习记忆能力及通络救脑口服液干预作用。采用免疫组织化学染色法和计算机图像分析技术测定海马区nNOS、SS蛋白阳性目标积分光密度。结果与假手术组比较,模型组平均逃避潜伏期显著延长,跨越原平台位置次数明显减少(均为P<0.01);与模型组比较,通络救脑口服液组(12,24,48mg·kg-1·d-1)平均逃避潜伏期显著缩短,跨越原平台位置次数明显增加(P<0.01)。免疫组化实验结果显示:与假手术组比较,模型组大鼠海马区nNOS、SS蛋白表达明显降低(P<0.05);与模型组比较,通络救脑口服液各剂量组nNOS、SS蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论通络救脑口服液通过上调nNOS、SS蛋白表达水平,从而发挥其抗老年性痴呆的作用。

PBL教学法在病理学实验教学过程中的效果探讨

目的:探讨问题式教学法(Problem-Based Learning,PBL)是病理学实验教学的重要的教学方法之一。方法:将齐齐哈尔医学院临床医学专业2007级120名学生分为PBL组与传统教学组,每组60人。试验后学生进行考试考核,并对PBL教学法与传统教学法教学效果进行评价。评估包括课前预习、课堂气氛、与教师互动、知识外延等7个条目。数据采用SPSS 13.0统计软件进行统计分析。结果:考试成绩及在课前预习、课堂气氛、与教师互动、知识外延等方面,PBL组明显高于传统教育组,教学效果好,具有可行性。

转化医学理念对病理学教学改革的启示

转化医学的核心思想是要将医学基础科研研究成果迅速有效地转化为可在临床实践当中应用的精辟理论、创新技术和有效的治疗方法。针对病理学教学当中存在着基础与临床脱节的现状,本文通过分析转化医学在医学教育实施方面的优势,提出转化医学理念对病理学教学改革的重要启示。

“纠纷式”情景模拟与任务驱动式教学法联合应用的实践与探讨

目的:探讨"纠纷式"情景模拟与任务驱动式教学法的联合应用是病理学实验教学的重要的教学方法之一。方法:将齐齐哈尔医学院临床医学专业2009级170名学生分为实验组与传统教学组,每组85人。试验后进行理论和技能考核,并对实验组与传统教学组教学效果进行评价。评估包括课前预习、课堂气氛、组织纪律、知识理解、服务与沟通交流能力、应急能力等7个条目。数据采用SPSS 13.0统计软件进行统计分析。结果:考试成绩及在课前预习、课堂气氛、组织纪律、学习态度、服务与沟通交流能力、应急能力等方面,实验组明显高于传统教育组,教学效果好,具有可行性。

年龄对大鼠大脑胆碱能神经系统胆碱酶活性的影响

目的观察年龄对大鼠大脑胆碱能神经系统中乙酰胆碱转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)与乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)活性的影响。方法Sprague-Dawley雄性大鼠,按照年龄分为4～5周龄组、4～5月龄组和14～15月龄组共3组,每组10只。用比色法测定大鼠皮质、海马和纹状体区ChAT与AChE的活性。结果与4～5月龄组大鼠和4～5周龄组大鼠大脑皮质、海马和纹状体区ChAT活性比较,14～15月龄组大鼠明显降低(均P<0.01);4～5月龄组与4～5周龄组大鼠大脑皮质、海马、纹状体区ChAT活性比较,均没有显著性差异(P>0.05);与4～5月龄组和4～5周龄组比较,14～15月龄组大鼠3个脑区AChE活性明显降低(分别为P<0.05,P<0.01);4～5月龄组与4～5周龄组大鼠3个脑区AChE活性比较,均没有显著性差异(P>0.05)。结论年龄与胆碱能神经系统中ChAT和AChE的活性呈负相关。

CD151在胃腺癌和宫颈癌中的表达

目的探讨CD151在胃腺癌和宫颈癌中的表达及其意义。方法应用免疫组织化学方法检测CD151在正常胃黏膜和宫颈黏膜组织及胃腺癌和宫颈癌组织中的表达。结果 CD151在所有的胃腺癌(58/58,100.0%)和宫颈癌组织(55/55,100.0%)都表达,在绝大多数正常胃黏膜(26/28,92.9%)和宫颈黏膜组织(23/24,95.8%)中也都表达。CD151在胃腺癌和宫颈癌中的细胞阳性率及表达量都要显著高于正常组织(P<0.05)。结论 CD151是细胞增殖的一个标记分子;CD151蛋白在宫颈癌中高表达,是宫颈癌治疗的一个潜在靶点。

石菖蒲有效成分对抑郁模型大鼠海马神经元的保护作用

目的探讨石菖蒲有效成分β-细辛醚对抑郁模型大鼠海马神经元细胞凋亡的保护作用。方法将大鼠随机分为正常对照组、模型组、西药对照组、中药组共四组;采用慢性不可预见性应激刺激结合孤养方式复制抑郁模型;通过敞箱实验与糖水偏爱度检测大鼠行为学改变;应用免疫组化与RT-PCR检测大鼠海马区转录因子环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)及基因的表达水平。结果与正常对照组相比,模型组水平运动与垂直运动得分和糖水偏爱度明显降低(P【0.01~0.001);与模型组比较,西药对照组和中药组的水平运动与垂直运动得分和糖水偏爱度均明显升高(P【0.05~0.001);与正常对照组相比,模型组大鼠海马区CREB mRNA与蛋白表达明显下调(P【0.05);与模型组相比,西药对照组、中药组海马区CREB mRNA与蛋白表达明显上调(P【0.05)。结论β-细辛醚抗抑郁症的作用机制可能与其促进海马区CREB蛋白与mRNA的活性和表达,进而减少神经细胞凋亡有关。

柴胡疏肝散对抑郁模型大鼠海马CA3区神经元的影响

目的观察柴胡疏肝散对抑郁模型大鼠海马CA3区神经元凋亡的影响。方法 60只4～5月龄的SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、西药组和中药组,共4组,每组15只。采用孤养和慢性轻度不可预见性应激刺激制备抑郁大鼠模型。利用敞箱实验、糖水偏爱度和体重检测等指标评定大鼠行为学改变,并用电镜观察大鼠脑海马CA3区超微结构变化,流式细胞术检测CA3区的细胞凋亡数目。结果造模21 d后,与正常组相比,模型组水平运动得分、垂直运动得分、体重和糖水偏爱度明显降低(P<0.01或P<0.001);与模型组比较,西药组和中药组水平运动得分、垂直运动得分、糖水偏爱度与体重均明显升高(P<0.05或P<0.001);流式细胞检测结果显示,与正常组相比,模型组海马CA3区凋亡细胞平均数明显增加(P<0.05);与模型组相比,西药组、中药组海马CA3区凋亡细胞平均数明显减少(P<0.05)。同时,电镜观察结果也显示,海马凋亡细胞主要集中在模型组、西药组和中药组。结论柴胡疏肝散的抗抑郁作用可能与拮抗海马CA3区神经元凋亡有关。

不同年龄组抑郁症模型大鼠脑乙酰胆碱酯酶及乙酰胆碱转移酶活性的变化

目的从生化和形态两个方面探讨不同年龄组抑郁症模型大鼠脑乙酰胆碱酯酶及乙酰胆碱转移酶活性的变化。方法 Sprague-Dawley雄性大鼠,按照年龄分为幼年、成年和中年组共3组,每组20只。采用慢性轻度不可预见性应激刺激(chronic mild unp redictable stress,CMUS)与孤养相结合的方法建立抑郁症动物模型,运用敞箱实验(Open-Field)与糖水消耗量评定大鼠行为学改变,用比色法和免疫组化法测量大鼠大脑皮层、海马区乙酰胆碱转移酶(Choline acetyltransferase,ChAT)与乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase,AChE)活性,并用电镜观察大鼠脑海马CA3区超微结构变化。结果造模21 d后,与对照组相比,模型组水平运动得分、垂直运动得分、体重和糖水偏爱度明显降低(P<0.05);与对照组比较,模型组大鼠ChAT与AChE活性均升高(P<0.05);与幼年模型组、成年模型组相比,中年模型组两个酶活性均升高(P<0.05),与幼年模型组相比,成年模型组两个酶活性均升高(P<0.05)。电镜观察结果显示,海马凋亡细胞主要集中在幼年、成年和中年模型组。结论抑郁症模型ChAT与AChE活性升高,并且随着年龄的增长升高尤为显著,胆碱能神经系统与抑郁症发生发展有密切关系。

柴胡皂苷对抑郁模型大鼠海马神经元的保护作用

目的:探讨柴胡皂苷对抑郁模型大鼠行为及海马神经元细胞凋亡的保护作用。方法:采用随机数字表法将60只SD雄性大鼠分为对照组、模型组、氟西汀组和柴胡皂苷组,每组15只。采用慢性不可预见性应激刺激(CUMS)加孤养方式复制抑郁模型。于造模第2天开始,对氟西汀组和柴胡皂苷组大鼠进行灌胃给药。在实验的第1、7、14、21天,通过糖水消耗量实验检测大鼠行为学改变。采用RT-PCR法对各组大鼠脑海马神经元JNK、Bad m RNA进行定量分析。结果:对照组、柴胡皂苷组、氟西汀组第14及21天糖水偏爱度均高于模型组,JNK、Bad m RNA表达量均低于模型组,比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:柴胡皂苷可以有效控制大鼠抑郁症状,其机制可能与降低海马组织中JNK、Bad蛋白表达有关。

养寿丹对老年性痴呆模型大鼠海马神经细胞凋亡的干预作用

目的观察中药复方养寿丹对β-淀粉样蛋白1~40(Aβ1~40)和兴奋性氨基酸(鹅膏蕈氨酸)所致的老年性痴呆(AD)模型大鼠海马神经细胞凋亡的干预作用。方法将100只SD健康大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、盐酸多奈哌齐对照组、养寿丹组,采用脑基底核内立体定向联合注射Aβ1~40和兴奋性氨基酸注射诱导老年性AD动物模型,采用流式细胞术Annexin-V/PI法检测海马区神经细胞的凋亡率,采用实时定量PCR方法检测大鼠脑组织Caspase-3 mRNA的表达水平。结果与假手术组比较,模型组Caspase-3 mRNA表达明显升高(P【0.05);与模型组比较,盐酸多奈哌齐组、养寿丹组Caspase-3 mRNA表达均明显降低(P【0.05),与盐酸多奈哌齐组比较,养寿丹组Caspase-3 mRNA表达明显降低(P【0.05)。结论养寿丹能够抑制海马组织Caspase-3促凋亡基因的表达,从而发挥对AD神经细胞凋亡的保护作用。

血小板源性生长因子受体-α及其配体PDGF-A在人乳腺癌中表达的意义

目的:探讨乳腺癌组织中血小板源性生长因子受体-α(PDGFR-α)与血小板源性生长因子-A(PDGF-A)表达,两者的表达相关性,及其在淋巴结转移中的作用。方法:以免疫组织化学方法检测PDGFR-α和PDGF-A的蛋白表达,分析PDGFR-α与淋巴结转移等临床病理参数间关系。结果:在所检测的样本中PDGFR-α和PDGF-A在乳腺癌组织中的阳性表达率分别为51.7%和61.7%,其表达与淋巴结转移具有一定的相关性(P<0.01)。同时PDGFR-α的表达与PDGF-A也具有一定的相关性。结论:PDGFR-α与PDGF-A能够在乳腺癌中高表达,可能有助于肿瘤细胞发生淋巴结转移。

β-细辛醚对皮质酮诱导原代培养星形胶质细胞凋亡的干预作用

目的探讨石菖蒲有效成分β-细辛醚对皮质酮(CORT)诱导星形胶质细胞(AS)凋亡的干预作用。方法原代培养AS,经不同浓度β-细辛醚预处理后,加入CORT诱导AS损伤模型,采用MTT法检测AS的细胞活力,利用流式细胞术Annexin-V/PI法检测AS凋亡率,用实时定量RT-PCR技术检测Bax和Bcl-2表达水平。结果 CORT处理后,CORT组较空白对照组细胞活力低,凋亡率显著增加,Bax表达上调,而Bcl-2表达下调(P<0.05)。与CORT组比较,β-细辛醚组细胞活力高,凋亡率低,Bax的表达下调,Bcl-2表达上调(P<0.05)。结论β-细辛醚对CORT诱导的CORT凋亡具有抑制作用,下调Bax表达和上调Bcl-2表达可能是其作用的机制之一。

NAPP/PS1双转基因小鼠行为学表现及远志皂苷对其调控作用

目的观察APP/PS1双转基因小鼠记忆功能障碍的行为学表现和远志皂苷对其学习记忆能力的保护作用。方法将3月龄APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、盐酸多奈哌齐组、TEN低、中、高剂量组(18.5、37、74 mg·kg-1·d-1),选同月龄C57BL/6小鼠为对照组。采用Morris水迷宫法和新物体识别试验检测小鼠的学习记忆能力,采用实时定量PCR及Western印迹方法检测海马神经元Bcl-2、Bax和Caspase-3表达水平。结果与模型组相比,TEN各剂量组小鼠学习记忆能力明显改善(P<0.05);与模型组相比,TEN各剂量组Bax和Caspase-3表达水平明显下降(P<0.05),而Bcl-2表达水平显著升高(P<0.05)。结论 TEN可改善小鼠的学习记忆功能,其途径可能是通过上调Bcl-2表达,下调Bax表达,调节Bcl-2/Bax的平衡比值,降低Caspase-3表达来实现。